1.細胞起源:
細胞簡稱 2V6.11
細胞背景描述 2V6.11細胞是2001年從人胚腎細胞株293 [HEK-293]衍化而來,293 [HEK-293]細胞用攜帶Zeocin-抗性標(biāo)記的質(zhì)粒pVgRXR轉(zhuǎn)染得到293pVgRXR細胞。隨后,用包含編碼E4 24K的Ad5 E4ORF6基因的質(zhì)粒pEKORF6轉(zhuǎn)染。pEKORF6從包含潮霉素抗性基因的質(zhì)粒pIndHydro衍生而來,載體包含SV40病毒序列。2V6.11細胞株最初從含潮霉素的培養(yǎng)液中用克隆環(huán)分離單克隆得到。2V6.11細胞誘導(dǎo)表達的人腺病毒E4 34KDa蛋白可通過免疫印跡法檢測;2V6.11細胞可以用作研究腺病毒E4癌基因的工具。
供體年齡 男
組織來源 腎;用腺病毒5(Ad5)DNA轉(zhuǎn)化;用腺病毒前區(qū)4質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
細胞類型 轉(zhuǎn)化細胞系
生長特性 貼壁細胞
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 MEM(含NEAA)(PM150410)+10% FBS(164210-50)+1%
P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
4.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液;
6、收集細胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
消化時間 1~2分鐘
傳代比例(密度) 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。