組織無機(jī)磷含量測(cè)定試劑盒說明書
分光光度法 50管/48樣
注 意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
組織無機(jī)磷含量測(cè)定試劑盒測(cè)定意義：
無機(jī)磷主要指磷酸根，參與生物體內(nèi)多種代謝，包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質(zhì)磷酸化和脫磷酸化等等，此外促進(jìn)碳水化合物的合成、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)運(yùn)。
測(cè)定原理：
鉬藍(lán)與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質(zhì)，通過測(cè)定660nm光吸收可計(jì)算無機(jī)磷含量。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配置：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前配制，加入20 mL蒸餾水，充分溶解后加入試劑二（全部），混勻。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1支， 4℃保存。
無機(jī)磷提?。?/span>
按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。10000rpm，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
測(cè)定：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到660 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 打開水浴鍋，調(diào)節(jié)溫度到40℃。
3. 空白管：取EP管，依次加入500μL蒸餾水，500μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測(cè)定吸光度，記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，依次加入50μL標(biāo)準(zhǔn)液，450μL蒸餾水，500μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測(cè)定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 測(cè)定管：取EP管，依次加入50μL上清液，450μL蒸餾水，500μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測(cè)定吸光度，記為A測(cè)定管。
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
組織無機(jī)磷含量測(cè)定試劑盒組織無機(jī)磷含量計(jì)算公式：
（1） 按照蛋白含量計(jì)算
無機(jī)磷含量(μmol/mg prot)= [C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)]×V總÷Cpr
=1×(A測(cè)定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)÷Cpr
（2） 按照樣本質(zhì)量計(jì)算
無機(jī)磷含量(μmol/g )= [C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)]×V總÷W
=1×(A測(cè)定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)÷W
C標(biāo)準(zhǔn)液：1mmol/L；V總：上清液總體積，1mL=0.001 L；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g。
注意事項(xiàng)：
1. 試劑三需臨用前配制，并且當(dāng)天使用完畢。
2. 40min內(nèi)完成比色。
3. 最低檢出限為10μmol/L。
關(guān)鍵字： 組織無機(jī)磷含量測(cè)定試劑盒;組織無機(jī)磷含量測(cè)定試劑盒;
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí)，也建立了一套集技術(shù)支持，物流售后服務(wù)等多部門聯(lián)動(dòng)服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個(gè)客戶，雅吉生物的試劑盒，在國內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用，深受廣大科研人員好評(píng)，先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
本公司鄭重承諾：質(zhì)量保證、供貨及時(shí)、服務(wù)周到。