參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：流行性造血器官壞死病病毒（EHNV）核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/span>
型號(hào) : EY00P1777
產(chǎn)品規(guī)格：48T0.1 PCR管/48T 0.2PCR管
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中， 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測(cè)樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備
根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)= (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無(wú)模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注：待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。 2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
表 3.各反應(yīng)孔加樣示例
標(biāo)準(zhǔn)曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測(cè)樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測(cè)樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
三十六烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)Hexatriacontane ELISAKitSP1/PSβ1-G人特異性β1糖蛋白規(guī)格：48T/96T 人抗斑疹傷寒抗體(ai-typhus-Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： ai-typhus-Ab ELISA Kit
正十六烷(Standard for GC,>99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99.5%(GC)Hexadecane 小鼠白介素1受體Ⅰ(IL1R1)ELISA試劑盒 ，英文名： IL1R1 ELISA Kit Ratisletcellaibody,ICAELISA試劑盒大鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
正十六烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)Hexadecane 人甲1前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA檢測(cè)試劑盒humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKIT 96T/48T HumanGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISA試劑盒人糖原1酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
2-甲氧雌二醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品2-Methoxyestradiol 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 3α,MIP-3α ELISA Kit HumanKallikrein10,KLK10ELISAKit人激肽釋放酶10(KLK10)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
流行性造血器官壞死病病毒（EHNV）核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/span>普拉克索堿Pramipexole Base質(zhì)量規(guī)格：>98.5% [α32P]dCTP聚合酶標(biāo)記法酶切產(chǎn)物處理試劑盒20 豬腦心肌炎病毒(EMCV)核酸檢測(cè)試劑盒(-PCR法) 48T
普拉克索堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Pramipexole Base質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 MouseAquaporin4,AQP-4ELISA試劑盒小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T HumanPlateletFactor4,PF-4ELISA試劑盒人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
染料木素/金雀異黃酮Genistein質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR 小鼠血紅蛋白(HbCO)ELISA試劑盒 ，英文名： HbCO ELISA Kit ELISAKitPG植物1脂酰甘油規(guī)格：48T/96T
染料木素/金雀異黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品）Genistein質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit 96T/48T HumanCyclin-D2ELISAKit人細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA規(guī)格：96T/48T
縮二脲質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBiuret Humanbonealkalinephosphatase,BALPELISA試劑盒人骨堿性1酸酶(BALP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 層連蛋白/板層素(LN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
硫酸鎂無(wú)水(分子生物學(xué)級(jí))質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)Magnesium sulfate anhydrous 植物總淀粉生物酶比色法定量檢測(cè)試劑盒20 人胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)試劑盒 Human insulin-like growth factors 1,IGF-1 ELISA Kit
草酸依地普侖/草酸艾司西酞普蘭（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Escitalopram Oxalate HumanSomelysin-1,ST1ELISAKit人基質(zhì)裂解素(ST1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 人抗髓1脂抗體IgA(AMA IgA)ELISA試劑盒 ，英文名： AMA IgA ELISA Kit
消旋卡多曲質(zhì)量規(guī)格：>99.5%，EP6.2Racecadotril 小鼠補(bǔ)體片斷3b(C3b)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 RatGonadoopin-releasinghormonereceptor,GHRELISA試劑盒大鼠促性腺激素釋放激素受體(GHR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
關(guān)鍵字： 流行性造血器官壞死病病毒（EHNV）核酸;流行性造血器官壞死病病毒（EHNV）PC;流行性造血器官壞死病病毒（EHNV）PC;流行性造血器官壞死病病毒（EHNV）PC;流行性造血器官壞死病病毒（EHNV）通用;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè)，公司自成立以來(lái)，秉承""全心全意服務(wù)于科研工作者""的企業(yè)理念，立足生物科技領(lǐng)域，運(yùn)用生物技術(shù)和科研試劑，發(fā)展現(xiàn)代生物科技，為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機(jī)構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品，服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學(xué)研究人員。
公司具有對(duì)普通貨物、冷藏及冷凍倉(cāng)庫(kù)的存儲(chǔ)、包裝及運(yùn)輸能力。
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