"NCI-H596:人肺腺鱗癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞生長:貼壁
公司細胞庫凍存并保種有2300多種各類細胞系。針對每種不同的細胞系,公司摸索并積累了大量細胞培養(yǎng)條件和YOU化參數(shù),為您的細胞實驗保駕護航。細胞培養(yǎng)是生命科學研究中Zui基礎、也是Zui常用的實驗手段。從凍存→復蘇→傳代→實驗,在每一次細胞培養(yǎng)的過程中我們都是精心呵護,小心培養(yǎng),心里都是默默承諾:我要護你一世周全!可是可是……無數(shù)次細胞都因污染而離我而去,投入的不只是我們貌美如花的青春,還有那一去不復返的經(jīng)費!在細胞生物學,生物化學,免疫學,神經(jīng)生物學,病理學……只要涉及細胞的研究領域,都面臨著支原體污染的威脅。在眾多污染物中,也就屬支原體Zui狡猾了,他Zui善于隱藏自己,因為被支原體污染的細胞不會馬上死亡,但會改變細胞的新陳代謝,甚至會改變細胞的基因表達譜,我們就這樣被欺騙了無數(shù)次,誰讓我們就是個看“顏值”的花癡了??墒俏覀兺ㄟ^被虐了幾百次的經(jīng)驗中總結出來,當你的細胞出現(xiàn)了這些癥狀時:生長速率改變;活性減弱;形態(tài)改變;染色體畸變;轉染效率顯著降低;細胞復蘇后存活率降低……。那你就得千萬小心了,也許你的細胞已經(jīng)被支原體欺凌了!
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
GM04154細胞類似產品::NE-1細胞、PC9細胞、CEL細胞
Medical Research Council cell strain-9細胞類似產品::NCIH441細胞、T24(ECV304)細胞、H4-II-E-C3細胞
NCI-H441細胞類似產品::HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞
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[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
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細胞形態(tài):上皮細胞樣
ST細胞類似產品::HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞
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293T細胞類似產品::CMT-64細胞、HL-60 clone15細胞、SMA560細胞
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融?!緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數(shù),使細胞密度達5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點降低,使細胞內水分在凍結前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋HAO凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做HAO標記;6)凍存:在殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷。【復蘇細胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分,密度應達到10/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10/ml數(shù)量。
細胞傳代方法:1:4-1:8傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:貼壁生長
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良HAO,當補液時,需避免反復吹打。
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關鍵字: NCI-H596:人肺腺鱗癌復蘇細胞(提;
上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。