"U-138MG:人腦神經膠質瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

ARO81-1細胞類似產品：：IBRS2細胞、Bowes melanoma cells細胞、CoCL2細胞

Y1細胞類似產品：：CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞

WM-115細胞類似產品：：NCIH1944細胞、MHHCALL2細胞、SK-BR-3細胞

MMAc.SF細胞類似產品：：PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：星形細胞瘤；男性

U-138MG:人腦神經膠質瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

P30-OHK細胞類似產品：：MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞

L 929細胞類似產品：：SUNE-1細胞、HPAF-II/CD18細胞、H711細胞

MN60細胞類似產品：：COLO-679細胞、VMRCRCZ細胞、WISH細胞

細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋HAO瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化HAO的細胞使其脫壁并分散，再根據分傳瓶數補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋HAO瓶蓋，適度擰緊后稍回轉，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

細胞培養(yǎng)中常用設施及設備：實驗室設計：細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設計原則一般是無菌操作區(qū)設在室內較少走動的內側，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。常用設施及設備：1)超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒HAO的無菌物品等。3)操作間：普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間：烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室：顯微鏡、計算機及打印機等。

AU565細胞類似產品：：BV2細胞、COLO-741細胞、RL-952細胞

GM06141B細胞類似產品：：MGH-U1 (EJ)細胞、SN12-PM6細胞、H-719細胞

Tn 5B1-4細胞類似產品：：H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞

T-84細胞類似產品：：SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞

P3J細胞類似產品：：SW48細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、CHOK1細胞

SU-86-86細胞類似產品：：HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞

SHZ-88細胞類似產品：：PF382細胞、NCIH1648細胞、Metastatic Variant 522細胞

WRL 68細胞類似產品：：RAT2細胞、LIXC002細胞、U 138 MG細胞

L cell line細胞類似產品：：IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞

JM1細胞類似產品：：MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞

OCI/AML-3細胞類似產品：：MDST8細胞、293FT細胞、He La細胞

OSK-1細胞類似產品：：REC-1細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞、A-549細胞

MDA-MB361細胞類似產品：：DMS-53細胞、LA4細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞

LS 180細胞類似產品：：HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞

SK-MEL-28細胞類似產品：：HSF細胞、AQ-Mel細胞、4-1st細胞

LNCaP.FGC細胞類似產品：：NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞

LNCaP.FGC細胞類似產品：：NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞

MADB-106細胞類似產品：：MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞

NBL-4細胞類似產品：：UMRC-2細胞、Simpson細胞、NCI-H498細胞

Capan 2細胞類似產品：：CHO-K1細胞、NCI-H128細胞、ACC-3細胞

DU145細胞類似產品：：RKN細胞、Mc Coy細胞、1.1B4細胞

BALL-1細胞類似產品：：HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞

NHA細胞類似產品：：MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞

H-1404細胞類似產品：：RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞

U-138MG:人腦神經膠質瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

DHL4細胞類似產品：：IALM細胞、CALU 1細胞、GDM1細胞

A20細胞類似產品：：HNE2細胞、HME1細胞、95C細胞

TE 32細胞類似產品：：Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞

HUC細胞類似產品：：FK81細胞、HuT78細胞、OSK-1細胞

Co320細胞類似產品：：HOMEC細胞、H-508細胞、SU-DHL1細胞

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NB1-RGB細胞類似產品：：D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞

Ramos-RA1細胞類似產品：：H-740細胞、H2052_MM細胞、870細胞

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GM05372細胞類似產品：：J 774A.1細胞、HF-91細胞、FaDu細胞

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HCC2157細胞類似產品：：IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞

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NCI H157細胞類似產品：：Hs-606-T細胞、HPAF/CD18細胞、KGN細胞

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BBE細胞類似產品：：Kupffer細胞、Y1細胞、HuCCT-1細胞

SW982細胞類似產品：：MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、HEI-193細胞、HS 1.Tes細胞

BT 325細胞類似產品：：BCaP-37細胞、KNS-62細胞、DU-4475細胞

Hce8693細胞類似產品：：UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞

GM637細胞類似產品：：OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞

NCI-H1930細胞類似產品：：TCC Sup細胞、Hs695細胞、NCI-H1793細胞

MDA-kb2細胞類似產品：：COLO-699細胞、ketr 3細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞

WI-38細胞類似產品：：RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞

H766T細胞類似產品：：Hs27細胞、EAHY-926細胞、Y3Ag1.2.3細胞

NCI-H2106細胞類似產品：：Institute for Medical Research-32細胞、SK-OV-433細胞、VMM-5A細胞

CL34細胞類似產品：：HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞

SK-ChA-1細胞類似產品：：CHL細胞、PC-3細胞、TOV-112D細胞

PL-12細胞類似產品：：MOLT-3細胞、RPVSMC細胞、Colo205細胞

NK92MI細胞類似產品：：KYSE 450細胞、HSCT6細胞、Clone 15 HL-60細胞

Tn 5B1-4細胞類似產品：：H2029細胞、COV-434細胞、HEK293-F細胞

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F442-A細胞類似產品：：MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞

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UMR-106細胞類似產品：：NK 10a細胞、T8細胞、HOS-TE85細胞

NCI.H226細胞類似產品：：HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞

BHK21細胞類似產品：：MHCC97細胞、H2135細胞、SU 86.86細胞

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TMK1細胞類似產品：：HMEC細胞、NCIH1819細胞、RSC-96細胞

Wayne State University-Head and Neck 13細胞類似產品：：NU-GC-4細胞、ND7/23細胞、H1792細胞

RT4-D6-P2T細胞類似產品：：CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞

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FTC133細胞類似產品：：HCC1395細胞、HSAS1細胞、HCA 7細胞

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NCI660細胞類似產品：：87 MG細胞、NCI-H23細胞、MV 4;11細胞

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HuPT4細胞類似產品：：MC-38細胞、Loucy細胞、SJSA1細胞

Chinese Hamster Ovary細胞類似產品：：Hs934T細胞、SKBR-3細胞、MGC-803細胞

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MSTO211H細胞類似產品：：NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞

SK-ML2細胞類似產品：：COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞

HCMEC細胞類似產品：：C4-2B細胞、LAD-2細胞、Hs706T細胞

MCF12A細胞類似產品：：EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞

alpha-TC1-6細胞類似產品：：SW-527細胞、CTV-1細胞、SLK細胞

DMS 153細胞類似產品：：Hs852T細胞、CHO細胞、T/G HA VSMC細胞

H2444細胞類似產品：：H1437細胞、NCI-H1568細胞、SW 48細胞

U-138MG:人腦神經膠質瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

WEHI-279細胞類似產品：：P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞

NMCG-1細胞類似產品：：GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞

NCIH1975細胞類似產品：：SW 480細胞、Tb 1 Lu細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞

CEF細胞類似產品：：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、343 MG細胞、MALME 3M細胞

HCC-9724細胞類似產品：：LN299細胞、L-6 myoblast細胞、697細胞

MiaPaCa2細胞類似產品：：HEC151細胞、CA 46細胞、KM12SM細胞

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