1.細胞起源：

細胞簡稱 C-33 A

細胞別稱 C33A; C33a; C33-A; C-33-A; C-33A; C33

細胞背景描述 C-33 A細胞是由N·Auersperg從宮頸癌切片中建立的一系列細胞株中的一株。C-33 A細胞一開始就表現(xiàn)出亞二倍體核型及上皮細胞形態(tài)，C-33 A細胞經(jīng)連續(xù)傳代可以觀察到核型不穩(wěn)定。C-33 A細胞存在成視網(wǎng)膜細胞瘤蛋白(pRB)，但大小不正常；C-33 A細胞p53表達上調(diào)，且有一個273位密碼子的點突變導致Arg→Cys的替換。

供體年齡 女；66歲

組織來源 宮頸癌

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

細胞類型 腫瘤細胞

腫瘤類型 宮頸癌細胞

生長特性 貼壁細胞

生物安全等級 1

2.培養(yǎng)及保藏：

完全培養(yǎng)基 MEM（含NEAA）(PM150410)＋10% FBS(164210-50)＋1%P/S(PB180120)

培養(yǎng)環(huán)境 空氣，95%；CO 2，5%

37℃

凍存條件 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

液氮

3.傳代方法：

傳代步驟 1、吸出原培養(yǎng)液；

2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄；

3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞；

4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶；

5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細胞使之脫壁并在液體里反復吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液；

6、收集細胞懸液離心，1200rpm/min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄；

7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。

消化時間 1~2分鐘

傳代比例（密度） 1:3-1:4

換液頻次 2~3次/周

倍增時間 ~32-48 hours