1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡稱 NR8383 [AgC11x3A; NR8383.1]
細(xì)胞別稱 NR-8383; NR 8383; NR8383.1; AgC11x3A; Normal Rat, August 3, 1983
細(xì)胞背景描述 NR8383細(xì)胞來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細(xì)胞,NR8383細(xì)胞在Gerbil肺細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)液存在下培養(yǎng)了8-9個月。隨后,NR8383細(xì)胞不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法,從單個細(xì)胞克隆并亞克隆NR8383細(xì)胞,并3次用軟瓊脂亞克隆。NR8383細(xì)胞表現(xiàn)出巨噬細(xì)胞的特性:吞噬酵母多糖和銅綠、非特異性脂酶活性、Fc受體、氧化降解;分泌IL-1、TNF-β和IL-6,可重復(fù)地響應(yīng)外源生長因子。NR8383細(xì)胞響應(yīng)博萊霉素,分泌TNF-β前體。NR8383細(xì)胞在博萊霉素刺激下,TNF-β mRNA表達(dá)也上升。NR8383細(xì)胞對內(nèi)毒素敏感,1-10ng/ml的LPS水平抑制增生達(dá)50%。即使達(dá)到0.001mg/ml的水平,LPS抑制還是無毒且在后續(xù)過程中可逆的。NR8383細(xì)胞提供了高響應(yīng)的肺泡巨噬細(xì)胞的均一來源,可以用于體外研究巨噬細(xì)胞相關(guān)活性,此細(xì)胞懸浮-貼壁混合生長。
組織來源 肺;巨噬細(xì)胞;肺泡
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 自發(fā)永生化細(xì)胞
生長特性 半貼半懸
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 Ham's F-12K(PM150910)+20% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、該細(xì)胞為半貼壁半懸浮細(xì)胞,懸浮細(xì)胞是活細(xì)胞,可用離心管收集細(xì)胞懸液后,于1200 rpm(250g左右)離心收集細(xì)胞;
2、部分貼壁不牢的細(xì)胞可直接吹起使之懸浮;
3、貼壁較牢固的細(xì)胞可用PBS潤洗后,在培養(yǎng)瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液(含EDTA)置于37℃培養(yǎng)箱中消化,待細(xì)胞變圓收縮后可用4~6 mL左右完全培養(yǎng)基進(jìn)行終止消化,輕輕吹散細(xì)胞后離心搜集細(xì)胞;
4、將懸浮的細(xì)胞和貼壁的細(xì)胞收集到一起混勻后按比例接種到新的培養(yǎng)瓶。
傳代比例(密度) 2×10^5-5×10^5cells/mL
換液頻次 2~3次/周
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。