1.售前須知：

該細(xì)胞貼壁松散，操作時(shí)請盡量輕柔；換液時(shí)需預(yù)熱培養(yǎng)基；收貨如有大塊脫落的細(xì)胞團(tuán)，為正常現(xiàn)象，請按照收貨注意事項(xiàng)處理。

2.細(xì)胞起源：

細(xì)胞簡稱 C2C12

細(xì)胞別稱 C2c12; C2-C12; C12

細(xì)胞背景描述 C2C12細(xì)胞是由D·Yaffe和O·Saxel建立的小鼠成肌細(xì)胞株的亞克??；C2C12細(xì)胞分化很快，形成可伸縮的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白2(BMP-2)處理C2C12細(xì)胞，會導(dǎo)致C2C12細(xì)胞的分化途徑從成肌細(xì)胞轉(zhuǎn)換為成骨細(xì)胞。檢測表明，C2C12細(xì)胞肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。

供體年齡 不詳

組織來源 骨骼?。黄废担篊3H

細(xì)胞形態(tài) 成肌細(xì)胞樣

細(xì)胞類型 自發(fā)永生化細(xì)胞

生長特性 貼壁細(xì)胞

生物安全等級 1

3.培養(yǎng)及保藏：

完全培養(yǎng)基 DMEM(PM150210)＋10% FBS(164210-50)＋1% P/S(PB180120)

培養(yǎng)環(huán)境 空氣，95%；CO 2，5%

37℃

凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

液氮

4.傳代方法：

傳代步驟 1、吸出原培養(yǎng)液；

2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄；

3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞；

4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶；

5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液；

6、收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm/min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄；

7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。

消化時(shí)間 1~2分鐘

傳代比例（密度） 1:3-1:4

換液頻次 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~20小時(shí)

5.背景資料補(bǔ)充說明：

細(xì)胞保藏中心 ATCC; CRL-1772 BCRC; 60083 BCRJ; 0058 DSMZ; ACC-565

6.收貨注意事項(xiàng)：

若收到細(xì)胞大片脫落，請按照如下處理方式處理： 1、將培養(yǎng)瓶內(nèi)所有培養(yǎng)基 轉(zhuǎn)入無菌離心管，離心收集細(xì)胞（1200rpm 3min）去除舊培養(yǎng)基； 2、用 PBS 重懸細(xì)胞，將所有細(xì)胞收集到一個(gè)離心管中，再次離心（1200rpm 3min）去除PBS； 3、加入1ml左右0.25%胰酶重懸細(xì)胞，混勻即可，不能吹打太多次，放入培養(yǎng)箱消化3分鐘。 4、消化好后，用移液槍輕輕吹打細(xì)胞懸液，使細(xì)胞團(tuán)分散，迅速加入3-5ml含血清的培養(yǎng)基混勻以終止消化，離心（1200rpm 3min）去除胰酶； 5、加入5ml左右的細(xì)胞相應(yīng)的完全培養(yǎng)基混勻，按比例接入無菌培養(yǎng)瓶/皿中（首次傳代推薦1:3）。