"NCI-H650:人非小細胞肺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

有一些細胞是數(shù)量多一點比較HAO生長，生長狀態(tài)也比較HAO。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較HAO，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較HAO。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結果是不HAO的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不HAO，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意，結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得HAO的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MDA.MB.435細胞類似產品：：B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞

GTL16細胞類似產品：：NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞

C1498細胞類似產品：：EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞

T-47D細胞類似產品：：149 PT細胞、HT115細胞、BCaP-37細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

PC3M細胞類似產品：：BMSC/hBMSCs細胞、KM12SM細胞、PNT-1A細胞

P3 (Jiyoye)細胞類似產品：：hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞

ML-2細胞類似產品：：CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞

細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋HAO瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化HAO的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋HAO瓶蓋，適度擰緊后稍回轉，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。

細胞傳代方法：１：３-１：６傳代；

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：懸浮生長

細胞培養(yǎng)中常用設施及設備：實驗室設計：細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設計原則一般是無菌操作區(qū)設在室內較少走動的內側，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。常用設施及設備：1)超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒HAO的無菌物品等。3)操作間：普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間：烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室：顯微鏡、計算機及打印機等。

H-1417細胞類似產品：：CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞

COLO829細胞類似產品：：HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞

WRL 68細胞類似產品：：RAT2細胞、LIXC002細胞、U 138 MG細胞

Hs683細胞類似產品：：293-F細胞、LK 2細胞、Line 697細胞

HGBEC細胞類似產品：：BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞

Tu686細胞類似產品：：UCLA-RO 81細胞、SUM102細胞、RPMI8402細胞

WM266mel細胞類似產品：：Hepatoma-22細胞、HEK-293細胞、CEMC1細胞

B 95.8細胞類似產品：：NS20Y細胞、KBM5細胞、HFE-145細胞

SUM-52PE細胞類似產品：：GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞類似產品：：95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞

FCCH1024細胞類似產品：：751-NA細胞、KBM-7細胞、Emory University-3細胞

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Ramos.G6.C10細胞類似產品：：MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞

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T98G細胞類似產品：：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞

HuT 78細胞類似產品：：LS 174T細胞、SKMEL3細胞、ST細胞

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Mel624細胞類似產品：：NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞

Calu 3細胞類似產品：：MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞

NSC-34細胞類似產品：：CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞

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HSC-1細胞類似產品：：293 H細胞、HOP 62細胞、WI-38細胞

GMK,BSC-1細胞類似產品：：TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞

NCI-H650:人非小細胞肺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

CNLMG-B5537SKIN細胞類似產品：：UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞

GA-10(Clone 4)細胞類似產品：：hTERTHME1細胞、UCH1細胞、MKN-45細胞

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NCI-H2227細胞類似產品：：H-2286細胞、HC11細胞、FAT細胞

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NCIADRRES細胞類似產品：：RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞

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10T1/2細胞類似產品：：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞

NCIH522細胞類似產品：：Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞

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T-47D細胞類似產品：：149 PT細胞、HT115細胞、BCaP-37細胞

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CD-18細胞類似產品：：B16 melanoma F10細胞、NCIH1573細胞、RAEC細胞

NCI-H650:人非小細胞肺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Centre Antoine Lacassagne-33細胞類似產品：：Det. 562細胞、MV522細胞、MAC1細胞

D562細胞類似產品：：MIA-PaCa-2細胞、HFT8810細胞、SHSY5Y細胞

NS1細胞類似產品：：H-889細胞、OVCAR-5細胞、AN3細胞

WEHI164細胞類似產品：：RMS 13細胞、BL2141細胞、HCC0202細胞

SO-Rb 50細胞類似產品：：293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞

Pan02細胞類似產品：：OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞

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