Cy7 (Cyanine 7) 是一種近紅外花青素?zé)晒馊玖稀S捎谒臒晒獠ㄩL(zhǎng)(Em:770nm)恰好處于肌體組織近紅外窗口 I 的區(qū)域(肌體的血液,體液和組織此區(qū)域背景熒光弱,而長(zhǎng)波長(zhǎng)穿透性強(qiáng)),所以Cy7常常應(yīng)用于小動(dòng)物活體體內(nèi)成像中。Cy7熒光肉眼不可見(jiàn),并且顯微鏡觀察時(shí)需要近紅外濾片,很多熒光顯微鏡(包括共聚焦顯微鏡)并不配備,但是流式細(xì)胞儀(flow cytometry)常常配備Cy7濾片組。Cy7是常用熒光染料,Cy7可以用來(lái)標(biāo)記核酸,蛋白,抗體,多肽等,它是最常見(jiàn)的小動(dòng)物顯影劑之一。
NHS活化酯 (N-羥基琥珀酰亞胺酯,N-hydroxysuccinimide ester,succinimidyl ester)是生物標(biāo)記反應(yīng)中最常用的活化基團(tuán)。它活化Cy7分子中的羧基,讓它可以和目標(biāo)生物分子上的胺基(伯胺或者仲胺)反應(yīng)生成穩(wěn)定的酰胺鍵,從而把Cy7分子標(biāo)記到生物大分子上。由于游離胺基是蛋白,抗體,多肽表面的常見(jiàn)官能團(tuán)(來(lái)自于賴胺酸側(cè)鏈),Cy7-NHS可以和它們直接反應(yīng)。核酸分子中天然不帶游離胺基,只有胺基修飾過(guò)的RNA或者DNA才可以和Cy7-NHS反應(yīng)。另外,Cy7-NHS也可以標(biāo)記聚合物胺基,納米粒表面胺基等。
Cy7-NHS活化酯的水溶性較低,所以在水相的標(biāo)記反應(yīng)體系內(nèi)需要使用有機(jī)共溶劑,常用有機(jī)溶劑包括DMF,DMSO和乙腈等。如需標(biāo)記的分子對(duì)有機(jī)溶劑敏感,可選擇磺化花青素(sulfonated cyanine),即sulfo-Cy7-NHS活化酯。兩者的光譜性質(zhì)幾乎一致,因此大部分應(yīng)用可相互替換。兩者的主要區(qū)別在于:磺化染料是水溶性的,在水相的標(biāo)記反應(yīng)體系內(nèi)不需要使用有機(jī)共溶劑,并且降低染料在水中聚集的可能性,增強(qiáng)標(biāo)記效率。
Cy7-NHS標(biāo)記后的產(chǎn)物Ex/Em是740/770nm。和它具有相似熒光特性的染料包括Alexa Fluor 750,DyLight 755等。
英文名:Cyanine7 NHS ester
Cy7 NHS
NHS-Cy7
中文名:花青素CY7活性酯
花青素CY7琥珀酰亞胺酯
CAS號(hào):2408482-09-5
分子式:C41H48N3BF4O4
分子量:733.64
結(jié)構(gòu)式:
外觀:深綠色固體
溶解度:溶于有機(jī)溶劑(DMSO、DMF、二氯甲烷),在水中溶解度低
純度:95%
儲(chǔ)存條件:-20°C避光避濕
ex/em:740/770 nm
消光系數(shù)(ε):199000 L?mol?1?cm?1
量子產(chǎn)率(Φ):0.3
簡(jiǎn)介:胺活性菁7近紅外熒光染料,Cy7的改良類似物。近紅外熒光團(tuán)可用于利用生物組織的近紅外窗口-該光譜區(qū)域中組織的透明度增加,從而可以進(jìn)行活體成像。該試劑可用于制備氰基7標(biāo)記的生物分子,用于隨后的各種體內(nèi)研究和藥物設(shè)計(jì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)。氰基7的結(jié)構(gòu)具有中心聚炔鏈的剛性設(shè)計(jì)。這種分子增強(qiáng)使量子產(chǎn)率比母體結(jié)構(gòu)提高20%,從而提高熒光亮度。該試劑需要有機(jī)共溶劑進(jìn)行標(biāo)記。水溶性氰基7 NHS酯也可用,建議用于蛋白質(zhì)近紅外標(biāo)記。
注意事項(xiàng):
1)NHS ester基團(tuán)對(duì)濕度比較敏感,務(wù)必干燥保存產(chǎn)品。使用前產(chǎn)品需放到室溫回溫至少20分鐘。
2)使用不含氨基的緩沖體系。比如磷酸鈉緩沖液(PBS),Hepes緩沖液,碳酸氫鈉緩沖液,或硼酸緩沖液等。不要使用任何含伯胺或仲胺的緩沖液,比如Tris,甘氨酸等。高濃度咪唑(imidazole)也會(huì)影響反應(yīng)。
3)標(biāo)記反應(yīng)不要放在強(qiáng)光下,因?yàn)榇蟛糠譄晒饣衔镌趶?qiáng)光下長(zhǎng)時(shí)間照射會(huì)緩慢光漂泊(photobleaching)。
相關(guān)化合物:
Cy7 NHS ester
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Methyltetrazine-NHS ester
1644644-96-1
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1393350-27-0
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107348-47-0
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1469277-96-0
Cy7.5 NHS ester
1469278-04-3
Cyanine7 NHS ester
1432019-64-1
Cyanine7 NHS ester
2408482-09-5
關(guān)鍵字: 2408482-09-5;Cyanine7 NHS ester;Cy7 NHS;花青素CY7活性酯;
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