血液 RNA 保護與提取試劑盒
一、產(chǎn)品簡介。
血液 RNA 保護與提取試劑是集血液 RNA 保護與提取為一體的試劑，與血液混合后，可以有效抑制血液中的 RNA 降解，且混合物可直接用于 RNA 提取。
二、運輸與存儲條件。
本產(chǎn)品低溫運輸，-20 ℃避光保存，有效期 12 個月，使用時置于 4 ℃存放，1 個月內(nèi)用完。
三、特點與優(yōu)勢。
1. 本試劑與血液混合后，可有效抑制血液中的 RNA 酶活性，保護 RNA 免于降解。
2. 本試劑與血液混合后可直接用于 RNA 提取。
四、自備試劑。
氯仿（三氯甲烷），異丙醇，75%乙醇，RNase-free EP 管和槍尖。
五、使用說明。
1. 血液處理。血液采入抗凝管后立即顛倒混勻，防止凝結(jié)，并盡快轉(zhuǎn)入裝有 RNA 保護與提取試劑的試管中，震蕩（Vortex）混勻。抗凝血的體積控制在 3 mL 左右為宜，體積不夠時，可以用RNase-free ddH2O 補齊（不可用 PBS）。該混合液可室溫保存 3 天， 4 ℃保存 1 周，或 -20 ℃長期保存，RNA 不會降解。
2. 離心。12,000×g，4 ℃離心 5 min，管底出現(xiàn)少許沉淀，上清轉(zhuǎn)移至新的 15 mL 離心管。
3. 加入 1.8 mL 氯仿，震蕩（Vortex）混勻 30 sec。
4. 12,000×g，4 ℃離心 10 min，樣品分為三層，RNA 集中在上層無色水相中，DNA 集中在中間層，蛋白集中在下層的淡紫紅液相中。
5. 上層水相轉(zhuǎn)移到 2 支 15 mL 離心管中，每管加入等體積的異丙醇，震蕩（vortex）混勻。
6. 12,000×g，4 ℃離心 10 min，可在管壁或管底看到白色的 RNA 沉淀，棄上清。
7. 加入 1 mL 75%的乙醇，震蕩（vortex）洗滌 RNA 15 sec。
8. 12,000×g，4 ℃離心 5 min，RNA 沉淀到管底，棄洗滌液。
9. 瞬時高速離心，使管壁上的液體離心到管底，利用微量移液器輕輕吸取全部液體。
10. 加入 100-300 μL RNA 溶解液或 RNase-free ddH2O，溶解 RNA。
11. 測定 RNA 的濃度與純度，用于反轉(zhuǎn)錄或其它實驗，或保存于-80 ℃冰箱。
六、注意事項。
1. RNA 保存和提取試劑與血液混合后，若血液較少，可以用 RNase-free ddH2O 補足體積到 12 mL，但嚴禁使用 PBS 補足體積，否則導(dǎo)致 RNA 提取失敗。
2. 血液中 RNA 酶含量較高，RNA 容易降解，因此，血液采入抗凝管后，應(yīng)在 10 min 內(nèi)轉(zhuǎn)入 RNA保護與提取試劑中，方可有效保護 RNA 免于降解。
3. 轉(zhuǎn)移上層水相時不要吸入中間層或下層液體，否則導(dǎo)致 DNA 及蛋白污染，降低 RNA 純度。
4. RNA 保護與提取試劑具有腐蝕性與刺激性，使用時請穿好實驗服、佩戴乳膠手套和安全眼鏡，以避免 RNA 保護與提取試劑飛濺導(dǎo)致的皮膚、眼睛或者呼吸道等部位的化學(xué)灼傷。如果不慎接觸了皮膚或者眼睛，請立即用大量水沖洗，必要時去醫(yī)院護理。
關(guān)鍵字： 血液RNA保護與提取;血液RNA;
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