"NCI-H69:人小細胞肺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

貼壁細胞凍存注意事項：細胞凍存液需提前配制，不可直接將DMSO加入細胞懸液中；不同細胞消化時間有差異，以實際鏡檢結果為準，大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化，消化時間不宜過長；應選擇匯合度80%-90%左右，細胞處于對數(shù)生長期時進行凍存操作，確保細胞凍存時狀態(tài)Zui佳，凍存密度可根據(jù)細胞性進行調整；凍存細胞保存溫度應低于-130℃，不可在-80℃長期保存。貼壁細胞凍存操作步驟：從培養(yǎng)箱中取出準備凍存的細胞；顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)并拍照記錄；酒精消毒培養(yǎng)瓶后放入安全柜中；吸去多余的培養(yǎng)基，加人2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；將細胞懸液移入15ml離心管中離心，1000rpm/min（約200g）離心3-5min；吸去多余的液體，向細胞沉淀中加入適量的凍存液，輕輕吸打混勻；按比例分裝至凍存管中；貼HAO標簽后放入梯度凍存盒中；將凍存盒放入-80℃，降溫過夜后，移入液氮中保存。貼壁細胞凍存實驗準備事項：將15mL離心管、凍存管、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、細胞凍存液等從4℃冰箱中取出后，復溫至室溫，備用；程序降溫盒復溫至室溫備用。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NGP細胞類似產品：：CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞

CESS細胞類似產品：：EFM-19細胞、B16 melanoma細胞、CaSki細胞

SNU668細胞類似產品：：Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞

EoL-1細胞類似產品：：MEG-01細胞、U-138-MG細胞、C-Li-7細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

G-361細胞類似產品：：U-118MG細胞、U-87MG細胞、HCMEC細胞

DSL6A/C1細胞類似產品：：HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞

HFT-8810細胞類似產品：：NCI-H1155細胞、TJ905細胞、Capan2細胞

常見培養(yǎng)細胞預防污染的有效措施：體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時，有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預防是關鍵。只有將預防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到Zui小程度。一般預防可從以下幾方面著手：１)添加抗生素：各種抗生素性質不同，對各種微生物的作用也不同，聯(lián)合應用比單用效果HAO，預防性應用比污染后使用HAO(但迄今尚無對抗支原體抗生素)。但反復使用抗生素會使微生物產生耐藥性，且對細胞本身也有一定影響，因此為避免誘導抗藥細菌，應定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素，或盡可能不用抗生素處理；２)從物品、用品消毒滅菌著手：細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底，各種溶液滅菌除菌要仔細，并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時，在無菌過濾操作中，隨著濾過體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應選擇Zui后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作：７５%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后，使用可移動的紫外燈至少消毒３０min，加入GAO壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制３００ml的飽和酸銅加３L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。

細胞傳代方法：１：２—１：４傳代，每周換液２次

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：懸浮生長，聚團

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

3-LL細胞類似產品：：CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞

GM-3573細胞類似產品：：CCD18細胞、COLO-394細胞、CCRF-CEM C7細胞

UC-3細胞類似產品：：HCFB（HCF）細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞

H-920細胞類似產品：：JVM3細胞、SNU475細胞、NCIH2052細胞

H1688細胞類似產品：：T/G HA VSMC細胞、KLM1細胞、HEL-299細胞

Ramos.G6.C10細胞類似產品：：MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞

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AtT 20細胞類似產品：：HN13細胞、A549/ATCC細胞、MCF7/WT細胞

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DI TNC-1細胞類似產品：：MXI細胞、KP-4細胞、SW948細胞

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YH-13細胞類似產品：：HEp-2細胞、NT2細胞、SHEE細胞

NCI-H69:人小細胞肺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

NCI-322細胞類似產品：：H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞

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H1770細胞類似產品：：H-209細胞、HuH1細胞、Ku812細胞

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NCI H929細胞類似產品：：SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞

H460細胞類似產品：：Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞

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BE2-C細胞類似產品：：HCT/FU細胞、U-2-OS細胞、NCI-841細胞

H1954細胞類似產品：：Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞

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RT-4細胞類似產品：：CCRFCEM細胞、HPDE6c7細胞、ASH-3細胞

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