"CHL:中國倉鼠肺復(fù)蘇細(xì)胞(提供STR鑒定圖譜)
細(xì)胞生長:貼壁
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較HAO生長,生長狀態(tài)也比較HAO。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長的比較HAO,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較HAO。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時(shí)候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了,老化的會(huì)比較多,對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不HAO的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對(duì)于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不HAO,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn),已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺(tái),底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長得HAO的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
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JURKAT E-6.1細(xì)胞類似產(chǎn)品::MEL細(xì)胞、NCIH647細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞
[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞背景資料:廣泛應(yīng)用于染色體異常測(cè)試。
CHL:中國倉鼠肺復(fù)蘇細(xì)胞(提供STR鑒定圖譜)
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
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HEK-AD293細(xì)胞類似產(chǎn)品::KASUMI1細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞
TE-85 clone 5細(xì)胞類似產(chǎn)品::TE6細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞、FT-293細(xì)胞
培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇:細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中,儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?!緝龃婕?xì)胞】1)選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液,計(jì)數(shù),使細(xì)胞密度達(dá)5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點(diǎn)降低,使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋HAO凍存管并仔細(xì)檢查,一定要蓋緊,做HAO標(biāo)記;6)凍存:在殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時(shí)間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度,過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出,太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時(shí)應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套,以免液氮凍傷。【復(fù)蘇細(xì)胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時(shí)搖動(dòng),使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達(dá)到10/ml,在融后稀釋20倍時(shí),仍能保持5×10/ml數(shù)量。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫
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細(xì)胞生長特性:貼壁
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長,此時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)良HAO,當(dāng)補(bǔ)液時(shí),需避免反復(fù)吹打。
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細(xì)胞
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L428細(xì)胞類似產(chǎn)品::Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞、MCF-7/AdrR細(xì)胞、H82細(xì)胞
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WIL2 Secreting細(xì)胞類似產(chǎn)品::H-441細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞
MM.1S細(xì)胞類似產(chǎn)品::HCC-1419細(xì)胞、C-4I細(xì)胞、F36P細(xì)胞
JB-6 Cl 30細(xì)胞類似產(chǎn)品::U-343 MG細(xì)胞、EC-109細(xì)胞、V79細(xì)胞
H-3255細(xì)胞類似產(chǎn)品::HT 1080細(xì)胞、RL95細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞
NCIH244細(xì)胞類似產(chǎn)品::LIPF155C細(xì)胞、MF2059細(xì)胞、EJ細(xì)胞
NCI-H2066細(xì)胞類似產(chǎn)品::Panc_08_13細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞、3T3細(xì)胞
SK Col 1細(xì)胞類似產(chǎn)品::KOSC-2細(xì)胞、NCIH2228細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞
MES-SA-Dx5細(xì)胞類似產(chǎn)品::CAL-39細(xì)胞、3T3細(xì)胞、38C13細(xì)胞
GA-10(Clone 4)細(xì)胞類似產(chǎn)品::hTERTHME1細(xì)胞、UCH1細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞
NCI-522細(xì)胞類似產(chǎn)品::SR細(xì)胞、He La細(xì)胞、TE14細(xì)胞
RK13細(xì)胞類似產(chǎn)品::CCLP1細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞、H-2444細(xì)胞
293A細(xì)胞類似產(chǎn)品::WC00044細(xì)胞、A-2058細(xì)胞、4175細(xì)胞
SNB19細(xì)胞類似產(chǎn)品::TOV21細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞、H748細(xì)胞
Karpas299細(xì)胞類似產(chǎn)品::DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞
NCI-H87細(xì)胞類似產(chǎn)品::7404細(xì)胞、RH-35細(xì)胞、COLO824細(xì)胞
MCF12A細(xì)胞類似產(chǎn)品::EST50細(xì)胞、NCI-SNU-C2B細(xì)胞、GC-2細(xì)胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞類似產(chǎn)品::Hs729T細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞
2PK3細(xì)胞類似產(chǎn)品::NIH 3T6細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞
CCD-841CoN細(xì)胞類似產(chǎn)品::HPF細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞
Verda reno細(xì)胞類似產(chǎn)品::Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞、KG1A細(xì)胞
CHL:中國倉鼠肺復(fù)蘇細(xì)胞(提供STR鑒定圖譜)
SU-DH-L5細(xì)胞類似產(chǎn)品::PC 61細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞、EBTr細(xì)胞
NCI-H719細(xì)胞類似產(chǎn)品::Ca 9-22細(xì)胞、HLEC細(xì)胞、JG細(xì)胞
KM932細(xì)胞類似產(chǎn)品::T-24細(xì)胞、Caco-2細(xì)胞、HRC-99細(xì)胞
108CC15細(xì)胞類似產(chǎn)品::OAW 42細(xì)胞、BHP10-3細(xì)胞、RT 112細(xì)胞
624mel細(xì)胞類似產(chǎn)品::COLO206細(xì)胞、K-562細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞
Glioma 261細(xì)胞類似產(chǎn)品::A431細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞、WM 115細(xì)胞
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關(guān)鍵字: CHL:中國倉鼠肺復(fù)蘇細(xì)胞(提供STR鑒;
上海冠導(dǎo)生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內(nèi)外細(xì)胞庫引進(jìn)細(xì)胞2000余株。以此為契機(jī),公司組建了冠導(dǎo)細(xì)胞庫,我司細(xì)胞均由資深細(xì)胞培養(yǎng)工程師進(jìn)行培養(yǎng)。我司可以提供的細(xì)胞有:①細(xì)胞系②原代細(xì)胞③穩(wěn)轉(zhuǎn)株④耐藥株⑤標(biāo)記細(xì)胞⑥細(xì)胞配套試劑等。