外泌體純化試劑盒 （磁珠型）
一、產(chǎn)品簡介。
本產(chǎn)品是一款以磁珠為分離材料的外泌體純化試劑盒。在特定的緩沖體系中，磁珠可吸附外泌體，并被特定的洗脫液（或 PBS 與 ddH2O）洗脫下來，從而完成外泌體的分離與純化。同時，利用PBS 或 ddH2O 洗脫后的外泌體不含其它化合物，可直接用于動物體內(nèi)注射實驗。
二、運輸與存儲條件。
本產(chǎn)品低溫運輸，4 ℃保存，有效期 12 個月。
三、特點與優(yōu)勢。
1. 本試劑純化效率高，外泌體回收率達到 95%以上。
2. 純化后的外泌體純度高，蛋白含量在 5%以內(nèi)。
3. 純化后的外泌體不含其它化合物，可直接用于動物實驗。
4. 本試劑盒操作簡單，能夠快速（2h）完成外泌體純化。
四、使用說明。
1. 本產(chǎn)品可用于血清等粘度較大液體中外泌體的純化，也可用于細胞培養(yǎng)上清等粘度較小液體中外泌體的分離純化，其純化體系略有不同。
2. 樣品準備。血清或細胞培養(yǎng)液轉(zhuǎn)入離心管，5 000 rpm，4 ℃離心 5 min，上清轉(zhuǎn)移至新的離心管
中，用于外泌體純化。
3. 磁珠準備。取出試劑盒中的瓶裝磁珠，震蕩混勻（vortex）30 sec，利用移液器吸取 1 ml 磁珠，加入 50 ml 離心管中，5 000 rpm，4 ℃離心 2 min，棄上清。
4. 磁珠洗滌。加入 10 ml 4 ℃預冷的 PBS（0.2 μm 濾膜過濾），震蕩混勻（vortex）30 sec，5 000 rpm，4 ℃離心 5 min，棄上清。
5. 外泌體吸附。根據(jù)樣品類型，按照下表，配制外泌體純化體系，置于旋轉(zhuǎn)混合器中，4 ℃旋轉(zhuǎn)混合 60 min。
6. 磁珠收集。將離心管置于磁力架上，4 ℃靜置 5-10 min，使磁珠聚集，棄上清?；?5 000 rpm，4 ℃離心 5 min，沉淀磁珠，棄上清。
7. 殘余液體去除。將裝有磁珠沉淀的離心管轉(zhuǎn)入離心機，5 000 rpm，4 ℃離心 1 min，用移液器吸盡管中殘余液體。
8. 洗脫。加入 1.2 ml Buffer EXE（或 PBS 與 ddH2O），用移液器輕輕混合 10 次，轉(zhuǎn)移到 2 ml 離心管中。
9. 收集。8 000 rpm，4 ℃離心 2 min，立即將上清轉(zhuǎn)移至 EP 管中，即為純化的外泌體溶液。
10. 過濾。利用 PBS（0.2 μm 濾膜過濾）潤洗針式過濾器 A 和 B（即過濾 5 ml PBS），并利用針式過濾器 A 過濾外泌體溶液，除去體積較大雜質(zhì)。
11. 濾液利用針式過濾器 B 再次過濾，除去較小的雜質(zhì)，得到純化的外泌體溶液。
12. 純化的外泌體溶液可立即用于粒徑檢測（NTA 分析），或保存在-80 ℃。
五、注意事項。
1. 磁珠嚴禁凍存，否則失效。
2. 用于 NTA 檢測的純化外泌體溶液不可凍存，可暫時置于 4 ℃冰箱中保存（7 天）。
關鍵字： 外泌體純化試劑盒 （磁珠型）;外泌體;外泌體純化;
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