"HCC202:人乳腺原發(fā)性導管癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升GAO，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

RA 1細胞類似產(chǎn)品：：NCTC 1469細胞、A549 ATCC細胞、A-704細胞

H3255_DA細胞類似產(chǎn)品：：HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞

Capan1細胞類似產(chǎn)品：：SK-RC-20細胞、UWB1-289細胞、HRMC細胞

H-711細胞類似產(chǎn)品：：GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

HCC202:人乳腺原發(fā)性導管癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

OVCAR420細胞類似產(chǎn)品：：SiHa細胞、MDA MB 134VI細胞、SF767細胞

Y3細胞類似產(chǎn)品：：KLN205細胞、MuM-2B細胞、hRMECs細胞

Fetal Human Colon細胞類似產(chǎn)品：：GM04154細胞、PBMC細胞、SR786細胞

細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋HAO瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化HAO的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋HAO瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

HCC202:人乳腺原發(fā)性導管癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁生長

細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻，或者放入時搖勻，但在細胞貼壁前，又移動了培養(yǎng)瓶，頻繁開關培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少，培養(yǎng)箱擱板表面不平整，這些因素會導致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正常現(xiàn)象，大部分懸浮細胞在細胞密度很GAO的情況下，很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象，聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細胞，因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制HAO細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團，可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團，也可以嘗試一下方法：將細胞懸液收集到15ml離心管中，靜置20min左右，小心取上層細胞上清培養(yǎng)（該方法只能去除部分較大的細胞團）。部分細胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐藥株等），這個是正?，F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡，則很可能是細胞狀態(tài)不佳，可以通過調(diào)整血清濃度，控制消化，控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細胞狀態(tài)；如果大部分細胞出現(xiàn)空泡，且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多，則可能細胞代次較GAO，細胞老化所致，需更換代次較早的細胞。

SN12C細胞類似產(chǎn)品：：H727細胞、D283-MED細胞、TJ905細胞

KP-2細胞類似產(chǎn)品：：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞

H-716細胞類似產(chǎn)品：：CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞

SBC-3細胞類似產(chǎn)品：：HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞

Detroit-562細胞類似產(chǎn)品：：T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞

SNU668細胞類似產(chǎn)品：：Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞

KYSE-180細胞類似產(chǎn)品：：SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞

AD-293細胞類似產(chǎn)品：：C4-2 Bone metastatic細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞、Hs 888Lu細胞

WISH細胞類似產(chǎn)品：：OLN 93細胞、OVCA433細胞、SW-1116細胞

Colo16細胞類似產(chǎn)品：：HBMEC細胞、NCIH520細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞

MDCK細胞類似產(chǎn)品：：SK-BR-3細胞、PNEC30細胞、293/EBNA-1細胞

CT26.WT細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞

NHA細胞類似產(chǎn)品：：MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞

SK-MEL2細胞類似產(chǎn)品：：COLO824細胞、NCIH2286細胞、NBL-2細胞

RT-4細胞類似產(chǎn)品：：CCRFCEM細胞、HPDE6c7細胞、ASH-3細胞

OCI Ly1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞

RLE-6TN細胞類似產(chǎn)品：：C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞

BetaTC6細胞類似產(chǎn)品：：NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞

DH-82細胞類似產(chǎn)品：：PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞

MESSADX5細胞類似產(chǎn)品：：MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞

H220細胞類似產(chǎn)品：：H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞

NCI-SNU-216細胞類似產(chǎn)品：：KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞

KASUMI1細胞類似產(chǎn)品：：9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞

H322細胞類似產(chǎn)品：：P3-x63-Ag8 653細胞、Jiyoye細胞、293F細胞

HCC202:人乳腺原發(fā)性導管癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Hs 695T細胞類似產(chǎn)品：：P3/NS1/1-Ag4-1細胞、L-6細胞、Hos TE-85細胞

UWB1-289細胞類似產(chǎn)品：：A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞

X63-Ag8.653細胞類似產(chǎn)品：：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞

OVCAR 4細胞類似產(chǎn)品：：TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞

MGHU3細胞類似產(chǎn)品：：MOLT.4細胞、WM-115細胞、NCIH1963細胞

H-508細胞類似產(chǎn)品：：LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞

HEK 293細胞類似產(chǎn)品：：WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞

RKOAS451細胞類似產(chǎn)品：：T2(174 x CEM.T2)細胞、H-2141細胞、H-820細胞

LLC-MK2細胞類似產(chǎn)品：：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞

PC-3M-IE8細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞

3 LL細胞類似產(chǎn)品：：UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞

Y3-Ag123細胞類似產(chǎn)品：：C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞

NCI-H2030細胞類似產(chǎn)品：：TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞

CCC-ESF-1細胞類似產(chǎn)品：：H1781細胞、Namalwa細胞、MB231細胞

ML-2細胞類似產(chǎn)品：：CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞

Jiyoye(P-2003)細胞類似產(chǎn)品：：Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞

BAR-T細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293F細胞、H22-H8D8細胞、CWR-22rv1細胞

CEMC7細胞類似產(chǎn)品：：HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞

DC 2.4細胞類似產(chǎn)品：：526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞

Hs742T細胞類似產(chǎn)品：：Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞

GEO細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1373細胞、BSC-40細胞、OCI-LY-7細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞類似產(chǎn)品：：95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞

38C13細胞類似產(chǎn)品：：YH細胞、P31-FUJ細胞、Tn5 B1-4細胞

ECC12細胞類似產(chǎn)品：：HEK-EBNA細胞、U-118 MG細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞

OSC19細胞類似產(chǎn)品：：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞

COLO 320HSR細胞類似產(chǎn)品：：A 72細胞、OV90細胞、HHL-5細胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB361細胞、SW-837細胞、Cloudman M3細胞

EFM19細胞類似產(chǎn)品：：HCC78細胞、MC3T3細胞、SKRC-52細胞

G-292, clone A141B1細胞類似產(chǎn)品：：Hs 766.T細胞、SCC-1395細胞、MT4細胞

BL1339細胞類似產(chǎn)品：：L363細胞、OVISE細胞、H-358細胞

LM TK negative細胞類似產(chǎn)品：：SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞

AsPC-1細胞類似產(chǎn)品：：MCF12A細胞、HCT-8/V細胞、LSECs細胞

Reuber H35細胞類似產(chǎn)品：：TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞

L 428細胞類似產(chǎn)品：：SNU475細胞、HCC-1833細胞、QGP1細胞

H2106細胞類似產(chǎn)品：：RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞

E.L.4細胞類似產(chǎn)品：：HEL9217細胞、T 98 G細胞、769P細胞

MKN-74細胞類似產(chǎn)品：：RMS 1598細胞、SaOS細胞、SU-DHL-8細胞

H711細胞類似產(chǎn)品：：IMCD-3細胞、IBMF-7細胞、GTL-16細胞

H2030細胞類似產(chǎn)品：：Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞

MHH-CALL-2細胞類似產(chǎn)品：：HIEC細胞、KYSE 270細胞、OCI/AML-3細胞

KP-N-NS細胞類似產(chǎn)品：：CV 1細胞、NTERA-2cl.D1細胞、OVCAR420細胞

H-719細胞類似產(chǎn)品：：Caki2細胞、H1155細胞、HuT 102細胞

UCLA RO-81A-1細胞類似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、Hep3B細胞、M14-MEL細胞

SW1116細胞類似產(chǎn)品：：KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞

RPMI 7666細胞類似產(chǎn)品：：DMS 53細胞、SR-786細胞、SN12C-PM6細胞

SJSA1細胞類似產(chǎn)品：：L2細胞、CL34細胞、SHG44細胞

A172細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞

BV-2細胞類似產(chǎn)品：：SKG IIIa細胞、INS1-E細胞、Mo7e細胞

C26細胞類似產(chǎn)品：：LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞

EU-2細胞類似產(chǎn)品：：TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞

BV173細胞類似產(chǎn)品：：RGC-5細胞、RBL.2H3細胞、HS-445細胞

Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞類似產(chǎn)品：：Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞

MC 3T3-E1細胞類似產(chǎn)品：：SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞

Ramos (RA 1)細胞類似產(chǎn)品：：hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞

JHH-7細胞類似產(chǎn)品：：GM03671細胞、Hs_578t細胞、HBE 135-E6E7細胞

G-292細胞類似產(chǎn)品：：U-CH1細胞、NCTC clone 1469細胞、H-647細胞

373 MG細胞類似產(chǎn)品：：OEC19細胞、MAVER1細胞、NCIH295R細胞

Hs683T細胞類似產(chǎn)品：：H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞

Hs683T細胞類似產(chǎn)品：：H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞

3T6 Swiss Albino細胞類似產(chǎn)品：：D283-MED細胞、NCI H23細胞、TI-73細胞

MDA231細胞類似產(chǎn)品：：JURKAT E-61細胞、Panc813細胞、KU-812細胞

MDA-468細胞類似產(chǎn)品：：HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞

NCI-H1975細胞類似產(chǎn)品：：LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞

Ramos G6.C10細胞類似產(chǎn)品：：SW-579細胞、T-ALL-1細胞、MDA-MB-175VII細胞

hTERTHME1細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞

NCI-H2291細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞

BTI-TN5B1-4細胞類似產(chǎn)品：：HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞

GM03190細胞類似產(chǎn)品：：H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞

MDAPCa-2b細胞類似產(chǎn)品：：TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞

HEC1B細胞類似產(chǎn)品：：PTK 2細胞、MIMVEC細胞、OE-21細胞

P3X63Ag8細胞類似產(chǎn)品：：HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞

COLO-699細胞類似產(chǎn)品：：LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞

Centre Antoine Lacassagne-33細胞類似產(chǎn)品：：Det. 562細胞、MV522細胞、MAC1細胞

Tissue Culture-1細胞類似產(chǎn)品：：CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞

BERH-2細胞類似產(chǎn)品：：MM1-S細胞、HL-7702細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞

HT3細胞類似產(chǎn)品：：FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞

Reh細胞類似產(chǎn)品：：CA922細胞、BT-474細胞、FHs74 Int細胞

LA-N-6細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1781細胞、HLEC-SRA 01/04細胞、KLN 205細胞

Ramos-RA1細胞類似產(chǎn)品：：H-740細胞、H2052_MM細胞、870細胞

High-5細胞類似產(chǎn)品：：NCIH446細胞、CL-40細胞、HCC-1359細胞

H716細胞類似產(chǎn)品：：Colo16細胞、BRL 3A細胞、NCI-H1666細胞

HL-60 Clone 15細胞類似產(chǎn)品：：HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞

HCC202:人乳腺原發(fā)性導管癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

NRK52E細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞

PAN 02細胞類似產(chǎn)品：：MFM-223細胞、MTEC1細胞、RAW-264.7細胞

C-643細胞類似產(chǎn)品：：AD293細胞、RA.1細胞、Granta519細胞

SN-12C細胞類似產(chǎn)品：：BRL 3A細胞、KM.12細胞、MCF7細胞

DLM8細胞類似產(chǎn)品：：TFH細胞、U-343細胞、CC-LP-1細胞

NCI-H498細胞類似產(chǎn)品：：RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞

"