1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡稱 NCI-H292
細(xì)胞別稱 H292; H-292; NCI-HUT-292; Hut292; NCIH292
細(xì)胞背景描述 NCI-H292細(xì)胞源自肺支氣管黏液上皮樣癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶;先用成份限定的培養(yǎng)基分離得到,然后換成含血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)。培養(yǎng)條件下,NCI-H292細(xì)胞保留了黏液上皮的特性,可從其超微結(jié)構(gòu)的表現(xiàn)和多種鱗狀上皮分化標(biāo)記的表達(dá)而判斷。NCI-H292細(xì)胞支持HBV的生長,左旋多巴脫羧酶陰性。NCI-H292細(xì)胞可以作為篩選模型,將人類亞基因組片段轉(zhuǎn)染入細(xì)胞來研究HBV及其自身基因在病毒性肝炎和肝癌發(fā)生中的作用。NCI-H292細(xì)胞角蛋白、波形蛋白、黏液洋紅染色陽線,但神經(jīng)絲三聯(lián)蛋白陰性。
供體年齡 女;32歲
組織來源 肺粘膜上皮細(xì)胞癌;肺
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 肺癌細(xì)胞
生長特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液;
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 2~3分鐘
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~48 hours
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動(dòng)物治療等其它臨床診斷使用!以實(shí)際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。