"IEC-18:大鼠回腸復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞生長:貼壁
貼壁細胞傳代實驗準備事項:將15mL離心管、T25細胞培養(yǎng)瓶、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中,紫外照射30min消毒滅菌;細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA從4℃冰箱中取出后,復溫至室溫,備用。貼壁細胞傳代實驗步驟:將準備HAO的培養(yǎng)基等物品用酒精消毒后放入安全柜中;從培養(yǎng)箱中取出待處理的細胞,在顯微鏡下觀察細胞狀態(tài);用酒精消毒培養(yǎng)瓶,放入安全柜中;輕輕吸去細胞上清;加入2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次,吸去上清;加入1mL(0.25%胰酶-0.02%EDTA),輕輕晃勻、覆蓋所有細胞后,置于37℃培養(yǎng)箱靜置消化;消化1min左右,在顯微鏡下觀察細胞消化情況;消化完全后,加3ml完全培養(yǎng)基終止;按比例將細胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中;在顯微鏡下觀察傳代后的細胞密度及狀態(tài);將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意事項:培養(yǎng)過程中需維持細胞處于對數生長期,80%左右即可傳代,傳代比例請參照說明書建議;消化時間不宜過長,大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化,難消化的細胞可分次消化,每次時間不超過5min;培養(yǎng)過程中需要定期換液,一般細胞建議2~3天換液一次。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MB468細胞類似產品::Pt-K2細胞、BT325細胞、HEK-293A細胞
BSC-1細胞類似產品::COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
NCI H226細胞類似產品::Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞
L 929細胞類似產品::SUNE-1細胞、HPAF-II/CD18細胞、H711細胞
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
IEC-18:大鼠回腸復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞形態(tài):上皮細胞樣
LAD2細胞類似產品::IPEC-1細胞、RGB細胞、WERIRb1細胞
HTori 3細胞類似產品::P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞
PTK1細胞類似產品::UPCISCC154細胞、CHP 100細胞、GLRK 13細胞
常見培養(yǎng)細胞預防污染的有效措施:體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時,有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此,防止污染,預防是關鍵。只有將預防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終,才能將發(fā)生污染的可能性降到Zui小程度。一般預防可從以下幾方面著手:1)添加抗生素:各種抗生素性質不同,對各種微生物的作用也不同,聯(lián)合應用比單用效果HAO,預防性應用比污染后使用HAO(但迄今尚無對抗支原體抗生素)。但反復使用抗生素會使微生物產生耐藥性,且對細胞本身也有一定影響,因此為避免誘導抗藥細菌,應定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素,或盡可能不用抗生素處理;2)從物品、用品消毒滅菌著手:細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底,各種溶液滅菌除菌要仔細,并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時,在無菌過濾操作中,隨著濾過體積的增大,濾膜破損的可能性增加,故應選擇Zui后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作:75%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后,使用可移動的紫外燈至少消毒30min,加入GAO壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制300ml的飽和酸銅加3L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:貼壁生長
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良HAO,當補液時,需避免反復吹打。
H774細胞類似產品::IAR 20細胞、C28/I2細胞、Functional Liver Cell-7細胞
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TE-1細胞類似產品::OC316細胞、Sf-21細胞、HCC-1395細胞
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GM2219C細胞類似產品::AK細胞、HEK 293-EBNA細胞、Loucy細胞
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SHZ-88細胞類似產品::PF382細胞、NCIH1648細胞、Metastatic Variant 522細胞
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SU8686細胞類似產品::BRL3A細胞、CHP 126細胞、HBL 100細胞
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KCL22細胞類似產品::GC9811-P細胞、EC-GI細胞、Hs27F細胞
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關鍵字: IEC-18:大鼠回腸復蘇細胞(提供ST;
上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。