"TCCSUP:人膀胱移行細胞癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MDA MB 175 VII細胞類似產品：：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞

KYSE-450細胞類似產品：：MHHCALL2細胞、LA-N-1細胞、SW480細胞

OB2細胞類似產品：：Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞

TI-73細胞類似產品：：Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

MUTZ-3細胞類似產品：：H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞

SKUT-1細胞類似產品：：H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞

NCI-H2172細胞類似產品：：Pt K1細胞、NPC-TW 039細胞、Detroit 562細胞

培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內水分在凍結前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋HAO凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做HAO標記；６)凍存：在殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷。【復蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數量要充分，密度應達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數量。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代，２-３天換液１次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

細胞培養(yǎng)技術也叫細胞克隆技術，在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術。不論對于整個生物工程技術，還是其中之一的生物克隆技術來說，細胞培養(yǎng)都是一個必不可少的過程，細胞培養(yǎng)本身就是細胞的大規(guī)?？寺?。細胞培養(yǎng)技術可以由一個細胞經過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞，這是克隆技術必不可少的環(huán)節(jié)，而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆。通過細胞培養(yǎng)得到大量的細胞或其代謝產物。因為生物產品都是從細胞得來，所以可以說細胞培養(yǎng)技術是生物技術中Zui核心、Zui基礎的技術。公司是國內Zui大的細胞庫之一，迄今為止，細胞收錄背景資料清晰，活力狀態(tài)良HAO的細胞系達1356株，其中大部分是1999年以來從美國ATCC、德國DSMZ和日本RIKEN等分批次引進的細胞系，是全國Zui權威的細胞庫，為您實驗提供Zui可信賴的細胞。公司立足上海，輻射全國，面向世界，為國內科研細胞實驗做綿薄之力。

CMK細胞類似產品：：LS-411細胞、CV-1細胞、NCI-H128細胞

Med 341細胞類似產品：：373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞

GM00215A細胞類似產品：：HOSEpiC細胞、H2122細胞、GM02219D細胞

JurkatE6-1細胞類似產品：：Walker-256-TC細胞、NR8383.1細胞、28SC細胞

HELF細胞類似產品：：BAR-T細胞、MBT-2細胞、CAL-120細胞

SW-780細胞類似產品：：U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞

MIA-Pa-Ca-2細胞類似產品：：451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞

Capan 1細胞類似產品：：CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞

Walker256細胞類似產品：：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞

H-650細胞類似產品：：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞

Capan-2細胞類似產品：：H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞

MC-3T3細胞類似產品：：CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞

MDA-MB-453細胞類似產品：：H-2444細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞、HS-729細胞

RGM1細胞類似產品：：C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞

Mv.1.Lu細胞類似產品：：YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞

HCC-827細胞類似產品：：MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞

HCC-827細胞類似產品：：MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞

KMM-1細胞類似產品：：MCF12F細胞、RPMI 2650細胞、CCRFCEM細胞

EVSAT細胞類似產品：：MB49細胞、HCC0044細胞、PVEC細胞

DHL-4細胞類似產品：：NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞

OsACL細胞類似產品：：Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞

HFB細胞類似產品：：SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞

HEK-293A細胞類似產品：：ECV-304細胞、U-373 MG細胞、KPL-4細胞

MC 3T3-E1細胞類似產品：：SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞

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SKNDZ細胞類似產品：：751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞

H1672細胞類似產品：：MIHA細胞、H-1437細胞、HS-695T細胞

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bEND.3細胞類似產品：：ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞

H1618細胞類似產品：：TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞

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DMS-114細胞類似產品：：MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞

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VP303細胞類似產品：：Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞

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52PE細胞類似產品：：Panc04.03細胞、BT-20細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞

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H522細胞類似產品：：HUASMC細胞、JHH-2細胞、Daudi細胞

H-358細胞類似產品：：PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞

102PT細胞類似產品：：KMH2細胞、COLO 16細胞、C2C12細胞

NCI-H1819細胞類似產品：：NCIH2110細胞、KYSE 510細胞、CNE1細胞

U-hth74細胞類似產品：：MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞

H-1522細胞類似產品：：KNS-42細胞、CAL-78細胞、Hs 766.T細胞

L5178-R細胞類似產品：：Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞

P388-D1細胞類似產品：：SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞

Hs819T細胞類似產品：：HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞

CCK-81細胞類似產品：：H6c7細胞、MA-c細胞、Mouse Colon 38細胞

KMS18細胞類似產品：：NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞

MCM細胞類似產品：：P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞

NCIH1734細胞類似產品：：SUDHL-1細胞、NCI-H1395細胞、SW-403細胞

SW-1990細胞類似產品：：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞

UC-3細胞類似產品：：HCFB（HCF）細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞

Clone 15 HL-60細胞類似產品：：Hs-578Bst細胞、PCI:SG231細胞、MDA MB 436細胞

IOSE 80細胞類似產品：：H2330細胞、HEK293-F細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞

GM00215A細胞類似產品：：HOSEpiC細胞、HEK 293FT細胞、4T1細胞

KU1919細胞類似產品：：MC9細胞、NMC-G1細胞、Panc 04.03細胞

NK-10A細胞類似產品：：X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞

IOSE-Van細胞類似產品：：VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞

JCA-1細胞類似產品：：NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞

SKNBE-1細胞類似產品：：SKOV-433細胞、BC3H-1細胞、JS1細胞

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Colon38細胞類似產品：：H125細胞、RC13細胞、JF305細胞

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MCF 10A細胞類似產品：：OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞

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KP 4細胞類似產品：：Saos2細胞、D341Med細胞、CCD 19Lu細胞

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RCC_7860細胞類似產品：：U-2 OS細胞、IOSE80UBC細胞、OLN93細胞

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WEHI-3B細胞類似產品：：Okayama University Medical School-23細胞、H1385細胞、GA-10-Clone-4細胞

WERI細胞類似產品：：OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞

HDQ-P1細胞類似產品：：HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞

F98細胞類似產品：：MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞

HOS細胞類似產品：：S16細胞、COLO680N細胞、MIA-PaCa-2細胞

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PC10細胞類似產品：：MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞

MG63細胞類似產品：：SW 1271細胞、VP 229細胞、SW 13細胞

HO1N1細胞類似產品：：Case 3細胞、Clone M-3細胞、VMM5A細胞

LNCaP FGC細胞類似產品：：H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞

H1838細胞類似產品：：DCS細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDAMB157細胞

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