1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 MSTO-211H
細(xì)胞別稱 MSTO-211 H; MSTO211H; MSTO-211; 211H細(xì)胞背景描述 MSTO-211H細(xì)胞是于1985年從一位肺二相間皮瘤患者的胸水中建株的,這個(gè)病人接受過多種藥物聯(lián)合前期化療。MSTO-211H細(xì)胞具有高親和力的EGF結(jié)合位點(diǎn),并表達(dá)神經(jīng)元特異性烯醇酶(NSE)及人絨毛膜促性腺激素(HCG)的α與β亞基;未檢測(cè)到左旋多巴胺脫羧酶(DDC)、邦巴辛與神經(jīng)Tensin。MSTO-211H細(xì)胞過表達(dá)c-myc原癌基因,并沒有觀察到基因重排或擴(kuò)增。MSTO-211H細(xì)胞V-src、v-abl、v-erbB、c-raf1、Ha-ras、Ki-ras和N-ras的表達(dá)呈陽(yáng)性;未檢測(cè)到N-myc、L-myc、c-myb、c-fos、v-fes、v-fms和v-sis癌基因的表達(dá)。MSTO211H細(xì)胞的飽和濃度能達(dá)4×10^5/cm^2,但達(dá)到這個(gè)濃度時(shí)就會(huì)
從表面脫落。
供體年齡 男;62歲
組織來源 二相間皮瘤肺轉(zhuǎn)移灶
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 肺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級(jí) 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液;
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 1~2分鐘
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~30-40 hours
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動(dòng)物治療等其它臨床診斷使用!以實(shí)際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。