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脲酶(Urease,UE)測定試劑盒,Urease
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脲酶(Urease,UE)測定試劑盒

價格 1500
包裝 1盒
最小起訂量 1盒
發(fā)貨地 上海
更新日期 2024-12-25
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產(chǎn)品詳情

中文名稱:脲酶(Urease,UE)測定試劑盒英文名稱:Urease
CAS:保存條件: 2-8℃
產(chǎn)品類別: 試劑盒 生化試劑盒
2024-12-25 脲酶(Urease,UE)測定試劑盒 Urease 1盒/1500RMB 1500 2-8℃ 試劑盒 生化試劑盒

脲酶UreaseUE)測定試劑盒說明書

                                             分光光度法50/24


    意: 正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義:

UE能夠水解尿素,產(chǎn)生氨和碳酸。UE活性與有機(jī)物質(zhì)含量、全氮和速效含量呈正相關(guān),反應(yīng)了氮素狀況。

 

脲酶UreaseUE)測定試劑盒測定原理:

利用靛酚藍(lán)比色法測定脲酶水解尿素產(chǎn)生的NH3-N。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml比色皿、研缽、冰、和蒸餾水。

 

試劑的組成和配制:

提取液液體50mL×1瓶,4℃保存;

試劑:粉劑×1瓶,臨用前加入5mL蒸餾水,充分溶解待用,4℃保存;用不完的試劑4℃保存;

試劑:液體12mL×1瓶,4℃保存;

試劑A液:液體×1,4保存;試劑B液:液體×1瓶,4℃保存;臨用前將A液倒入B液中混合,待用;用不完的試劑4℃保存一周;

試劑:液體5mL×1瓶,4℃保存;

 

脲酶Urease,UE)測定試劑盒樣本的前處理 

1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4離心10min,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質(zhì)量(g:提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

 

測定步驟:

1、 分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至578nm,蒸餾水調(diào)零。

2、酶促反應(yīng)

試劑名稱

測定管

對照管

樣本μL

20

20

試劑μL

90


蒸餾水(μL


90

試劑μL

190

190

混勻,放入37水浴1h后,10000g 25離心10min,取上清液。

 

2、將上清液稀釋10倍(取0.1mL上清液,加入0.9mL蒸餾水)。

3、測氨量(在1ml比色皿中加入下列試劑)


測定管

對照管

稀釋后的上清液(μL

400

400

試劑μL

75

75

試劑μL

75

75

充分混勻,室溫放置20min

蒸餾水(μL

450

450

混勻,于578nm,蒸餾水調(diào)零,讀吸光值A,計算ΔA=A測定管-A對照管每個測定管設(shè)一個對照管。

 

脲酶UreaseUE)測定試劑盒UE活力計算:

標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 0.0915x +0.0373;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μg/mL),y吸光值A。

1、血清(漿)UE活力的計算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘產(chǎn)生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

UE活力(μg/min/mL(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V反總÷V÷T=27.32×(ΔA -0.0373)

單位的定義:每天g土樣中產(chǎn)生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞1μg NH3-N活力的計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘產(chǎn)生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

UE活力(μg/min/mg prot)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V反總÷(V×Cpr)÷T =27.32×(ΔA -0.0373) ÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘產(chǎn)生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

UE活力(μg/min/ g 鮮重)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V反總÷(W× V÷V樣總)÷T =27.32×(ΔA -0.0373) ÷W

3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘產(chǎn)生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

UE活力(μg/min/104 cell)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V反總÷(500×V÷V樣總) ÷T=0.0546×ΔA

10:稀釋倍數(shù);T:反應(yīng)時間,60min V反總:反應(yīng)體系總體積0.3mL;V樣:加入反應(yīng)體系中樣本體積0.02mL;V樣總:提取液體積,1mL;Cpr樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL; W:樣質(zhì)量, g;500細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500萬。

 


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公司簡介

上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域,提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度,深得新老客戶厚愛,本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神,堅持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。 公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時,也建立了一套集技術(shù)支持,物流售后服務(wù)等多部門聯(lián)動服務(wù)體系,努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個客戶,雅吉生物的試劑盒,在國內(nèi)眾多重點(diǎn)實驗室廣泛使用,深受廣大科研人員好評,先后在權(quán)威雜志文章中被引用。 本公司鄭重承諾:質(zhì)量保證、供貨及時、服務(wù)周到。
成立日期 2011-04-17 (14年) 注冊資本 50.000000萬人民幣
員工人數(shù) 50-100人 年營業(yè)額 ¥ 100萬以內(nèi)
主營行業(yè) 抗體,抗體 經(jīng)營模式 試劑,定制,試劑,定制
  • 上海雅吉生物科技有限公司
VIP 3年
  • 公司成立:14年
  • 注冊資本:50.000000萬人民幣
  • 企業(yè)類型:有限責(zé)任公司(自然人投資或控股)
  • 主營產(chǎn)品:抗體,細(xì)胞,生物試劑等
  • 公司地址:上海市閔行區(qū)元江路5500號第 1幢5658室
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