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乳酸脫氫酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)試劑盒,Lactate Dehydrogenase
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乳酸脫氫酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)試劑盒

價(jià)格 1500
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最小起訂量 1盒
發(fā)貨地 上海
更新日期 2024-12-23
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產(chǎn)品詳情

中文名稱(chēng):乳酸脫氫酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)試劑盒英文名稱(chēng):Lactate Dehydrogenase
CAS:保存條件: 2-8℃
產(chǎn)品類(lèi)別: 試劑盒 生化試劑盒
2024-12-23 乳酸脫氫酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)試劑盒 Lactate Dehydrogenase 1盒/1500RMB 1500 2-8℃ 試劑盒 生化試劑盒


乳酸脫氫酶Lactate DehydrogenaseLDH試劑盒說(shuō)明書(shū)

                                                                

分光光度法 50/24


    意:正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義:

LDHEC 1.1.1.27)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是糖酵解途徑的末端酶,催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng),伴隨著NAD+/NADH之間互變。

 

乳酸脫氫酶Lactate DehydrogenaseLDH試劑盒測(cè)定原理:

LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸進(jìn)一步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在堿性溶液中顯棕紅色,顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

 

試劑的組成和配制:

提取液:30mL×1瓶, 4℃保存;

試劑一:液體15 mL×1瓶, 4℃保存; 

試劑二:粉劑×1支,-20℃保存,用時(shí)加入10μL試劑五和1.3 mL蒸餾水充分溶解備用,用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融

試劑三:液體15 mL×1瓶,4℃保存; 

試劑四:液體50 mL×1瓶,4℃保存; 

試劑五:液體100μL×1,4℃保存;

 

樣品測(cè)定的準(zhǔn)備:

1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為1000~50001的比例(建議2000萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

組織:按照組織質(zhì)量(g:提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。

 

乳酸脫氫酶Lactate DehydrogenaseLDH試劑盒測(cè)定步驟

1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm,蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測(cè)定(在EP管中加入下列試劑)

試劑名稱(chēng)(μL)

測(cè)定管

對(duì)照管

樣本

50

50

試劑一

250

250

試劑二

50


蒸餾水


50

充分混勻,37(哺乳動(dòng)物)或25(其它物種)水浴15min

試劑三

250

250

充分混勻,37(哺乳動(dòng)物)或25(其它物種)水浴15min

試劑四

750

750

充分混勻,室溫靜置15分鐘,450 nm下測(cè)定吸光度,計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管需要設(shè)一個(gè)對(duì)照管。

 

LDH活力單位的計(jì)算:

1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸曲線(xiàn), y = 0.9108x+0.0037   (x標(biāo)準(zhǔn)品濃度,umol/mL;yΔA)。

2、血清(漿)LDH活力的計(jì)算

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個(gè)酶活力單位。

LDHnmol/min/mL=ΔA-0.0037÷0.9108÷T×103=73.2×ΔA

3、細(xì)胞、細(xì)菌和組織中LDH活力的計(jì)算

1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1 nmol丙酮酸定義為一個(gè)酶活力單位。

LDHnmol/min/mg prot=[ΔA-0.0037÷0.9108×V1]÷(V1×Cpr)÷T×103 =73.2×ΔA÷Cpr

需要另外測(cè)定,建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒。

2 按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個(gè)酶活力單位。

LDHnmol/min/g鮮重=[ΔA-0.0037÷0.9108×V1]÷(W×V1÷V2)÷T×103 =73.2×ΔA÷W

3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:

單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個(gè)酶活力單位。

LDHnmol/min/104 cell= [ΔA-0.0037÷0.9108×V1]÷(2000×V1÷V2)÷T×103 =0.037×ΔA

V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.05mL;V2:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,15 min;Cpr:蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣質(zhì)量,g2000:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),2000萬(wàn)。

1、 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)線(xiàn)性范圍為:0.1 umol/mL -2 umol/mL。

2、 ΔA線(xiàn)性范圍為:0.01 -2。

 


關(guān)鍵字: 乳酸脫氫酶(Lactate Dehydr;乳酸脫氫酶(Lactate Dehydr;

公司簡(jiǎn)介

上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域,提供科研類(lèi)試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過(guò)公司各部門(mén)員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度,深得新老客戶(hù)厚愛(ài),本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神,堅(jiān)持以?xún)?yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國(guó)內(nèi)外廣大用戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。 公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí),也建立了一套集技術(shù)支持,物流售后服務(wù)等多部門(mén)聯(lián)動(dòng)服務(wù)體系,努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個(gè)客戶(hù),雅吉生物的試劑盒,在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用,深受廣大科研人員好評(píng),先后在權(quán)威雜志文章中被引用。 本公司鄭重承諾:質(zhì)量保證、供貨及時(shí)、服務(wù)周到。
成立日期 2011-04-17 (14年) 注冊(cè)資本 50.000000萬(wàn)人民幣
員工人數(shù) 50-100人 年?duì)I業(yè)額 ¥ 100萬(wàn)以?xún)?nèi)
主營(yíng)行業(yè) 抗體,抗體 經(jīng)營(yíng)模式 試劑,定制,試劑,定制
  • 上海雅吉生物科技有限公司
VIP 3年
  • 公司成立:14年
  • 注冊(cè)資本:50.000000萬(wàn)人民幣
  • 企業(yè)類(lèi)型:有限責(zé)任公司(自然人投資或控股)
  • 主營(yíng)產(chǎn)品:抗體,細(xì)胞,生物試劑等
  • 公司地址:上海市閔行區(qū)元江路5500號(hào)第 1幢5658室
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