"HeLa 229:人宮頸癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Lewis Lung Cancer細胞類似產(chǎn)品：：Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、HEL-1細胞、Caki-1細胞

A-375細胞類似產(chǎn)品：：H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞

HCC0202細胞類似產(chǎn)品：：B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞

PT-67細胞類似產(chǎn)品：：Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：宮頸癌；女性

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

HOCF細胞類似產(chǎn)品：：Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞

MDA2B細胞類似產(chǎn)品：：WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞

Hs746T細胞類似產(chǎn)品：：CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞

細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在GAO處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗１５次，Zui后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。GAO壓消毒：包裝HAO的器皿裝入GAO壓鍋內(nèi)蓋HAO蓋子，打開開關和安全閥，當蒸氣成直線上升時，關閉安全閥，當指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。GAO壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻，或者放入時搖勻，但在細胞貼壁前，又移動了培養(yǎng)瓶，頻繁開關培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少，培養(yǎng)箱擱板表面不平整，這些因素會導致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正?，F(xiàn)象，大部分懸浮細胞在細胞密度很GAO的情況下，很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象，聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細胞，因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制HAO細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團，可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團，也可以嘗試一下方法：將細胞懸液收集到15ml離心管中，靜置20min左右，小心取上層細胞上清培養(yǎng)（該方法只能去除部分較大的細胞團）。部分細胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐藥株等），這個是正?，F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡，則很可能是細胞狀態(tài)不佳，可以通過調(diào)整血清濃度，控制消化，控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細胞狀態(tài)；如果大部分細胞出現(xiàn)空泡，且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多，則可能細胞代次較GAO，細胞老化所致，需更換代次較早的細胞。

RAW 264.7細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2172細胞、MFM-223細胞、SK-GT-4細胞

Pro-Lec1.3C細胞類似產(chǎn)品：：3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞

Hs-940細胞類似產(chǎn)品：：UCLA RO-81-A-1細胞、SK-Hep1細胞、751-NA-15細胞

C8161細胞類似產(chǎn)品：：H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞

SU.86.86細胞類似產(chǎn)品：：D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞

RAW-264.7細胞類似產(chǎn)品：：HCC1937細胞、G361細胞、NCIH2029細胞

Hs746T細胞類似產(chǎn)品：：CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞

HTori3細胞類似產(chǎn)品：：GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞

HCC1569細胞類似產(chǎn)品：：MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞

P3 NS1 Ag4細胞類似產(chǎn)品：：Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞

HF-91細胞類似產(chǎn)品：：TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞

BC-021細胞類似產(chǎn)品：：Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、BRL細胞、MDA-MB 453細胞

HCC-70細胞類似產(chǎn)品：：Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞

CNE-2Z細胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞

HNEpC細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat-77細胞、M-NFS-60細胞、C4-I細胞

HEL 92.1.7細胞類似產(chǎn)品：：MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞

HEL 92.1.7細胞類似產(chǎn)品：：MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞

CMT93細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-2細胞、HCS2/8細胞、SK.OV.3細胞

SCC25細胞類似產(chǎn)品：：Hs-940細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、P3-Jiyoye細胞

Jurkat, Clone E6-1細胞類似產(chǎn)品：：H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞

CAL78細胞類似產(chǎn)品：：MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞

ARH 77細胞類似產(chǎn)品：：UMUC-14細胞、MDA-453細胞、HET1A細胞

H2170細胞類似產(chǎn)品：：MBdSMC細胞、IM95細胞、MADB 106細胞

U-251細胞類似產(chǎn)品：：Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞

HeLa 229:人宮頸癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

P3-X63-Ag8細胞類似產(chǎn)品：：Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞

ATN1細胞類似產(chǎn)品：：NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞

Mel RM細胞類似產(chǎn)品：：MFC細胞、HEK-293-F細胞、H2135細胞

UMRC-2細胞類似產(chǎn)品：：RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞

Becker細胞類似產(chǎn)品：：WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞

Ha Fe細胞類似產(chǎn)品：：HCC1008細胞、AN3CA細胞、OVCAR.8細胞

CV-1 in Origin Simian-7細胞類似產(chǎn)品：：MCF-7/ADR細胞、U937細胞、Vero C1008細胞

U373MG細胞類似產(chǎn)品：：TE85細胞、C127細胞、CHP126細胞

Mono Mac 6細胞類似產(chǎn)品：：CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞

PA-TU-8988S細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2286細胞、OVCA 420細胞、MDA1386細胞

293E細胞類似產(chǎn)品：：INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞

HEK 293細胞類似產(chǎn)品：：WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞

EPC細胞類似產(chǎn)品：：M059J細胞、SPCA1細胞、HCC1419細胞

AE 1201細胞類似產(chǎn)品：：Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞

Tn 5B1-4細胞類似產(chǎn)品：：H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞

MB157細胞類似產(chǎn)品：：SNU-1細胞、18G3.cl 1細胞、SK-ChA-1細胞

HDSMC細胞類似產(chǎn)品：：LTEPsm細胞、MHH-CALL-2細胞、Kit 225-K6細胞

KPL1細胞類似產(chǎn)品：：HS-940-T細胞、C2BBe1細胞、MV 3細胞

B35細胞類似產(chǎn)品：：HT-3細胞、NCI-H1688細胞、MeT-5A細胞

RC92A細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1648細胞、CCC-HEH-2細胞、HUT 125細胞

C57/B6-L細胞類似產(chǎn)品：：Hs611T細胞、CCD-112CoN細胞、P3 88 D1細胞

SUM149-PT細胞類似產(chǎn)品：：MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞

RGB細胞類似產(chǎn)品：：RL細胞、LTEP a2細胞、SK-MES細胞

BEL 7405細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞

U-251_MG細胞類似產(chǎn)品：：SKGT4細胞、MDA-MB-134VI細胞、A673細胞

Hep-G2細胞類似產(chǎn)品：：Emory University-2細胞、FK81細胞、CCC-HSF-1細胞

PAa細胞類似產(chǎn)品：：ML2細胞、HCC2218細胞、C-8161細胞

SNU-475細胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞

H-2052細胞類似產(chǎn)品：：SUM149-PT細胞、SCL II細胞、Hs 863.T細胞

hRPTC細胞類似產(chǎn)品：：PANC0504細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞、KCL-22細胞

SHSY5Y細胞類似產(chǎn)品：：H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞

8305C_1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2087細胞、P-815細胞、H345細胞

SF-126細胞類似產(chǎn)品：：HGSMC細胞、OCIAML2細胞、Lu-99A細胞

ASH-3細胞類似產(chǎn)品：：H-1703細胞、SW756細胞、NCI-H2342細胞

HCC1954BL細胞類似產(chǎn)品：：HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞

NCIH1963細胞類似產(chǎn)品：：C1498細胞、WEHI-3B細胞、K7M2-WT細胞

Hs 940.T細胞類似產(chǎn)品：：CoC1細胞、253J B-V細胞、SK-RC 52細胞

HS940細胞類似產(chǎn)品：：Panc_02_03細胞、NEC細胞、NCIH727細胞

OsA-CL細胞類似產(chǎn)品：：TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞

SN4741細胞類似產(chǎn)品：：Tb1.Lu細胞、Tn-5細胞、Fetal Human Lens-124細胞

EU-3細胞類似產(chǎn)品：：PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞

SK-MEL-2-LUC細胞類似產(chǎn)品：：VE細胞、CORL105細胞、B16-F10細胞

ABE-8.1/2細胞類似產(chǎn)品：：Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞

WSUDLCL2細胞類似產(chǎn)品：：CCC-HPF-1細胞、TE 32細胞、LAN5細胞

MIHA細胞類似產(chǎn)品：：HCS-2/8細胞、NPC-039細胞、PaTu8988s細胞

Detroit-562細胞類似產(chǎn)品：：T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞

4T1-A細胞類似產(chǎn)品：：KU-812細胞、IMR 90細胞、OVCA5細胞

L-M[TK-]細胞類似產(chǎn)品：：FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞

PANC403細胞類似產(chǎn)品：：MFM223細胞、Hs294T細胞、H-929細胞

Jurkat clone A3細胞類似產(chǎn)品：：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞

NCI-H102細胞類似產(chǎn)品：：KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞

SK-ML2細胞類似產(chǎn)品：：COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞

HEK 293FT細胞類似產(chǎn)品：：CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞

SC細胞類似產(chǎn)品：：DU145細胞、HT 115細胞、H87細胞

NCIH2085細胞類似產(chǎn)品：：Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞

3AA細胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、LN299細胞、F9細胞

RetroPack PT67細胞類似產(chǎn)品：：MAD109細胞、CAL78細胞、T84細胞

Fu97細胞類似產(chǎn)品：：KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞

SCC-7細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2052細胞、COLO 320 DM細胞、SNG-M細胞

Meat Animal Research Center-145細胞類似產(chǎn)品：：Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞

SUM-52PE細胞類似產(chǎn)品：：GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞

CEM-C7細胞類似產(chǎn)品：：CAL120細胞、NOMO-1細胞、Farage OL細胞

32D CL3細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H87細胞、Colo-201細胞、DAKIKI Clone 1細胞

3-LL細胞類似產(chǎn)品：：CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞

DMS-79細胞類似產(chǎn)品：：U031細胞、AM38細胞、UMUC1細胞

GDM1細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat-FHCRC細胞、WPMY-1細胞、MKN-1細胞

NCI-H1693細胞類似產(chǎn)品：：MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞

RKN細胞類似產(chǎn)品：：Tu177細胞、OE33細胞、ECV304細胞

SW-1116細胞類似產(chǎn)品：：CL1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、MODE-K細胞

IGROV 1細胞類似產(chǎn)品：：HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞

MCA 38細胞類似產(chǎn)品：：MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞

HEP3B2細胞類似產(chǎn)品：：Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞

BE(2)C細胞類似產(chǎn)品：：SUM 149PT細胞、NT2/D1細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞

Ca 9-22細胞類似產(chǎn)品：：Caco-2 BBe細胞、CHL細胞、CHP212細胞

D407細胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞

UCW 100細胞類似產(chǎn)品：：RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞

HCC1833細胞類似產(chǎn)品：：HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞

Bovine ENDometrial cells細胞類似產(chǎn)品：：N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞

HT29細胞類似產(chǎn)品：：SW 962細胞、OVCA-432細胞、HCT_116細胞

RMS13細胞類似產(chǎn)品：：WM115-mel細胞、P3 NS1 Ag4細胞、SP2細胞

JC細胞類似產(chǎn)品：：NCI H157細胞、THEECs細胞、MDCKII-WT細胞

Human Embryo Lung-1細胞類似產(chǎn)品：：H-1437細胞、SKNBE(1)細胞、TKB-1細胞

HeLa 229:人宮頸癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Hs578Bst細胞類似產(chǎn)品：：RCC10 RGB細胞、A427細胞、EFM192C細胞

U20-S細胞類似產(chǎn)品：：MCF-12F細胞、OPM-2細胞、HuT-102細胞

PC-9/GR細胞類似產(chǎn)品：：PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞

MIN-6細胞類似產(chǎn)品：：SCC090細胞、DCS細胞、Caov-4細胞

Emory University-2細胞類似產(chǎn)品：：ME 180細胞、MDA-MB-157細胞、HIT clone T15細胞

JIII細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-468細胞、LS1034細胞、3D4/21細胞

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