1.細(xì)胞起源：

細(xì)胞簡稱 NCI-H2227

細(xì)胞別稱 H2227; H-2227

細(xì)胞背景描述 NCI-H2227細(xì)胞是于1989年8月從一名54歲白人男性小細(xì)胞肺癌皮膚轉(zhuǎn)移灶中分離得到的。

供體年齡 男；54歲

組織來源 肺

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型 肺癌細(xì)胞

生長特性 半貼半懸

生物安全等級(jí) 1

2.培養(yǎng)及保藏：

完全培養(yǎng)基 DMEM/F12(PM150312)＋5μg/ml Insulin＋0.01mg/ml Transferrin＋30nM Sodium Selenite＋10nM Hydrocortisone＋10nM βestradiol＋2mM L-glutamine(PB180420)＋5% FBS(164210-50)＋1% P/S(PB180120)

培養(yǎng)環(huán)境 空氣，95%；CO ₂，5%

37℃

凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

液氮

3.傳代方法：

傳代步驟

1、該細(xì)胞為半貼壁半懸浮細(xì)胞，懸浮細(xì)胞是活細(xì)胞，可用離心管收集細(xì)胞懸液后，于1200 rpm（250g左右）離心收集細(xì)胞；

2、部分貼壁不牢的細(xì)胞可直接吹起使之懸??；

3、貼壁較牢固的細(xì)胞可用PBS潤洗后，在培養(yǎng)瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液（含EDTA）置于37℃培養(yǎng)箱中消化，待細(xì)胞變圓收縮后可用4~6 mL左右完全培養(yǎng)基進(jìn)行終止消化，輕輕吹散細(xì)胞后離心搜集細(xì)胞；

4、將懸浮的細(xì)胞和貼壁的細(xì)胞收集到一起混勻后按比例接種到新的培養(yǎng)瓶。

傳代比例（密度） 1:2-1:4

換液頻次 2~3次/周

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