1.細胞起源:
細胞簡稱 LS 174T [LS174T]
細胞別稱 Ls174T; LS174t; Ls-174-T; LS-174-T; LS 174 T; LS-174T; Ls-174T; LS 174T;LS-174; LS174
細胞背景描述 LS 174T細胞是LS 180細胞的胰蛋白酶化變種。LS 174T細胞比親本更易傳代,像LS 180細胞一樣生成大量的癌胚抗原(CEA)。電鏡研究表明,LS 174T細胞有豐富的微絲和細胞質(zhì)粘液素液泡。LS 174T細胞直腸抗原3陽性;p53抗原表達陰性,但mRNA表達陽性。LS 174T細胞角蛋白染色陽性;LS 174T細胞癌基因c-myc、N-myc、H-ras、N-ras、Myb和fos的表達呈陽性;癌基因kras和sis的表達未做檢測。
供體年齡 女;58歲
組織來源 直腸;結直腸腺癌
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 腸癌細胞
生長特性 貼壁細胞
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 MEM(ATCC改良)(PM150467)+10% FBS(164210-50)+1%
P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液;
6、收集細胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
消化時間 2~3分鐘
傳代比例(密度) 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時間 ~30-40 hour
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產(chǎn)品說明書為準,網(wǎng)站說明書僅供參考。