"SKG-IIIa:人宮頸癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升GAO，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當(dāng)溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當(dāng)溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑別敏感解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

C57 Mouse Tumor 93細胞類似產(chǎn)品：：Ramos(RA1)細胞、HeLa-229細胞、Sf21細胞

HuCCT-1細胞類似產(chǎn)品：：T-98細胞、AR-42J細胞、RPMI1788細胞

MB468細胞類似產(chǎn)品：：Pt-K2細胞、BT325細胞、HEK-293A細胞

SNT-8細胞類似產(chǎn)品：：Vero E-6細胞、HPAEC細胞、HET-1A細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

SKG-IIIa:人宮頸癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

KYSE0410細胞類似產(chǎn)品：：H929細胞、GTL-16細胞、SKG-IIIa細胞

WM239細胞類似產(chǎn)品：：GM03320D細胞、SNU-423細胞、TU 686細胞

MEG-01細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H165細胞、CAL 33細胞、LOU-NH91細胞

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴模@種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升GAO到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞傳代方法：２x１０^４ cells/ml

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

SKG-IIIa:人宮頸癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當(dāng)補液時，需避免反復(fù)吹打。

HKBML細胞類似產(chǎn)品：：HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞

IHH4細胞類似產(chǎn)品：：NCTC929細胞、NCI-H1836細胞、VP267細胞

SUP-B1細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞

HuCC-T1細胞類似產(chǎn)品：：HOP 62細胞、P3HR1-BL細胞、H-209細胞

NBL-12細胞類似產(chǎn)品：：PT-K75細胞、GM-637細胞、WI 38細胞

HET-1A細胞類似產(chǎn)品：：GM3190細胞、Caco2-BBE細胞、LX-2細胞

MCCAR細胞類似產(chǎn)品：：TGHAVSMC細胞、U266 B1細胞、H1437細胞

Tn5 B1-4細胞類似產(chǎn)品：：CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞

HEK293A細胞類似產(chǎn)品：：NK62a細胞、Panc 4.03細胞、L-540細胞

CORL279細胞類似產(chǎn)品：：MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞

COLO-320HSR細胞類似產(chǎn)品：：UACC-812細胞、G-401細胞、NIH3T3細胞

BL2141細胞類似產(chǎn)品：：CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞

P388細胞類似產(chǎn)品：：KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞

KMB 17細胞類似產(chǎn)品：：MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞

NCI-H209細胞類似產(chǎn)品：：RA.1細胞、H1693細胞、KBM-7細胞

CCRF-CEM/S細胞類似產(chǎn)品：：Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞

CCRF-CEM/S細胞類似產(chǎn)品：：Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞

NCTC 1469細胞類似產(chǎn)品：：WiDrTC細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞、HCC-1171細胞

End1/E6E7細胞類似產(chǎn)品：：Vero E6細胞、HECCL-1細胞、H1869細胞

EoL-1 cell細胞類似產(chǎn)品：：Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞

HCC-366細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2591細胞、A 549細胞、LC-1細胞

OCI AML3細胞類似產(chǎn)品：：SW 839細胞、MOLP-8細胞、OVISE細胞

L2細胞類似產(chǎn)品：：D562細胞、TALL-104細胞、NPC-TW 039細胞

UACC893細胞類似產(chǎn)品：：H-841細胞、HEK-293FT細胞、CCRF-CEM/S細胞

SKG-IIIa:人宮頸癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

LCLC103H細胞類似產(chǎn)品：：CHO-S細胞、OAC-P4C細胞、MDA-MB-134細胞

CNE-2Z細胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞

Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞類似產(chǎn)品：：NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞

CHP 126細胞類似產(chǎn)品：：H-23細胞、OVCAR.3細胞、Cates-1B細胞

Hs822T細胞類似產(chǎn)品：：BL6細胞、HR-1細胞、HLE細胞

P3/NS1/1-Ag4-1細胞類似產(chǎn)品：：EU-3細胞、GM 2132細胞、SHP-77細胞

HCC0044細胞類似產(chǎn)品：：C-4 I細胞、Hs 852.T細胞、VERO76細胞

MDA-MB361細胞類似產(chǎn)品：：DMS-53細胞、LA4細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞

HTSMC細胞類似產(chǎn)品：：LIM-1215細胞、Ej138細胞、HTori-3細胞

Panc5.04細胞類似產(chǎn)品：：Hs281T細胞、H2342細胞、TOV21細胞

GT1-1細胞類似產(chǎn)品：：LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞

HH [Human lymphoma]細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1184細胞、H-1882細胞、C2A細胞

A 549細胞類似產(chǎn)品：：HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞

CACO2細胞類似產(chǎn)品：：PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞

U-87細胞類似產(chǎn)品：：LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞

786.O細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2347細胞、Caov-3細胞、NCIH1838細胞

SK-MEL-31細胞類似產(chǎn)品：：CHO cell clone K1細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞、PC 61.5.3細胞

OUMS-23細胞類似產(chǎn)品：：210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞

U373 MG細胞類似產(chǎn)品：：D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞

OVCAR 433細胞類似產(chǎn)品：：COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞

MUTZ1細胞類似產(chǎn)品：：P3-X63Ag8細胞、Human Epithelioma-2細胞、HITT15細胞

MDA-468細胞類似產(chǎn)品：：HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞

RL95細胞類似產(chǎn)品：：MMVECs細胞、P30/0HK細胞、OCI/AML-2細胞

NCI-157細胞類似產(chǎn)品：：KP-N-RT細胞、NCIH378細胞、HCC0038細胞

UO.31細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞

A9 (Hamprecht)細胞類似產(chǎn)品：：HLF細胞、CFSC-2G細胞、HEK293S細胞

ML2細胞類似產(chǎn)品：：HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞

HuH-28細胞類似產(chǎn)品：：MCCAR細胞、Hs934T細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞

786-O細胞類似產(chǎn)品：：P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞

HeLa/S3細胞類似產(chǎn)品：：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、NCTC1469細胞、GP-293細胞

Caco-2/BBe細胞類似產(chǎn)品：：TB-1 Lu細胞、NB4細胞、TE 671細胞

MRC 5細胞類似產(chǎn)品：：BE2-C細胞、PE CA PJ34細胞、RC-4B細胞

University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞類似產(chǎn)品：：A 375細胞、RLE-6TN細胞、NCM-460細胞

TC-1 [Mouse lung]細胞類似產(chǎn)品：：Hs 274細胞、HuH-28細胞、NCIH2023細胞

MDCK Type II細胞類似產(chǎn)品：：LMH細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞、HEC-1A細胞

aNK細胞類似產(chǎn)品：：OVCA8細胞、IMR 90細胞、MNNG細胞

HL-60 clone15細胞類似產(chǎn)品：：MLOY4細胞、HPAF2細胞、PLA-801C細胞

SUP-B1細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 7951細胞、WC00079細胞、Cor L88細胞

AM細胞類似產(chǎn)品：：HFLS-RA細胞、GLC-15細胞、HO1N1細胞

HFL1細胞類似產(chǎn)品：：MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞

LAN6細胞類似產(chǎn)品：：TE-8細胞、AD-293細胞、U373細胞

PANC-04-03細胞類似產(chǎn)品：：MPC-83細胞、ADR-RES細胞、H-II-E-C3細胞

MKN-1細胞類似產(chǎn)品：：SNB-19細胞、SUM-159-PT細胞、HDLM-2細胞

Normal Rat, August 3, 1983細胞類似產(chǎn)品：：HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞

NCI-841細胞類似產(chǎn)品：：AML-2細胞、Rat1細胞、LS180細胞

NCI-H2023細胞類似產(chǎn)品：：G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞

hEM15A細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞

HNSC細胞類似產(chǎn)品：：HCASMC細胞、MDAMB435S細胞、HEL細胞

OCI-AML-5細胞類似產(chǎn)品：：SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞

KM-H2細胞類似產(chǎn)品：：HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞

EBC-1細胞類似產(chǎn)品：：HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞

HPDEC細胞類似產(chǎn)品：：COLO_320DM細胞、Jurkat Clone E6-1細胞、HRGEC細胞

H-292細胞類似產(chǎn)品：：WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞

McA-RH 7777細胞類似產(chǎn)品：：H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞

H-1417細胞類似產(chǎn)品：：CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞

HCA 7細胞類似產(chǎn)品：：H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞

HS852.T細胞類似產(chǎn)品：：HEL-299細胞、NCIH1915細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞

T/GHA-VSMC細胞類似產(chǎn)品：：SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞

H-865細胞類似產(chǎn)品：：Huh-7.5細胞、A20細胞、SKES-1細胞

B16 melanoma細胞類似產(chǎn)品：：As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞

COLO 16細胞類似產(chǎn)品：：EFM192C細胞、MSTO-211H細胞、MES23.5細胞

FL62891細胞類似產(chǎn)品：：PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞

LLC-PK1細胞類似產(chǎn)品：：TR146細胞、RBE4細胞、A549/ATCC細胞

32D clone3細胞類似產(chǎn)品：：A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞

NCI-H1522細胞類似產(chǎn)品：：H441細胞、GM03671細胞、SK-HEP-1細胞

KMB 17細胞類似產(chǎn)品：：MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞

GTL-16細胞類似產(chǎn)品：：H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞

P3HR1-BL細胞類似產(chǎn)品：：Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞

NKL細胞類似產(chǎn)品：：Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、C4-2 B細胞、SW 1222細胞

HLEpiC細胞類似產(chǎn)品：：Tca8113細胞、AAV293細胞、DHL5細胞

OK-WT細胞類似產(chǎn)品：：BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞

BSC40細胞類似產(chǎn)品：：J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞

TFH細胞類似產(chǎn)品：：RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞

MRCV細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H524細胞、BEP2D細胞、D-283細胞

UO31細胞類似產(chǎn)品：：MHH-CALL-2細胞、MV-4:11細胞、293 HEK細胞

X63Ag8-653細胞類似產(chǎn)品：：HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞

H23細胞類似產(chǎn)品：：EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞

Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞類似產(chǎn)品：：Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞

HBVP細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞

Hs 821.T細胞類似產(chǎn)品：：RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞

THP-1細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR420細胞、P388-D1細胞、High Five細胞

H-2009細胞類似產(chǎn)品：：NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞

SKG-IIIa:人宮頸癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

D341Med細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞

JF305細胞類似產(chǎn)品：：HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞

B16 F10細胞類似產(chǎn)品：：A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞

PLC細胞類似產(chǎn)品：：Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞

MN9D細胞類似產(chǎn)品：：U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞

OCI/AML-5細胞類似產(chǎn)品：：EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞

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