1.細胞起源:
細胞簡稱 NCI-H295R
細胞別稱 NCI H295R; NCIH295R; H295R; H-295R; H295R-S1
細胞背景描述 NCI-H295R細胞是源于多能腎上腺皮質癌細胞系NCI-H295細胞,后者由Gazdar·A·F等建立,從腎上腺皮質的腫瘤中分離而來。NCIH295細胞經改變培養(yǎng)條件獲得了NCI-295R細胞,群體倍增時間從原來的5天減為2天。NCI-295細胞懸浮生長,而NCI-H295R細胞呈單層貼壁生長。NCI-H295R細胞保留了產生雄激素的能力,對血管緊張素Ⅱ和鉀離子有反應。
供體年齡 48歲
組織來源 器官:腎上腺
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 腎癌細胞
生長特性 貼壁細胞
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 DMEM/F12(PM150312)+ITS-G(PB180429)+10% FBS(164210-50)+1%
P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液;
6、收集細胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
消化時間 2~3分鐘
傳代比例(密度) 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
本產品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產品說明書為準,網站說明書僅供參考。