"VMM5A:人黑色素瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升GAO，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑別敏感解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MOLT16細胞類似產(chǎn)品：：J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞

Panc 1細胞類似產(chǎn)品：：PA317細胞、TE5細胞、OCI-Ly01細胞

MOLT-3細胞類似產(chǎn)品：：HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞

L540細胞類似產(chǎn)品：：MES-SA/Dx5細胞、P31 FUJ細胞、RS(4;11)細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：黑色素瘤；神經(jīng)節(jié)轉(zhuǎn)移；男性

VMM5A:人黑色素瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

HeLa/DDP細胞類似產(chǎn)品：：COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞

TI-73細胞類似產(chǎn)品：：Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞

SKRC-20細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞

培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋HAO凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做HAO標記；６)凍存：在殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷。【復(fù)蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

VMM5A:人黑色素瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁

一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過GAO時，易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化，對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化，細胞密度過GAO超過80%時，采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C，解凍在4°C進行，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟：消化過度細胞碎片增多，黑渣子增多，細胞會成片脫落，嚴重影響細胞活性，并有部分細胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下，反復(fù)吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復(fù)凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細胞的密度有關(guān)。對于新購買的細胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓，記錄Zui佳消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。

Rat Chondrosarcoma Swarm細胞類似產(chǎn)品：：HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞

C4 I細胞類似產(chǎn)品：：Alexander cells細胞、CWR-22rv1細胞、CC-LP-I細胞

AA-Mel細胞類似產(chǎn)品：：SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞

Sp2/0細胞類似產(chǎn)品：：H1623細胞、LS180細胞、NCIH187細胞

RLE-6TN細胞類似產(chǎn)品：：C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞

HLEB3細胞類似產(chǎn)品：：McA-RH 7777細胞、2780CP細胞、NRK-52E細胞

SW-839細胞類似產(chǎn)品：：OCILY19細胞、H-87細胞、Hi5細胞

SF 539細胞類似產(chǎn)品：：SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞

HEK 293T/17細胞類似產(chǎn)品：：SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞

PLA801-95D細胞類似產(chǎn)品：：SJSA細胞、Panc05.04細胞、MPC 11細胞

H2106細胞類似產(chǎn)品：：RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞

OS-732細胞類似產(chǎn)品：：6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞

Rat Basophilic Leukemia-1細胞類似產(chǎn)品：：Sp2/O-Ag14細胞、PG-LH7細胞、CAL-27細胞

P3/ag細胞類似產(chǎn)品：：HECCL-1細胞、NCI-HUT-292細胞、B-cell with DC Morphology細胞

LM8細胞類似產(chǎn)品：：ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞

HCC44細胞類似產(chǎn)品：：NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞

8226細胞類似產(chǎn)品：：HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞

B-16細胞類似產(chǎn)品：：SU-86-86細胞、U-2 OS細胞、H1975細胞

COLO 699細胞類似產(chǎn)品：：TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞

MUG-Chor1細胞類似產(chǎn)品：：Mv1.Lu細胞、L細胞、SW 1783細胞

KYSE 510細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞

GTL-16細胞類似產(chǎn)品：：H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞

MPP 89細胞類似產(chǎn)品：：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞

NCI H226細胞類似產(chǎn)品：：Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞

VMM5A:人黑色素瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

NIH:OVCAR3細胞類似產(chǎn)品：：NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞

ZR75-1細胞類似產(chǎn)品：：MSB-1細胞、SF126細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞

NT2-D1細胞類似產(chǎn)品：：Lewis Lung細胞、SK-MES細胞、A253細胞

Vertebral Cancer of the Prostate細胞類似產(chǎn)品：：CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞

RBL-1細胞類似產(chǎn)品：：RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞

HTR8svn細胞類似產(chǎn)品：：HCC-9204細胞、Panc3_27細胞、HT-144細胞

PVEC細胞類似產(chǎn)品：：L-5178-Y細胞、MDAMB453細胞、HeLaS3細胞

HCC-9204細胞類似產(chǎn)品：：MNNGHOS細胞、Sp2/0-Ag-14細胞、FTC-133細胞

Walker256細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞

SKRC-20細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞

MDA-MB468細胞類似產(chǎn)品：：MDA MB 453細胞、A375S2細胞、U-343MG細胞

INS1細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞

SK-LU-1細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly 3細胞、LN 382細胞、211H細胞

HHUA細胞類似產(chǎn)品：：U266BL細胞、Hs-578Bst細胞、NK92-MI細胞

H1650_CO細胞類似產(chǎn)品：：SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞

OVCAR.5細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞

MC3T3-L1細胞類似產(chǎn)品：：C-Li-7細胞、BV2細胞、MES-SA-Dx5細胞

HHL-5細胞類似產(chǎn)品：：PL 5細胞、NCI-H1963細胞、LAD2細胞

3T3-L1 ad細胞類似產(chǎn)品：：D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞

SSP-25細胞類似產(chǎn)品：：NIH 3T3細胞、MDCK細胞、MCF10-A細胞

P-815細胞類似產(chǎn)品：：P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞

aTC1 Clone 6細胞類似產(chǎn)品：：D407 RPE細胞、NCTC 1469細胞、4T1細胞

LS 180細胞類似產(chǎn)品：：HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞

A1847細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H345細胞、NCI-H647細胞、P-2003細胞

WM-239-A細胞類似產(chǎn)品：：Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞

H-1299細胞類似產(chǎn)品：：T98G細胞、P116細胞、MFE 296細胞

GEO細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1373細胞、BSC-40細胞、OCI-LY-7細胞

H810細胞類似產(chǎn)品：：C-6細胞、L-929細胞、SW 756細胞

SUP-B1細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞

NCI H716細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞

NCI-H1155細胞類似產(chǎn)品：：H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞

SNUC1細胞類似產(chǎn)品：：HSC3細胞、PY8119細胞、AML-EOL-1細胞

Merwin Plasma Cell tumor-11細胞類似產(chǎn)品：：PAI細胞、SUM 190細胞、MCF12A細胞

GM02219細胞類似產(chǎn)品：：KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞

SW527細胞類似產(chǎn)品：：R3/1細胞、P3/NS-1細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞

LAD2細胞類似產(chǎn)品：：IPEC-1細胞、OVCA5細胞、Hepatoma-22細胞

BCPAP細胞類似產(chǎn)品：：NCCIT細胞、HFLS-OA細胞、NCIH1770細胞

AA-Mel細胞類似產(chǎn)品：：SW1463細胞、B10BR細胞、LN 229細胞

PLMVEC細胞類似產(chǎn)品：：JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞

KHYG細胞類似產(chǎn)品：：Cates 1B細胞、OVCAR8/ADR細胞、H2172細胞

PK-13細胞類似產(chǎn)品：：PG-BE1細胞、NCI H747細胞、EBNA-293細胞

NCIADRRES細胞類似產(chǎn)品：：RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞

GM03570細胞類似產(chǎn)品：：Onda 11細胞、NIHOVCAR3細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞

NCI-H1882細胞類似產(chǎn)品：：HOPC細胞、SEM細胞、SKCO-1細胞

MT-2細胞類似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、SKNO-1細胞、RPTEC TERT1細胞

SNU668細胞類似產(chǎn)品：：Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞

NCI-H1915細胞類似產(chǎn)品：：NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞

LM TK negative細胞類似產(chǎn)品：：SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞

WERI-Rb1細胞類似產(chǎn)品：：GCT細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、CAOV3細胞

NCI H2106細胞類似產(chǎn)品：：IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞

MV-4:11細胞類似產(chǎn)品：：SUM-159-PT細胞、FHs74 Int細胞、H-1755細胞

MCF10A細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞

HB 611細胞類似產(chǎn)品：：RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞

SK-ES細胞類似產(chǎn)品：：LK 2細胞、Emory University-3細胞、U-138 MG細胞

Duck embryo細胞類似產(chǎn)品：：ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞

Panc_02_03細胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-19細胞、HCC1954-BL細胞、KU1919細胞

Michigan Cancer Foundation-7細胞類似產(chǎn)品：：WM-239細胞、Hs 888Lu細胞、SW-13細胞

U-343MG細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞

U-343MG細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞

Wien-133細胞類似產(chǎn)品：：NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞

OCI-Ly10細胞類似產(chǎn)品：：RIN-m 14B細胞、Hs 578T細胞、P388.D1細胞

H-1793細胞類似產(chǎn)品：：ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞

NCI-H-128細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞

PFSK細胞類似產(chǎn)品：：NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞

PL-9細胞類似產(chǎn)品：：IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞

H2291細胞類似產(chǎn)品：：RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞

BT483細胞類似產(chǎn)品：：SN-12C細胞、RPMI8226/S細胞、NCI-H1648細胞

GLRK 13細胞類似產(chǎn)品：：IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞

H838細胞類似產(chǎn)品：：E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞

IALM細胞類似產(chǎn)品：：DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞

LTPA細胞類似產(chǎn)品：：NCIH244細胞、HT-55細胞、NCIH1299細胞

MDAMB436細胞類似產(chǎn)品：：SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞

MDA-MB-231-GFP細胞類似產(chǎn)品：：EJ細胞、LuCL4細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞

Immortalized Human Hepatocytes細胞類似產(chǎn)品：：H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞

Toledo細胞類似產(chǎn)品：：G-361細胞、H-295細胞、KP4細胞

NIH:OVCAR3細胞類似產(chǎn)品：：NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞

RCK8細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞

U373細胞類似產(chǎn)品：：ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞

HT-1197細胞類似產(chǎn)品：：766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞

LICR-HN6細胞類似產(chǎn)品：：NK10a細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、T-ALL 1細胞

JB6 [Mouse]細胞類似產(chǎn)品：：NRK49F細胞、CL1-5細胞、ST-2細胞

MDA453細胞類似產(chǎn)品：：EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞

VMM5A:人黑色素瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

H2227細胞類似產(chǎn)品：：ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞

VERO C 1008細胞類似產(chǎn)品：：IMCD3細胞、FDCP-1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞

RCC-10RGB細胞類似產(chǎn)品：：Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞

HSC-3細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2081細胞、Nb2細胞、HUCEC細胞

NCIH650細胞類似產(chǎn)品：：K7M2 wt細胞、T 24細胞、MDA-361細胞

H1437細胞類似產(chǎn)品：：C918細胞、THP1細胞、HGC27細胞

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