1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡稱 EA.hy926
細(xì)胞別稱 EA. hy 926; EA hy 926; EAhy 926; EAHY-926; EA.Hy926; EA.hy926;EAhy926; EaHy926; Eahy926
細(xì)胞背景描述 EA.hy926細(xì)胞是在PEG脅迫下,將原代培養(yǎng)的人臍靜脈細(xì)胞與抗硫鳥嘌呤的A549克隆株融合,構(gòu)建的一株人臍靜脈細(xì)胞株。融合子在HAT培養(yǎng)基上生長,并以Ⅷ因子相關(guān)抗原篩選,EA.hy926細(xì)胞已經(jīng)過100次以上的群體倍增(PDLs)。電鏡照片顯示,Weibel-Palade小體的細(xì)胞質(zhì)分布以及組織特異性的細(xì)胞器,分化的內(nèi)皮細(xì)胞特性如血管生成,體內(nèi)平衡-血栓形成,血壓及炎癥反應(yīng)。
組織來源 臍靜脈/體細(xì)胞雜交
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 雜交瘤細(xì)胞
生長特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 DMEM(PM150210)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液;
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 1~2分鐘
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~12-24 hours
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動(dòng)物治療等其它臨床診斷使用!以實(shí)際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。