一、細(xì)胞基本屬性 |
細(xì)胞名稱 | 人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
細(xì)胞別稱 | CCRF-CEM[CCRF CEM]; CCRF/CEM; CCRFCEM; CCRF.CEM; CCRF CEM; CCRF; CEM; CEM-CCRF; CEM-CCRF (CAMR); CCRF/CEM/O; CEM/0; CEM-0; CCRF-CEM/S; GM03671 |
細(xì)胞貨號(hào) | SNL-051 |
細(xì)胞種屬 | 人 |
生長情況 | 懸浮 |
培養(yǎng)條件 | 1640+10%FBS+1%雙抗 |
培養(yǎng)環(huán)境 | air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% |
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作 |
換液周期 | 2-3天 |
培養(yǎng)基體積 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
傳代比例 | 1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定) |
傳代方法 | 1.混勻細(xì)胞,收集細(xì)胞培養(yǎng)基,900rpm離心3-5min,棄上清; 2.加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里; 3.補(bǔ)足完全培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng); |
注意事項(xiàng) | 部分懸浮細(xì)胞會(huì)附著瓶底,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)基或者吹打細(xì)胞面就會(huì)脫落,不需要胰酶消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),更適合吹打細(xì)胞操作,吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。 |
三、細(xì)胞凍存操作 |
凍存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦); |
凍存規(guī)格 | 200-300萬/ml,1ml每管 |
凍存方法 | 1. 離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞; 2. 將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管; 3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存 |
注意事項(xiàng) | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案 |
Tips:
1.細(xì)胞懸浮圓形生長,偶有小聚團(tuán),部分細(xì)胞附著瓶底;
2.圓形透亮、細(xì)胞膜完整的細(xì)胞是活細(xì)胞,如果無法判斷,可以取少量細(xì)胞用臺(tái)盼藍(lán)染色后計(jì)數(shù)確定細(xì)胞活率;
3.懸浮細(xì)胞密度維持1E5-5E5/ml之間,密度過低或者過高可能會(huì)影響細(xì)胞狀態(tài);
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2、質(zhì)量保證:產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,10年以上細(xì)胞研發(fā)經(jīng)驗(yàn) 通過ISO認(rèn)證和CE認(rèn)證;
3、團(tuán)隊(duì)優(yōu)勢:海內(nèi)外博士、教授組成的研發(fā)和管理團(tuán)隊(duì),具有十年的技術(shù)經(jīng)驗(yàn),擁有成熟的分子生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、蛋白表達(dá)純化技術(shù)、抗體篩選及制備等多個(gè)生物學(xué)平臺(tái);
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