"RCC10RGB:人腎細胞癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HCC-1428細胞類似產(chǎn)品：：BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞

NCI-H1105細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞

Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞類似產(chǎn)品：：GH3細胞、DrG細胞、Hs 819.T細胞

PG-4細胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

RN細胞類似產(chǎn)品：：SCC-4細胞、4T1細胞、NCI-H1963細胞

Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞類似產(chǎn)品：：OCLY8細胞、HCC-15細胞、HPAF細胞

H-196細胞類似產(chǎn)品：：HCC941122細胞、NCIH510細胞、X63Ag8-653細胞

細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理HAO工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，Zui大的YOU點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復(fù)吹打。

OCI-Ly 18細胞類似產(chǎn)品：：8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞

MALME.3M細胞類似產(chǎn)品：：P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞

SK.OV.3細胞類似產(chǎn)品：：HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞

HCC-70細胞類似產(chǎn)品：：Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞

MB157細胞類似產(chǎn)品：：SNU-1細胞、18G3.cl 1細胞、SK-ChA-1細胞

J45.01細胞類似產(chǎn)品：：H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞

C38細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL1細胞、NCI-H441-4細胞、RBL 2H3細胞

PANC 327細胞類似產(chǎn)品：：HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞

HEK293細胞類似產(chǎn)品：：U-343-MG細胞、HIMEC細胞、Murine Carcinoma-38細胞

Ramos.2G6.4C10細胞類似產(chǎn)品：：Hepa1-6細胞、NCI-H1915細胞、GC-1 spg細胞

WERI-Rb1細胞類似產(chǎn)品：：GCT細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、CAOV3細胞

H-35 Reuber細胞類似產(chǎn)品：：COLO 394細胞、SHSY5Y細胞、HCC1569細胞

Onda 11細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞

SKNBE2C細胞類似產(chǎn)品：：C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞

H1819細胞類似產(chǎn)品：：HEL細胞、NCI-H446細胞、NCI-H1395細胞

SGC-7901/DDP細胞類似產(chǎn)品：：CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞

SGC-7901/DDP細胞類似產(chǎn)品：：CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞

P3-X63Ag8.653細胞類似產(chǎn)品：：PL-11細胞、RMS1598細胞、MUTZ-1細胞

HPAF細胞類似產(chǎn)品：：Hs 729細胞、SKMEL-24細胞、SNK1細胞

NCI-SNU-475細胞類似產(chǎn)品：：PANC-02-03細胞、Madison細胞、BHP-10細胞

HcaF細胞類似產(chǎn)品：：H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞

SW 626細胞類似產(chǎn)品：：LC-1/sq細胞、HK-2 [Human kidney]細胞、159 PT細胞

RKO細胞類似產(chǎn)品：：WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC（Human Schwann）細胞

OVCAR3細胞類似產(chǎn)品：：BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞

RCC10RGB:人腎細胞癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

HPBALL細胞類似產(chǎn)品：：HBL100細胞、FDCP1細胞、3T3-F442A細胞

Centre Antoine Lacassagne-51細胞類似產(chǎn)品：：LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞

hTERT-HME1細胞類似產(chǎn)品：：A-673細胞、COLO 320 HSR細胞、NL-20細胞

HCC-1419細胞類似產(chǎn)品：：Adeno 293細胞、MCFs細胞、INS-1E細胞

Hs-675-T細胞類似產(chǎn)品：：HO8910細胞、C4 I細胞、RPMI-8226S細胞

MKN 45細胞類似產(chǎn)品：：hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞

HL-60 clone15細胞類似產(chǎn)品：：MLOY4細胞、Tn-5B1-4細胞、NIH-OVCAR-3細胞

Bat lung細胞類似產(chǎn)品：：LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞

Hs 604.T細胞類似產(chǎn)品：：H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞

SK-ES細胞類似產(chǎn)品：：LK 2細胞、Emory University-3細胞、U-138 MG細胞

BNL 1MEA.7R.1細胞類似產(chǎn)品：：CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞

VMM5細胞類似產(chǎn)品：：NuTu 19細胞、HCC9724細胞、EM3細胞

alpha TC1 clone 6細胞類似產(chǎn)品：：Leukemic 1210細胞、COLO-320-HSR細胞、H19-7細胞

HT55細胞類似產(chǎn)品：：SUM 159PT細胞、UM-UC-14細胞、ML-2細胞

FRO81-2細胞類似產(chǎn)品：：RIN-m細胞、SW1088細胞、NCI-H196細胞

MHCC 97-H細胞類似產(chǎn)品：：NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞

HEI193細胞類似產(chǎn)品：：DLD1細胞、138MG細胞、UMNSAH/DF-1細胞

BRL-3A細胞類似產(chǎn)品：：Calu-6細胞、Hi5細胞、KM.12細胞

Hs895.T細胞類似產(chǎn)品：：BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞

Michigan Cancer Foundation-10A細胞類似產(chǎn)品：：ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞

NCIH1581細胞類似產(chǎn)品：：H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞

HCC-2935細胞類似產(chǎn)品：：746T細胞、MOLT4細胞、253JBV細胞

KYSE-450細胞類似產(chǎn)品：：MHHCALL2細胞、LA-N-1細胞、SW480細胞

Balb/3T3-4-Cl31細胞類似產(chǎn)品：：PL-5細胞、Tb1.Lu細胞、CHG5細胞

BHK21細胞類似產(chǎn)品：：MHCC97細胞、H2135細胞、SU 86.86細胞

H9c2細胞類似產(chǎn)品：：DU_145細胞、HOS(TE85)細胞、FOX-NY細胞

H446細胞類似產(chǎn)品：：SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞

RN細胞類似產(chǎn)品：：SCC-4細胞、4T1細胞、NCI-H1963細胞

BAC1.2F5細胞類似產(chǎn)品：：LAD-2細胞、HBVP細胞、VB細胞

HANK-1細胞類似產(chǎn)品：：HPAF-II/CD18細胞、Hs274T細胞、NCI-H1618細胞

L5178Y TK+/-3.7.2c細胞類似產(chǎn)品：：293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞

NT2D1細胞類似產(chǎn)品：：GAK細胞、NL20SV細胞、D10細胞

HS0578T細胞類似產(chǎn)品：：L cells (TK-)細胞、TK 10細胞、MGc80-3細胞

Hs 819.T細胞類似產(chǎn)品：：MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞

Hs 742.T細胞類似產(chǎn)品：：High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞

OCLY8細胞類似產(chǎn)品：：PF-382細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞、CFSC-2G細胞

S91細胞類似產(chǎn)品：：EFM192細胞、HTh 74細胞、MC57細胞

SK.OV.3細胞類似產(chǎn)品：：HME1細胞、H-2110細胞、U20S細胞

SG231細胞類似產(chǎn)品：：K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞

Hs 600.T細胞類似產(chǎn)品：：B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞

LLC-WRC 256細胞類似產(chǎn)品：：HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞

3T3-Swiss albino細胞類似產(chǎn)品：：RPTEC/TERT1細胞、SVG(P12)細胞、ANA-1細胞

LNCaP細胞類似產(chǎn)品：：Y79細胞、CCK81細胞、PE/CA-PJ34細胞

RGC6細胞類似產(chǎn)品：：SF-295細胞、MFE 296細胞、KYSE 180細胞

UCLA RO-81A-1細胞類似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、Hep3B細胞、M14-MEL細胞

OCI/AML-2細胞類似產(chǎn)品：：HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞

Vero C1008細胞類似產(chǎn)品：：COLO 206F細胞、SU 86.86細胞、TW01細胞

COS-1細胞類似產(chǎn)品：：OACP4C細胞、H-2172細胞、CL-34細胞

NCI-H1155細胞類似產(chǎn)品：：H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞

NCIH2342細胞類似產(chǎn)品：：RTMC細胞、ssMCF-7細胞、CAL148細胞

Molm 14細胞類似產(chǎn)品：：M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞

BetaTC6細胞類似產(chǎn)品：：NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞

MHCCLM3細胞類似產(chǎn)品：：HCC0095細胞、H2110細胞、SNU-719細胞

RH-30細胞類似產(chǎn)品：：IAR-20細胞、SK-N-BE2C細胞、CMT 93細胞

PANC3.27細胞類似產(chǎn)品：：BT-B細胞、AU 565細胞、SNGM細胞

MOVAS細胞類似產(chǎn)品：：SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞

HT55細胞類似產(chǎn)品：：SUM 159PT細胞、UM-UC-14細胞、ML-2細胞

GM3570細胞類似產(chǎn)品：：HS-729細胞、OCILY10細胞、GM02132細胞

GM3570細胞類似產(chǎn)品：：HS-729細胞、OCILY10細胞、GM02132細胞

Farage OL細胞類似產(chǎn)品：：F-36P細胞、SK-RC 52細胞、SK-MEL5細胞

COLO-320-DM細胞類似產(chǎn)品：：GEO細胞、KYSE-520細胞、SW1353細胞

NCI-H1672細胞類似產(chǎn)品：：BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞

Hi5細胞類似產(chǎn)品：：JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞

HPAF細胞類似產(chǎn)品：：Hs 729細胞、SKMEL-24細胞、SNK1細胞

T-HEECs細胞類似產(chǎn)品：：QBI-HEK 293A細胞、MV4;11細胞、MDA134細胞

Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞類似產(chǎn)品：：L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞

H-1975細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞

BT325細胞類似產(chǎn)品：：QGY細胞、J82細胞、HuH7細胞

JG細胞類似產(chǎn)品：：SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞

NCIH1385細胞類似產(chǎn)品：：P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞

HFL1細胞類似產(chǎn)品：：MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞

CEMO-1細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1395細胞、MADB 106細胞、NUGC-3細胞

LLC-MK-2細胞類似產(chǎn)品：：A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞

Ramos (RA 1)細胞類似產(chǎn)品：：hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞

KG-1細胞類似產(chǎn)品：：SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞

HT 1376.T細胞類似產(chǎn)品：：U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞

Sp2/O-Ag14細胞類似產(chǎn)品：：MUVEC細胞、SJ-RH30細胞、H-87細胞

Ramos (RA 1)細胞類似產(chǎn)品：：hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞

Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2107細胞、NCI-H1581細胞、NFS-60細胞

HOP 92細胞類似產(chǎn)品：：WiDr/S細胞、624mel細胞、DI-TNC1細胞

OVCA432_Bast細胞類似產(chǎn)品：：NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞

Ej138細胞類似產(chǎn)品：：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞

RCC10RGB:人腎細胞癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

H-378細胞類似產(chǎn)品：：SW839細胞、NCI-H87細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞

QBI-293A細胞類似產(chǎn)品：：G401細胞、C33-A細胞、Hs729細胞

COLO 206細胞類似產(chǎn)品：：H-1650細胞、MC-3T3-E1細胞、HEC-1-A細胞

K7M2 wt細胞類似產(chǎn)品：：Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞

SW 1353細胞類似產(chǎn)品：：Hs 729.T細胞、WM266-4細胞、alphaTC clone 6細胞

HBZY1細胞類似產(chǎn)品：：VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞

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