"KP-N-YN:人平滑肌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質濃度升GAO，并在細胞內形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

SGC 7901細胞類似產(chǎn)品：：U-2932細胞、UK Pan-1細胞、P30/0HK細胞

WEHI 164細胞類似產(chǎn)品：：HFLS-OA細胞、H-250細胞、Neuro-2a細胞

GLRK 13細胞類似產(chǎn)品：：IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞

NALM 6細胞類似產(chǎn)品：：MDA-1386細胞、BT-549細胞、EC-109細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

KP-N-YN:人平滑肌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

MESSA/Dx5細胞類似產(chǎn)品：：KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞

SNU-182細胞類似產(chǎn)品：：B-104細胞、Hep 3B細胞、MDA-MB-175細胞

293T/17細胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升GAO到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

KP-N-YN:人平滑肌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

NTERA2細胞類似產(chǎn)品：：NBL-4細胞、NK-92 MI細胞、SW 1353細胞

Colo-206F細胞類似產(chǎn)品：：Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、V-79細胞、NCI-H1930細胞

L cells細胞類似產(chǎn)品：：HMC3細胞、M619細胞、MKN 28細胞

Kato-III細胞類似產(chǎn)品：：Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞

SHEP1細胞類似產(chǎn)品：：SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞

Hep 3B2.1-7細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB134細胞、LAPC4細胞、BT-325細胞

WM 266-4細胞類似產(chǎn)品：：CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞

NCI-H838細胞類似產(chǎn)品：：hTERT-RPE-1細胞、R1610細胞、Okayama University Medical School-23細胞

MDAPCa-2b細胞類似產(chǎn)品：：TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞

SUM-190細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1355細胞、FL62891細胞、Oka-C1細胞

PL12細胞類似產(chǎn)品：：16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞

Mc Ardle 7777細胞類似產(chǎn)品：：PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞

B16BL6細胞類似產(chǎn)品：：HEI193細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞、MSF細胞

A-375SM細胞類似產(chǎn)品：：HCa/16A3-F細胞、NCIH1355細胞、NR8383細胞

S.B.細胞類似產(chǎn)品：：BEL7402細胞、HEK-293-EBNA細胞、DU 145細胞

MDAMB134VI細胞類似產(chǎn)品：：R2C細胞、HCC0015細胞、RPMI 1846細胞

MDAMB134VI細胞類似產(chǎn)品：：R2C細胞、HCC0015細胞、RPMI 1846細胞

Dakiki細胞類似產(chǎn)品：：LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞

Panc 03.27細胞類似產(chǎn)品：：Scott細胞、PANC-04-03細胞、MAVER1細胞

MDA436細胞類似產(chǎn)品：：UMR106細胞、HCE-T細胞、Anip 973細胞

GM03573細胞類似產(chǎn)品：：L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、GM03320細胞、H-2141細胞

C166細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、NCI-SNU-601細胞、NCI-H847細胞

KYSE270細胞類似產(chǎn)品：：2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞

Molm 14細胞類似產(chǎn)品：：M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞

KP-N-YN:人平滑肌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Fu97細胞類似產(chǎn)品：：KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞

BE2M17細胞類似產(chǎn)品：：LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞

ZR751細胞類似產(chǎn)品：：PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞

293-H細胞類似產(chǎn)品：：NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞

HT-1376細胞類似產(chǎn)品：：SUSM1細胞、NCI-H716細胞、KBM7細胞

H-1341細胞類似產(chǎn)品：：A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞

MMAc.SF細胞類似產(chǎn)品：：PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞

MOLT-3細胞類似產(chǎn)品：：HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞

UO.31細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞

ARH-77細胞類似產(chǎn)品：：RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞

ABC-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞

SKHEP-1細胞類似產(chǎn)品：：SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞

NS-1-Ag4-1細胞類似產(chǎn)品：：H661細胞、Tb1Lu細胞、OUMS27細胞

SK-RC 52細胞類似產(chǎn)品：：BLO11細胞、McCoy細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞

L(TK-)細胞類似產(chǎn)品：：MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞

APRE-19細胞類似產(chǎn)品：：HuTu-80細胞、RAW2647細胞、OCI-LY-1細胞

OCI-Ly03細胞類似產(chǎn)品：：L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞

LLC細胞類似產(chǎn)品：：SK-RC 52細胞、Eca 109細胞、OCI-AML-2細胞

SW-1222細胞類似產(chǎn)品：：SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞

J774A.1細胞類似產(chǎn)品：：32D:cl3細胞、UCLA-SO-14細胞、U-138-MG細胞

P3X63 AG8-653細胞類似產(chǎn)品：：T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞

NCIH2107細胞類似產(chǎn)品：：H295R細胞、CD-18細胞、Hs 822.T細胞

BEL 7404細胞類似產(chǎn)品：：Colo205細胞、JiyoyeP-2003細胞、HIMEC細胞

MC/9細胞類似產(chǎn)品：：A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞

NEC8細胞類似產(chǎn)品：：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Rca-B細胞、KYSE410細胞

CMT64細胞類似產(chǎn)品：：LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞

Lu99A細胞類似產(chǎn)品：：B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞

U-138MG細胞類似產(chǎn)品：：NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞

NCIH2227細胞類似產(chǎn)品：：OK細胞、RCC-JF細胞、HMrSV5細胞

IAR 20細胞類似產(chǎn)品：：NG-108-15細胞、N9細胞、293 F細胞

OSC-19細胞類似產(chǎn)品：：BE2_C細胞、MDA 1386細胞、CL 1-0細胞

RL95-2細胞類似產(chǎn)品：：Clone 166細胞、GM03570細胞、Molm 13細胞

CHP212細胞類似產(chǎn)品：：CTV1細胞、T-98細胞、Farage Original Line細胞

Roswell Park Memorial Institute 8226細胞類似產(chǎn)品：：Clone Y1細胞、H-2087細胞、SRA 01/04細胞

RINm-5F細胞類似產(chǎn)品：：Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞

UT-7細胞類似產(chǎn)品：：HCCC-9810細胞、SU-DHL-10細胞、T/GHA-VSMC細胞

Colon-38細胞類似產(chǎn)品：：CEM/0細胞、MES-SA細胞、MDCK-2細胞

L cells (TK-)細胞類似產(chǎn)品：：Karpas 422細胞、GLC-82細胞、LLC-PK1細胞

786-O細胞類似產(chǎn)品：：P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞

HOC-1細胞類似產(chǎn)品：：SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞

IPAM-WT細胞類似產(chǎn)品：：Mink細胞、Hs 822.T細胞、BEND細胞

GM02219C細胞類似產(chǎn)品：：MCF 10A細胞、Lec1細胞、RD 2細胞

NRK 52E細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞

RAOEC細胞類似產(chǎn)品：：KNS62細胞、WSU-HN13細胞、H-1355細胞

H.Ep. No. 2細胞類似產(chǎn)品：：RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞

AE1201細胞類似產(chǎn)品：：COLO 357細胞、WM-266-mel細胞、MM1S細胞

Duke University 4475細胞類似產(chǎn)品：：SUM-190PT細胞、EM3細胞、CMT64細胞

SUM52細胞類似產(chǎn)品：：PC-12細胞、NCIH2081細胞、NCI-H524細胞

HEK293-H細胞類似產(chǎn)品：：SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞

Normal Rat Kidney細胞類似產(chǎn)品：：526 mel細胞、HVSMC細胞、Hepa-RG細胞

Caco-2 BBe細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞

HFL-1細胞類似產(chǎn)品：：CCRF-SB細胞、RCC10RGB細胞、H196細胞

RFL 6細胞類似產(chǎn)品：：BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞

Kelly細胞類似產(chǎn)品：：OSC19細胞、CHL-IU細胞、CCD-1095Sk細胞

SK-Mel 2細胞類似產(chǎn)品：：GMK,BSC-1細胞、YAC細胞、Tb 1 Lu細胞

hADSCs細胞類似產(chǎn)品：：CLONE M3細胞、MESSA Dx5細胞、J82COT細胞

CAL851細胞類似產(chǎn)品：：CPA 47細胞、SNU216細胞、hTERT-RPE-1細胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞類似產(chǎn)品：：B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞

NCIH209細胞類似產(chǎn)品：：LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞

SUDHL5細胞類似產(chǎn)品：：T98-G細胞、NEC-8細胞、KP 4細胞

HM06.A1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H847細胞、H2029細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞

SCLC21H細胞類似產(chǎn)品：：OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞

L 929細胞類似產(chǎn)品：：SUNE-1細胞、HPAF-II/CD18細胞、H711細胞

MM1S細胞類似產(chǎn)品：：L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞

INS1細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞

SMMC-7721細胞類似產(chǎn)品：：CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞

MOLT-4細胞類似產(chǎn)品：：HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞

SW1353細胞類似產(chǎn)品：：GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞

HS-766-T細胞類似產(chǎn)品：：HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞

HDQ-P1細胞類似產(chǎn)品：：HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞

KP-N-RT-BM-1細胞類似產(chǎn)品：：OCIAML3細胞、KAT5細胞、578T細胞

KY-270細胞類似產(chǎn)品：：B78細胞、H1688細胞、COV362細胞

A-427細胞類似產(chǎn)品：：D407細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞、SL-1細胞

MHCC-97細胞類似產(chǎn)品：：U-343細胞、LL2細胞、PTK-1細胞

HVSMC細胞類似產(chǎn)品：：OCI-AML5細胞、1.1B4細胞、BLO 11細胞

C32 mel細胞類似產(chǎn)品：：MESSA-DX5細胞、C1R細胞、NGEC細胞

H2444細胞類似產(chǎn)品：：H1437細胞、NCI-H1568細胞、SW 48細胞

AG06814-M細胞類似產(chǎn)品：：J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞

SK-LU-1細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly 3細胞、LN 382細胞、211H細胞

BT細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly 19細胞、SHP-77細胞、SCC25細胞

RL-952細胞類似產(chǎn)品：：B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞

NR 8383細胞類似產(chǎn)品：：RH-30細胞、SF 539細胞、PLC8024細胞

KP-N-YN:人平滑肌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

C8D1A細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1930細胞、HELA-GFP細胞、Dunn LM8細胞

ZR75-30細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1522細胞、SCC VII細胞、HEC1-B細胞

TF1細胞類似產(chǎn)品：：NB1-RGB細胞、SHEP1細胞、BetaTC6細胞

A 2058細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞

SK-GT-2細胞類似產(chǎn)品：：D-407細胞、KP-N-RT-BM-1細胞、H-774細胞

MC3T3E1細胞類似產(chǎn)品：：Panc10.05細胞、RH7777細胞、UT7細胞

"