1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 SH-SY5Y [SHSY-5Y]
細(xì)胞別稱 SHSY5Y; SHSY-5Y; SH-Sy5y; SK-SH-SY5Y; SY5Y
細(xì)胞背景描述 SH-SY5Y細(xì)胞是于1970年建自骨瘤轉(zhuǎn)移灶的神經(jīng)母細(xì)胞瘤SK-N-SH細(xì)胞系經(jīng)3次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。SH-SY5Y細(xì)胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性,SHSY5Y細(xì)胞的飽和密度大于1×10^6/cm^2。
供體年齡 女;4歲
組織來(lái)源 腦神經(jīng)母細(xì)胞瘤,轉(zhuǎn)移部位骨髓
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 半貼半懸
生物安全等級(jí) 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 MEM/F12(PM151220)+15% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、該細(xì)胞為半貼壁半懸浮細(xì)胞,懸浮細(xì)胞是活細(xì)胞,可用離心管收集細(xì)胞懸液后,于1200 rpm(250g左右)離心收集細(xì)胞;
2、部分貼壁不牢的細(xì)胞可直接吹起使之懸浮;
3、貼壁較牢固的細(xì)胞可用PBS潤(rùn)洗后,在培養(yǎng)瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液(含EDTA)置于37℃培養(yǎng)箱中消化,待細(xì)胞變圓收縮后可用4~6 mL左右完全培養(yǎng)基進(jìn)行終止消化,輕輕吹散細(xì)胞后離心搜集細(xì)胞;
4、將懸浮的細(xì)胞和貼壁的細(xì)胞收集到一起混勻后按比例接種到新的培養(yǎng)瓶。
消化時(shí)間 5分鐘左右
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~48-72 hours
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