"BIC-1:人食管腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

貼壁細胞傳代實驗準備事項：將15mL離心管、T25細胞培養(yǎng)瓶、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA從4℃冰箱中取出后，復(fù)溫至室溫，備用。貼壁細胞傳代實驗步驟：將準備HAO的培養(yǎng)基等物品用酒精消毒后放入安全柜中；從培養(yǎng)箱中取出待處理的細胞，在顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)；用酒精消毒培養(yǎng)瓶，放入安全柜中；輕輕吸去細胞上清；加入2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次，吸去上清；加入1mL(0.25%胰酶-0.02%EDTA)，輕輕晃勻、覆蓋所有細胞后，置于37℃培養(yǎng)箱靜置消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；按比例將細胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中；在顯微鏡下觀察傳代后的細胞密度及狀態(tài)；將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意事項：培養(yǎng)過程中需維持細胞處于對數(shù)生長期，80%左右即可傳代，傳代比例請參照說明書建議；消化時間不宜過長，大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化，難消化的細胞可分次消化，每次時間不超過5min；培養(yǎng)過程中需要定期換液，一般細胞建議2~3天換液一次。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞類似產(chǎn)品：：QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞

D-283細胞類似產(chǎn)品：：NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞

OS-732細胞類似產(chǎn)品：：6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞

Y-79細胞類似產(chǎn)品：：MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：食管腺癌；男性

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

Hepatoma-22細胞類似產(chǎn)品：：NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞

GM3190細胞類似產(chǎn)品：：RS4-11細胞、C17.2細胞、Hep 3B2.1-7細胞

LS-180細胞類似產(chǎn)品：：COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升GAO到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復(fù)吹打。

OCI-LY-18細胞類似產(chǎn)品：：ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞

KLN-205細胞類似產(chǎn)品：：RCS細胞、H1437細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞

HMEL細胞類似產(chǎn)品：：Strain V細胞、HEK 293A細胞、H1184細胞

Baby Hamster Kidney-21細胞類似產(chǎn)品：：UMC-11細胞、SW527細胞、HCC4006細胞

GM05862細胞類似產(chǎn)品：：H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞

Nb2a細胞類似產(chǎn)品：：CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞

KATO 3細胞類似產(chǎn)品：：WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞

RenCa細胞類似產(chǎn)品：：NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞

H548細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat, Clone E6-1細胞、CCD18Co細胞、TSCCa細胞

KY-270細胞類似產(chǎn)品：：B78細胞、H1688細胞、COV362細胞

MLO-Y4細胞類似產(chǎn)品：：HELF細胞、Hs 832(C).T細胞、Jiyoye (P-2003)細胞

D562細胞類似產(chǎn)品：：MIA-PaCa-2細胞、HFT8810細胞、SHSY5Y細胞

H524細胞類似產(chǎn)品：：MN-60細胞、H1781細胞、GM3569細胞

Okayama University Medical School-27細胞類似產(chǎn)品：：EHEB細胞、HT 1080.T細胞、2008細胞

SV-HUC-1細胞類似產(chǎn)品：：Neuro 2a細胞、NCI-UMC-11細胞、NCI-SNU-475細胞

GOS-3細胞類似產(chǎn)品：：SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞

Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞類似產(chǎn)品：：OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞

HEC1B細胞類似產(chǎn)品：：PTK 2細胞、MIMVEC細胞、OE-21細胞

H-2110細胞類似產(chǎn)品：：RCC 786-O細胞、Hs-729-T細胞、WC00079細胞

SCCVII細胞類似產(chǎn)品：：U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞

TGHAVSMC細胞類似產(chǎn)品：：HCC70細胞、Hs839.T細胞、Raji細胞

BALL1細胞類似產(chǎn)品：：Wien 133細胞、HEH2細胞、UCLA-SO-M21細胞

EOC20細胞類似產(chǎn)品：：COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞

NCI-H510細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1755細胞、BE(2)M17細胞、BI-Mel細胞

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HCC70細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1819細胞、KHYG-1細胞、MCF-10 Attached細胞

Walker256-TC細胞類似產(chǎn)品：：WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞

Walker256-TC細胞類似產(chǎn)品：：WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞

PC3M-1E8細胞類似產(chǎn)品：：CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞

C-32細胞類似產(chǎn)品：：EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞

MHH-CALL2細胞類似產(chǎn)品：：D-283MED細胞、W133細胞、BE(2)-C細胞

GM00215細胞類似產(chǎn)品：：OS-RC-2細胞、NCIH524細胞、OCI AML2細胞

P3-Jiyoye細胞類似產(chǎn)品：：M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞

C6細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1975細胞、GNM細胞、MUTZ-3細胞

LNCaP.FGC細胞類似產(chǎn)品：：NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞

LOUNH91細胞類似產(chǎn)品：：CCD-112 CoN細胞、HSC-T6細胞、Vx-2細胞

SW1088細胞類似產(chǎn)品：：P3X63NS1細胞、SUDHL-2細胞、SW-1573細胞

HCe-8693細胞類似產(chǎn)品：：MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞

HBE 135-E6E7細胞類似產(chǎn)品：：SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞

IALM細胞類似產(chǎn)品：：DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞

NEC細胞類似產(chǎn)品：：U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞

HCC2108細胞類似產(chǎn)品：：BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞

T_T_細胞類似產(chǎn)品：：BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞

697細胞類似產(chǎn)品：：NUGC3細胞、CCD 841 CoN細胞、NCI-H841細胞

OVCAR 4細胞類似產(chǎn)品：：TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞

Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞類似產(chǎn)品：：PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞

Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞類似產(chǎn)品：：PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞

SW-839細胞類似產(chǎn)品：：OCILY19細胞、H-87細胞、Hi5細胞

H-2052細胞類似產(chǎn)品：：SUM149-PT細胞、SCL II細胞、Hs 863.T細胞

H1915細胞類似產(chǎn)品：：MNNG/HOS細胞、AD293細胞、SCC 25細胞

C4-2細胞類似產(chǎn)品：：BC-024細胞、NCI-H1693細胞、MDAMB453細胞

Ketr3細胞類似產(chǎn)品：：HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞

Rat Skin 1細胞類似產(chǎn)品：：UCLA SO M21細胞、B16BL-6細胞、CAL39細胞

SCC4細胞類似產(chǎn)品：：COLO 201細胞、SMA 560細胞、Pt K2細胞

Tn5 B1-4細胞類似產(chǎn)品：：CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞

253J-Bladder-V細胞類似產(chǎn)品：：LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞

MGC803細胞類似產(chǎn)品：：A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞

SKRC-42細胞類似產(chǎn)品：：H-1618細胞、Ra No. 1細胞、NK-92MI細胞

MES-SA/Dx-5細胞類似產(chǎn)品：：RS1細胞、HEK 293T/17細胞、HSCT6細胞

PC-9S1細胞類似產(chǎn)品：：TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞

Mel RM細胞類似產(chǎn)品：：MFC細胞、RS(4;11)細胞、H647ell細胞

H-226細胞類似產(chǎn)品：：RSC96細胞、SKRC 39細胞、Bac1 2F5細胞

HMEC細胞類似產(chǎn)品：：BE(2)-M17細胞、VA-ES-BJ細胞、U-138 MG細胞

SUP T1細胞類似產(chǎn)品：：BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞

VMCUB-1細胞類似產(chǎn)品：：Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞

NCIH1623細胞類似產(chǎn)品：：MRC5細胞、PLA801-95D細胞、HRA19細胞

TM-3細胞類似產(chǎn)品：：LS174細胞、3T3-A31細胞、746T細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP-FGC細胞、HOC-1細胞、CMT-64細胞

BEAS2B細胞類似產(chǎn)品：：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞

HuPT4細胞類似產(chǎn)品：：MC-38細胞、Loucy細胞、SJSA1細胞

DHL10細胞類似產(chǎn)品：：H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞

Danio rerio Gill細胞類似產(chǎn)品：：SKG-3a細胞、343MG細胞、FHs74Int細胞

Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞類似產(chǎn)品：：HS852.T細胞、NCI-H146細胞、Giant Cell Tumor細胞

PANC0403細胞類似產(chǎn)品：：L-540細胞、RGE細胞、A704細胞

MHCC97-L細胞類似產(chǎn)品：：SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞

TE-5細胞類似產(chǎn)品：：Leydig細胞、KU1919細胞、T.T細胞

Hs 742.T細胞類似產(chǎn)品：：High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞

NCI-H1688細胞類似產(chǎn)品：：MOLT3細胞、P 3 HR 1細胞、CCD 1112SK細胞

H220細胞類似產(chǎn)品：：H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞

87 MG細胞類似產(chǎn)品：：Hs888 Lu細胞、KU.812細胞、HSC-T6細胞

NCI H157細胞類似產(chǎn)品：：Hs-606-T細胞、HPAF/CD18細胞、KGN細胞

JEG3細胞類似產(chǎn)品：：L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞

SF-539細胞類似產(chǎn)品：：SCCVII細胞、HCC4006細胞、UMR 106細胞

Huh-7.5細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293-H細胞、NCI-H510細胞、MA104細胞

OVCA 433細胞類似產(chǎn)品：：Japanese Tissue Culture-28細胞、HPAF-II細胞、H-1944細胞

CCRF/CEM/0細胞類似產(chǎn)品：：H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞

MCMEC細胞類似產(chǎn)品：：IB-RS2細胞、HUT28細胞、PC-3/M細胞

SKNBE(2)細胞類似產(chǎn)品：：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞

SU4細胞類似產(chǎn)品：：NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞

SCI1細胞類似產(chǎn)品：：HC11 Mammary Epithelium細胞、SK-NSH細胞、PIGI細胞

33604細胞類似產(chǎn)品：：KMS-18細胞、H-711細胞、U118細胞

OCI-Ly 8細胞類似產(chǎn)品：：K562/ADP細胞、MOLT3細胞、MDA-MB-436細胞

LS-1034細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2107細胞、OsACL細胞、A 549細胞

KU 19-19細胞類似產(chǎn)品：：Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞

JURKAT E-61細胞類似產(chǎn)品：：MT-4細胞、WM-2664細胞、HNEpC細胞

NCIH1781細胞類似產(chǎn)品：：Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞

COLO-679細胞類似產(chǎn)品：：TE-6細胞、H283細胞、3T3-442A細胞

GM00346B細胞類似產(chǎn)品：：ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞

SRA01/04細胞類似產(chǎn)品：：SUM-149PT細胞、MAEC細胞、Colo-201細胞

Hs840_T細胞類似產(chǎn)品：：LIXC002細胞、578T細胞、EoL-1 cell細胞

Pt K1細胞類似產(chǎn)品：：Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞

Giant Cell Tumor細胞類似產(chǎn)品：：L- cell細胞、NCI-H69細胞、E.L.4細胞

EFM192B細胞類似產(chǎn)品：：COLO-394細胞、NCI-H2227細胞、Helacyton gartleri細胞

C-28/I2細胞類似產(chǎn)品：：C-32細胞、L-5178-Y-R細胞、BNCL-2細胞

UM-UC-3細胞類似產(chǎn)品：：16HBEo-細胞、A704細胞、AN3CA細胞

NCI-Hut 125細胞類似產(chǎn)品：：R1800[RA]細胞、NMCG-1細胞、Strain V細胞

293c18細胞類似產(chǎn)品：：NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞

BIC-1:人食管腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

SK-ES-1細胞類似產(chǎn)品：：CD18/HPAF細胞、GCT細胞、N87細胞

CMT.64細胞類似產(chǎn)品：：Mv.1.Lu細胞、NCI-H2135細胞、Mel-RM細胞

HuH-6細胞類似產(chǎn)品：：CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞

NCI-522細胞類似產(chǎn)品：：SR細胞、He La細胞、TE14細胞

HTR-8/SV neo細胞類似產(chǎn)品：：BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞

L 363細胞類似產(chǎn)品：：WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞

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