參數規(guī)格:
產品名稱:魏氏無綠藻PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P958
產品規(guī)格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質控 ERC 的制備
根據待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質控 NEG 的制備
根據實驗設置陰性質控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質控 NEG。 注:陰性質控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1,根據所要檢測的標準曲線及待測樣本數量,計算所需反應孔數,一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據反應孔數計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應孔數+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應孔數+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應孔數+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進行加樣:
表 3.各反應孔加樣示例
標準曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
CL-00025637(膀胱癌細胞)5×106cells/瓶×2Dcmp5ˊ-嶙酸脫氧胞苷500UBR,99%
NGF Others Mouse 小鼠 β-NGF / Beta-NGF CHO細胞裂解液 (陽性對照) 2′-脫氧胞苷 2′-Fluoro-2′-deoxycytidine 10212-20-1 1G 通用試劑
動物上皮細胞生長添加物-aEpiCGS-2-a錄化十六烷基;錄代十六烷基;十六烷基基錄;錄化鯨蠟基 HqxcdqcylpyridiniuM chloridq;Cqqpryn chloridq;Cqpccol chloridq;CqtcMiuM;Dobqndcn;Mqdilcvq;Mqrocqt;Pristccin;Pyrisqpt 6004/4/6
荷蘭白花奶牛牛肺細胞;DCL1 肺腺癌細胞,SPA-A1細胞 SCaBER(膀胱鱗癌細胞)FLUORESCEINDIwo7iumSALT熒光素二鈉鹽美國藥典級橙紅色顆粒粉末RTsigma
EB病毒轉化的B細胞;KM05017493-95-0對硝基本-α-D-半乳糖苷4-nitnOpxenYL-ALPHA-D-GALACTOPYRANOSIDE
魏氏無綠藻PCR檢測試劑盒阿糖胞苷(標準品)Cytarabine質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品 RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人分泌型球蛋白A(SIgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
達卡巴嗪Dacarbazine質量規(guī)格:>98.5%,USP31,BR,可用于細胞培養(yǎng) D-乳酸待測樣品處理試劑盒20 小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)試劑盒 Mouse α mannosidase,α Manase ELISA Kit
達卡巴嗪(標準品)Dacarbazine質量規(guī)格:>98%,標準品 MouseProteinPhosphatase,PPELISA試劑盒小鼠蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 細胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒 ,英文名: Cyt-C ELISA Kit
達沙替尼(無水)Dasatinib質量規(guī)格:含量>99.0%,無水 小鼠1酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒 ,英文名: cAMP ELISA Kit MouseLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISA試劑盒小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
卡洛芬(標準品)Carprofen質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 動物細胞/組織活性線粒體分離試劑盒10/50 載脂蛋白B48(apo-B48)ELISA試劑盒 ,英文名: apo-B48 ELISA Kit
長春質堿(標準品)Catharanthine質量規(guī)格:>98%,分析標準品 RatsolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISA試劑盒大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Humanβamyloidprecursorprotein,βAPPELISA試劑盒人淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
阿苯達唑(標準品)Albendazole質量規(guī)格:>98%,標準品 小鼠髓鞘堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 ,英文名: MBP ELISA Kit ELISAKitMyosin小鼠肌球蛋白規(guī)格:48T/96T
阿苯達唑Albendazole質量規(guī)格:>98%,BR 小鼠神經營養(yǎng)因子3(-3)ELISA檢測試劑盒MouseNeuroophin3,-3ELISAkit 96T/48T humanaldosterone,ALDELISAKit人固同(ALD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
關鍵字: 魏氏無綠藻核酸檢測試劑盒;魏氏無綠藻PCR擴增試劑盒;魏氏無綠藻PCR熒光探針試劑盒;魏氏無綠藻通用型PCR試劑盒;魏氏無綠藻PCR試劑盒;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領域,運用生物技術和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機構、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質的產品,服務生物科技領域的科學研究人員。
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