1.細(xì)胞起源：
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 PA317
細(xì)胞別稱 pA317
細(xì)胞背景描述 PA317細(xì)胞源自TK-NIH/3T3細(xì)胞，通過pBR322中的包裝結(jié)構(gòu)DNA(pPAM3)和pBR322中的單純皰疹病毒胸苷激酶基因共同轉(zhuǎn)染構(gòu)建而成。通過感染或轉(zhuǎn)染將逆轉(zhuǎn)錄病毒載體導(dǎo)入這些細(xì)胞，結(jié)果生成可以感染許多哺乳動(dòng)物細(xì)胞的雙嗜性載體顆粒。PA317細(xì)胞生成的病毒顆粒已成功地用于將基因?qū)肴祟?，可能因?yàn)橛糜跇?gòu)建PA317細(xì)胞而轉(zhuǎn)入的DNA丟失，能夠包裝逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的PA317細(xì)胞百分比隨傳代而減少。在含0.03mM次黃嘌呤、0.001mM氨甲喋呤和0.02mM胸苷的培養(yǎng)基中短暫(大約5天)選擇，可以選出保留了包裝功能的細(xì)胞。選擇后，PA317細(xì)胞應(yīng)在HT培養(yǎng)基(0.03mM次黃嘌呤、0.02mM胸苷)中培養(yǎng)4天，以稀釋殘留的氨甲喋呤，此后PA317細(xì)胞不需選擇可以穩(wěn)定至少1個(gè)月。
供體年齡 胚胎
組織來源 胚胎
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級(jí) 1
2.培養(yǎng)及保藏：
完全培養(yǎng)基 DMEM(PM150210)＋10% FBS(164210-50)＋1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣，95%；CO 2，5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法：
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液；
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄；
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞；
4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶；
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液；
6、收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm/min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄；
7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
傳代比例（密度） 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動(dòng)物治療等其它臨床診斷使用！以實(shí)際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)，網(wǎng)站說明書僅供參考。