1.售前須知:
1、該細(xì)胞推薦使用Leibovitz's L-15培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳,會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性; 2、如您沒有無二氧化碳的培養(yǎng)箱,可使用DMEM替代Leibovitz's L-15,使用DMEM培養(yǎng)基時(shí)即可正常通入5%二氧化碳; 3、配套專用培養(yǎng)基默認(rèn)Leibovitz's L-15配置,如需DMEM配方,請(qǐng)聯(lián)系銷售下單備注更改。 4、該細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)分泌少量黑色顆粒物,不影響細(xì)胞生長(zhǎng),屬正?,F(xiàn)象。
2.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 MDA-MB-468
細(xì)胞別稱 MDA-MB 468; MDA-MB468; MDAMB468; MDA-468; MDA468; MB468;MD Anderson-Metastatic Breast-468
細(xì)胞背景描述 MDA-MB-468細(xì)胞是由Cailleau·R等人于1977年從一位患有轉(zhuǎn)移性乳腺癌的51歲黑人女性的胸腔積液中分離得到的。雖然供體組織的G6PD等位基因雜合,但MDA-MB-468細(xì)胞始終表現(xiàn)為G6PD A表型。p53MDA-MB-468細(xì)胞是由Cailleau·R等人于1977年從一位患有轉(zhuǎn)移性乳腺癌的51歲黑人女性的胸腔積液中分離得到的。雖然供體組織的G6PD等位基因雜合,但MDA-MB-468細(xì)胞始終表現(xiàn)為G6PD A表型。p53基因273位密碼子存在G→A突變,從而導(dǎo)致Arg→His替代。每個(gè)MDA-MB-468細(xì)胞上存在1×10^6個(gè)EGF受體。
供體年齡 女性,51歲
組織來源 乳腺;乳房;腺癌
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 乳腺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級(jí) 1
3.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 Leibovitz's L-15(PM151010)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,100%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
4.傳代方法:
傳代步驟 1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液;
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 2~3分鐘
傳代比例(密度) 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~36-62小時(shí)
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動(dòng)物治療等其它臨床診斷使用!以實(shí)際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。