"NCI-H1666:人肺支氣管癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

貼壁細胞凍存注意事項：細胞凍存液需提前配制，不可直接將DMSO加入細胞懸液中；不同細胞消化時間有差異，以實際鏡檢結果為準，大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化，消化時間不宜過長；應選擇匯合度80%-90%左右，細胞處于對數生長期時進行凍存操作，確保細胞凍存時狀態(tài)Zui佳，凍存密度可根據細胞性進行調整；凍存細胞保存溫度應低于-130℃，不可在-80℃長期保存。貼壁細胞凍存操作步驟：從培養(yǎng)箱中取出準備凍存的細胞；顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)并拍照記錄；酒精消毒培養(yǎng)瓶后放入安全柜中；吸去多余的培養(yǎng)基，加人2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；將細胞懸液移入15ml離心管中離心，1000rpm/min（約200g）離心3-5min；吸去多余的液體，向細胞沉淀中加入適量的凍存液，輕輕吸打混勻；按比例分裝至凍存管中；貼HAO標簽后放入梯度凍存盒中；將凍存盒放入-80℃，降溫過夜后，移入液氮中保存。貼壁細胞凍存實驗準備事項：將15mL離心管、凍存管、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、細胞凍存液等從4℃冰箱中取出后，復溫至室溫，備用；程序降溫盒復溫至室溫備用。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Microbiological Associates-104細胞類似產品：：HR1K細胞、KG-1a細胞、LN 382細胞

H2009細胞類似產品：：MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞

HBZY-1細胞類似產品：：OCI-AML-3細胞、HSC1細胞、P-388細胞

HCT-8細胞類似產品：：NCI-H-295細胞、CNE1細胞、SK.MEL.28細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

L5178YR細胞類似產品：：D10細胞、L M (TK-)細胞、NCIH748細胞

CWR22R細胞類似產品：：EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞

A875細胞類似產品：：SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞

細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在GAO處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內撈出器皿用自來水沖洗１５次，Zui后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。GAO壓消毒：包裝HAO的器皿裝入GAO壓鍋內蓋HAO蓋子，打開開關和安全閥，當蒸氣成直線上升時，關閉安全閥，當指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。GAO壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。

細胞傳代方法：１：２-１：４傳代；每周換液２次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長，松散

細胞培養(yǎng)中常用設施及設備：實驗室設計：細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設計原則一般是無菌操作區(qū)設在室內較少走動的內側，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。常用設施及設備：1)超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒HAO的無菌物品等。3)操作間：普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間：烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室：顯微鏡、計算機及打印機等。

138MG細胞類似產品：：TYKnu細胞、HEK293-EBNA1細胞、DrG細胞

NCI-H510細胞類似產品：：NCI-H1755細胞、BE(2)M17細胞、BI-Mel細胞

SW13細胞類似產品：：NCIH1436細胞、WERI-Rb1細胞、hTERT-HME-1細胞

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NBL-7細胞類似產品：：KU 812F細胞、M14細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞

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P3-NS1/1-Ag4-1細胞類似產品：：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞

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