Matrigel 基底膜基質(zhì),無酚紅,Matrigel基質(zhì)會有色差變化(淡黃色到深紅色),是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5%CO2平衡后色差即會減少。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使Matrigel分散均勻。所有操作均需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,試劑瓶瓶蓋可用70%乙醇擦拭,并自然干燥。應(yīng)使用預(yù)冷的移液器以保證Matrigel呈勻漿狀。
推薦包被與成膠方法:
注意:為了保證Matrigel基質(zhì)膜的成膠性能與穩(wěn)定性,稀釋濃度不應(yīng)低于1:3,可用無血清培養(yǎng)基稀釋,Matrigel成膠后立即使用。
薄膠成膠方法:
1.凍融后,用預(yù)冷的移液槍頭混勻Matrigel基質(zhì)成勻漿狀。
2.將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上,加入濃度為50μL/cm2生長面積的Matrigel基質(zhì)。
3.在37℃放置30分鐘,即可使用。
厚膠成膠方法:
1.凍融后,用預(yù)冷的移液槍頭混勻Matrigel基質(zhì)成勻漿狀。
2.將需要使用的培養(yǎng)板置于冰浴,將培養(yǎng)的細(xì)胞與Matrigel基質(zhì)混合,用移液槍頭使其懸浮于基質(zhì)中。加入濃度為150-200μL/cm2生長面積的Matrigel基質(zhì)。
3.在37℃放置30分鐘,可成膠??梢约尤爰?xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì),也可使細(xì)胞直接生長在膠表面。
薄層包被方法:
1.凍融后,用預(yù)冷的移液槍頭混勻Matrigel基質(zhì)成勻漿狀。
2.根據(jù)使用需要,采用無血清培養(yǎng)基稀釋Matrigel基質(zhì)。根據(jù)實驗需要確定包被濃度。
3.將稀釋的Matrigel基質(zhì)包被于所需的培養(yǎng)器皿中,包被量至少覆蓋整個器皿的生長表面。室溫下孵育1小時。
4.去除未結(jié)合的Matrigel,用無血清培養(yǎng)基輕輕地沖洗。
兔血漿 茶黃素 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1IgG
霉菌培養(yǎng)基 茶黃素-3-沒食子酸 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β2IgG
孟加拉紅培養(yǎng)基虎紅培養(yǎng)基 茶黃素-3'-沒食子 磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶γ1IgG
馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養(yǎng)基不含氯霉素 茶黃素-3,3'-雙沒 磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶γ1IgG
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液 朝藿定A1 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1IgG
品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基 次黃嘌呤 兔抗人、大、小鼠磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1IgG
營養(yǎng)瓊脂NA 草質(zhì)素苷 兔抗人、大、小鼠磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1IgG
營養(yǎng)瓊脂平板NA 常春藤苷C 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1IgG
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