LM/TK(LMTK-)(小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞)
1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡稱 LM/TK [LMTK-]
細(xì)胞別稱 L-M[TK-]; LM TK negative; L-M (TK-); L M (TK-); LM(TK-); LM(tk-);LM-TK-; LMTK-; L cells (TK-); L(TK-); L(tk-)
供體年齡 100天
組織來源 皮下結(jié)締組織;乳暈和脂肪
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 自發(fā)永生化細(xì)胞
生長特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 DMEM(PM150210)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、該細(xì)胞為半貼壁半懸浮細(xì)胞,懸浮細(xì)胞是活細(xì)胞,可用離心管收集細(xì)胞懸液后,于1200 rpm(250g左右)離心收集細(xì)胞;
2、部分貼壁不牢的細(xì)胞可直接吹起使之懸??;
3、貼壁較牢固的細(xì)胞可用PBS潤洗后,在培養(yǎng)瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液(含EDTA)置于37℃培養(yǎng)箱中消化,待細(xì)胞變圓收縮后可用4~6 mL左右完全培養(yǎng)基進(jìn)行終止消化,輕輕吹散細(xì)胞后離心搜集細(xì)胞;
4、將懸浮的細(xì)胞和貼壁的細(xì)胞收集到一起混勻后按比例接種到新的培養(yǎng)瓶。
消化時間 2~3分鐘
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
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