"MDA-1386:人舌鱗癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升GAO，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑別敏感解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HO8910/PM細胞類似產(chǎn)品：：Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞

BCaP 37細胞類似產(chǎn)品：：LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞

HMVEC細胞類似產(chǎn)品：：NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞

SW-579細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：舌鱗癌；男性

MDA-1386:人舌鱗癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

MDCK (NBL-2)細胞類似產(chǎn)品：：KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞

C3H10T1-2細胞類似產(chǎn)品：：V79-1細胞、BT 325細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞

L5178Y TK+/-3.7.2c細胞類似產(chǎn)品：：293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞

細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理HAO工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，Zui大的YOU點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

MDA-1386:人舌鱗癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

NCI-H2198細胞類似產(chǎn)品：：Ca761細胞、OVCAR5細胞、DSL6A/C1細胞

H676B細胞類似產(chǎn)品：：CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞

SW-837細胞類似產(chǎn)品：：P3HR-1細胞、WM451Lu細胞、TCam-2細胞

H209細胞類似產(chǎn)品：：HN6細胞、SKHEP1細胞、SPCA1細胞

KP-N-NS細胞類似產(chǎn)品：：CV 1細胞、NTERA-2cl.D1細胞、OVCAR420細胞

NCI-SNU-620細胞類似產(chǎn)品：：NCI-441細胞、MKN 28細胞、MHCC97-L細胞

RH-30細胞類似產(chǎn)品：：IAR-20細胞、SK-N-BE2C細胞、CMT 93細胞

A204細胞類似產(chǎn)品：：HuT 102細胞、KY-270細胞、TK10細胞

Line 207細胞類似產(chǎn)品：：HCC1806細胞、BC-022細胞、U251-MG細胞

WM2664細胞類似產(chǎn)品：：A-172 MG細胞、P3J HR1-K細胞、KYSE 50細胞

aTC1 Clone 6細胞類似產(chǎn)品：：D407 RPE細胞、NCTC 1469細胞、4T1細胞

NB1-RGB細胞類似產(chǎn)品：：D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞

SNU-C1細胞類似產(chǎn)品：：NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞

SKES1細胞類似產(chǎn)品：：Madison 109細胞、Hs819.T細胞、HONE1細胞

293-EBNA1細胞類似產(chǎn)品：：NS-1-Ag4-1細胞、RAW264.7細胞、Blotchy fibroblast-11細胞

MDA-MB415細胞類似產(chǎn)品：：VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞

HCC9724細胞類似產(chǎn)品：：BIU87細胞、MRAEC細胞、T-47D細胞

HLE-B3細胞類似產(chǎn)品：：2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞

VMRC-LCD細胞類似產(chǎn)品：：M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞

Hs 578.T細胞類似產(chǎn)品：：OUMS-23細胞、CT26WT細胞、UMUC-14細胞

SNU-719細胞類似產(chǎn)品：：HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞

J111細胞類似產(chǎn)品：：NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞

Hs 888Lu細胞類似產(chǎn)品：：Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞

Medical University of Graz-Chordoma 1細胞類似產(chǎn)品：：HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞

MDA-1386:人舌鱗癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Malme-3M細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H920細胞、HEK-EBNA細胞、Hs 343.T細胞

Japanese Tissue Culture-39細胞類似產(chǎn)品：：HCT-8細胞、Human Embryo Lung-1細胞、LLC-PK(1)細胞

E304細胞類似產(chǎn)品：：SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞

MOLT16細胞類似產(chǎn)品：：J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞

KATO III細胞類似產(chǎn)品：：MES 23.5細胞、PLC8024細胞、TGW-I-nu細胞

WERI-Rb1細胞類似產(chǎn)品：：GCT細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、CAOV3細胞

Ketr-3細胞類似產(chǎn)品：：C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞

BT474細胞類似產(chǎn)品：：H-727細胞、McA-RH8994細胞、MS-751細胞

OSA細胞類似產(chǎn)品：：SHIN3細胞、SUDHL-4細胞、OCI-Ly07細胞

SNB.19細胞類似產(chǎn)品：：LLC-MK2細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞、KYSE-180細胞

KGN細胞類似產(chǎn)品：：SO-RB50細胞、HS688AT細胞、SKCO1細胞

JROECL33細胞類似產(chǎn)品：：LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞

MFM223細胞類似產(chǎn)品：：TMD8細胞、Hepatoma 22細胞、P3J-HR-1細胞

HS 683T細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H522細胞、U266細胞、3T3-Swiss細胞

GM00346B細胞類似產(chǎn)品：：ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞

SW-839細胞類似產(chǎn)品：：OCILY19細胞、H-87細胞、Hi5細胞

H-1436細胞類似產(chǎn)品：：PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞

SUP-B1細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞

SNU638細胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR3細胞、SP2-0-Ag14細胞、AD293細胞

Hs 294T細胞類似產(chǎn)品：：NTERA-2 clone D1細胞、OVCAR.5細胞、CHL細胞

F-81細胞類似產(chǎn)品：：BIC細胞、WM266細胞、X63細胞

COLO320-DM細胞類似產(chǎn)品：：HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞

OCI-Ly18細胞類似產(chǎn)品：：HCC9724細胞、C-643細胞、LoVo細胞

HPB-ALL細胞類似產(chǎn)品：：Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞

MCF-7細胞類似產(chǎn)品：：MONO-MAC 6細胞、NCIH1436細胞、LS 513細胞

KU 19-19細胞類似產(chǎn)品：：Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞

Fetal Bovine Heart Endothelial細胞類似產(chǎn)品：：HT22細胞、U 266細胞、PLCPRF5細胞

H4-II-EC3細胞類似產(chǎn)品：：SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞

HEK;293細胞類似產(chǎn)品：：HCC1954 BL細胞、B16/F1細胞、PaTu 8988 S細胞

WB F344細胞類似產(chǎn)品：：T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞

Hep 2細胞類似產(chǎn)品：：RA細胞、HEK 293FT細胞、HOSEpiC細胞

H2591細胞類似產(chǎn)品：：Hep G2-Luc細胞、SKOV-3細胞、CEMC7細胞

C33-A細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞

HIT T-15細胞類似產(chǎn)品：：CORL23細胞、SGC 7901細胞、SK RC 20細胞

GT1-1細胞類似產(chǎn)品：：LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞

32D clone 3細胞類似產(chǎn)品：：A875細胞、HT-144細胞、PANC0203細胞

MDAMB330細胞類似產(chǎn)品：：Sarcoma OSteogenic-2細胞、MKN28細胞、HEYA8細胞

SW-837細胞類似產(chǎn)品：：P3HR-1細胞、HuT-78細胞、NCI-H460細胞

G422細胞類似產(chǎn)品：：SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞

ECC1細胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E1 Subclone 24細胞、GM-3573細胞、DKMG細胞

VCaP細胞類似產(chǎn)品：：Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞

Tca-8113細胞類似產(chǎn)品：：KM12細胞、Hca-F細胞、NP-69細胞

LTEP-s細胞類似產(chǎn)品：：IEC6細胞、CCRF-CEM/S細胞、TR 146細胞

FOX-NY細胞類似產(chǎn)品：：A-875細胞、C8161細胞、MLO-Y4細胞

H250細胞類似產(chǎn)品：：VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞

OAW-42細胞類似產(chǎn)品：：SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞

H-125細胞類似產(chǎn)品：：U937細胞、MV4II細胞、P388細胞

CL MC/9細胞類似產(chǎn)品：：HFL 1細胞、Walker256-TC細胞、NOR-10細胞

NCI-H660細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞

NCI-H1436細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP FGC細胞、V79細胞、H2087細胞

P36細胞類似產(chǎn)品：：MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞

QGY7701細胞類似產(chǎn)品：：U343細胞、CX1細胞、AM細胞

EAC細胞類似產(chǎn)品：：U-373 MG細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、Swiss-3T3細胞

Astrocyte type I clone細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-1細胞、H2.35細胞、SHI1細胞

OVCA8細胞類似產(chǎn)品：：GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞

Chang liver細胞類似產(chǎn)品：：COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞

NIH-3T3細胞類似產(chǎn)品：：TM-4細胞、CAL-85-1細胞、HA1800細胞

Tissue Culture-1細胞類似產(chǎn)品：：CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞

Tissue Culture-1細胞類似產(chǎn)品：：CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞

LLC-PK-1細胞類似產(chǎn)品：：KHYG細胞、INS-1細胞、HEK293EBNA細胞

T-84細胞類似產(chǎn)品：：SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞

Mink Lung細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1915細胞、HCC-44細胞、LNCaP clone FGC細胞

A-9細胞類似產(chǎn)品：：LAD 2細胞、IOSE 29細胞、ETCC-007細胞

Colo320細胞類似產(chǎn)品：：PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞

PTK 2細胞類似產(chǎn)品：：COLO 699細胞、NS1-Ag4/1細胞、hCMEC/D3細胞

U-138 MG細胞類似產(chǎn)品：：NCIH196細胞、A549/DDP細胞、VMRCRCZ細胞

ESC-410細胞類似產(chǎn)品：：HOS-143B細胞、FOXNY細胞、HANK-1細胞

Emory University-3細胞類似產(chǎn)品：：NCI747細胞、CHP100細胞、Capan-2細胞

BRL-3A細胞類似產(chǎn)品：：Calu-6細胞、Hi5細胞、KM.12細胞

SK-Mel1細胞類似產(chǎn)品：：PC-3M-2B4細胞、OVCAR-433細胞、Ketr3細胞

IMR-90細胞類似產(chǎn)品：：LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞

CaEs17細胞類似產(chǎn)品：：X63Ag8-653細胞、SU-DHL-4細胞、B16/BL6細胞

MC 3T3-E1細胞類似產(chǎn)品：：SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞

Institute for Medical Research-90細胞類似產(chǎn)品：：CACO2細胞、NCIH2009細胞、NCI-H322T細胞

RH35細胞類似產(chǎn)品：：Hs606T細胞、SK-N-BE(2)C細胞、HCE-T細胞

MPASMC細胞類似產(chǎn)品：：Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞

HPC-Y5細胞類似產(chǎn)品：：GM02131A細胞、H1694細胞、IEC 6細胞

SCL-1細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞

SUM-159PT細胞類似產(chǎn)品：：Hs683細胞、OCI-LY-3細胞、LC2/Ad細胞

A2780/CP70細胞類似產(chǎn)品：：A-375SM細胞、SNU-16細胞、alpha TC1-6細胞

BrCL12細胞類似產(chǎn)品：：LM2-4175細胞、HM06.A1細胞、EOL1細胞

SUDHL-8細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞

MDA-1386:人舌鱗癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Jurkat77細胞類似產(chǎn)品：：HCEC細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞、H766T細胞

SW-1353細胞類似產(chǎn)品：：AZ521細胞、NCIH146細胞、C42細胞

B16/F10細胞類似產(chǎn)品：：Panc_05_04細胞、CAL 39細胞、HCC366細胞

LN299細胞類似產(chǎn)品：：Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞

U-266細胞類似產(chǎn)品：：EA.hy 926細胞、NCI H508細胞、HCC-1500細胞

MOLM13細胞類似產(chǎn)品：：CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞

"