"Beta-TC-6:小鼠胰島素瘤胰島β復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

WC00044細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞

MCA205細胞類似產(chǎn)品：：JB-6細胞、COLO 320DM細胞、293c18細胞

MV4-11細胞類似產(chǎn)品：：EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞

PNEC30細胞類似產(chǎn)品：：Ly7細胞、FHC細胞、BCPAP細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：這株細胞來源于轉(zhuǎn)基因小鼠中生長的一個胰腫瘤(胰島素瘤)。這種小鼠攜帶了大鼠胰島素II基因啟動子調(diào)控的SV４０早期基因的假基因結(jié)構(gòu)。細胞包含豐富的胰島素和小量的胰高血糖素及生長抑素。響應(yīng)葡萄糖而分泌胰島素

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

SVEC 4-10細胞類似產(chǎn)品：：H-711細胞、RMG-1細胞、GLC-82細胞

SKNBE(2)細胞類似產(chǎn)品：：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞

SW 1573細胞類似產(chǎn)品：：Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞

細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預(yù)熱；③超凈臺臺面應(yīng)整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋HAO瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化HAO的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋HAO瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。

細胞傳代方法：１：２-１：４傳代，每２-３天換液一次

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

Karpas299細胞類似產(chǎn)品：：DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞

High-5細胞類似產(chǎn)品：：NCIH446細胞、CL-40細胞、HCC-1359細胞

TE4細胞類似產(chǎn)品：：RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞

SUNE1細胞類似產(chǎn)品：：GM06141B細胞、NCIH1930細胞、NCIH446細胞

Pro-Lec1.3C細胞類似產(chǎn)品：：3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞

HBE 135-E6E7細胞類似產(chǎn)品：：SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞

H-2172細胞類似產(chǎn)品：：B16-F10--RED細胞、H341細胞、GM04671細胞

Ca9-22細胞類似產(chǎn)品：：C643細胞、MV-4-11細胞、NCIH128細胞

LSC-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1703細胞、NIH 3T3細胞、CF-1 MEF細胞

P 815細胞類似產(chǎn)品：：SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞

SUM 102PT細胞類似產(chǎn)品：：H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞

UMR 106細胞類似產(chǎn)品：：SW 1990細胞、BSC1細胞、PC-3M-IE8細胞

HS5細胞類似產(chǎn)品：：huH 1細胞、PLB985細胞、COLO829細胞

TW-039細胞類似產(chǎn)品：：RT-4細胞、102PT細胞、GalK 1細胞

MFE-280細胞類似產(chǎn)品：：HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞

MESSA Dx5細胞類似產(chǎn)品：：PASMCS細胞、CCD19-Lu細胞、U251細胞

MESSA Dx5細胞類似產(chǎn)品：：PASMCS細胞、CCD19-Lu細胞、U251細胞

tdott細胞類似產(chǎn)品：：PANC0813細胞、PC-3M-2B4細胞、U-2932細胞

CF Pac1細胞類似產(chǎn)品：：bEND.3細胞、32D-Cl3細胞、HCC-1588細胞

PG-LH7細胞類似產(chǎn)品：：RSMC細胞、T/GHA-VSMC細胞、CAL 78細胞

Mel624細胞類似產(chǎn)品：：NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞

RPMI-1788細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞

4T1細胞類似產(chǎn)品：：BSC40細胞、T173細胞、SK_HEP1細胞

CEM-CCRF細胞類似產(chǎn)品：：PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞

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NCI H23細胞類似產(chǎn)品：：H-747細胞、C4-2B細胞、SCCVII細胞

Reuber H35細胞類似產(chǎn)品：：TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞

LAN5細胞類似產(chǎn)品：：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞

102PT細胞類似產(chǎn)品：：KMH2細胞、COLO 16細胞、C2C12細胞

RT-4細胞類似產(chǎn)品：：CCRFCEM細胞、HPDE6c7細胞、ASH-3細胞

ACC2細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-8細胞、GM637細胞、EFO27細胞

MES-13細胞類似產(chǎn)品：：OSK-1細胞、CTLL(2)細胞、Calu3細胞

BpRc1細胞類似產(chǎn)品：：hTERT-HME1細胞、H1048細胞、IM-9細胞

16HBE14o-細胞類似產(chǎn)品：：Panc 3.27細胞、SGC7901細胞、HeLa/S3細胞

A875細胞類似產(chǎn)品：：SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞

HIT T15細胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞

P3/X63/Ag8.653細胞類似產(chǎn)品：：TE-5細胞、CTLL2細胞、CD18/HPAF細胞

Panc-327細胞類似產(chǎn)品：：HCEC-12細胞、SN12C細胞、SNU-C2B細胞

Hs 578.Bst細胞類似產(chǎn)品：：H-2107細胞、MPC-5細胞、HL-60細胞

MGHU1細胞類似產(chǎn)品：：WM2664細胞、MDA-MB-415細胞、RC-K8細胞

KP-2細胞類似產(chǎn)品：：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞

A-172MG細胞類似產(chǎn)品：：HLEpiC細胞、SKG IIIa細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞

A-498細胞類似產(chǎn)品：：Raji細胞、HBSMC細胞、A2780/CP細胞

NALM-6細胞類似產(chǎn)品：：RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞

HPMC細胞類似產(chǎn)品：：FF-WT-BJ細胞、HEL-92_1_7細胞、RFL6細胞

HEL-92-1-7細胞類似產(chǎn)品：：HCC-70細胞、Panc-3_27細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞

BEND細胞類似產(chǎn)品：：SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞

211H細胞類似產(chǎn)品：：Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、TO175T細胞、HSC 3細胞

SGC 7901細胞類似產(chǎn)品：：U-2932細胞、UK Pan-1細胞、P30/0HK細胞

Wistar Institute, Susan Hayflick細胞類似產(chǎn)品：：HEK293-EBNA1細胞、RPMI-1846細胞、JROECL 21細胞

UACC 812細胞類似產(chǎn)品：：RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞

A549ATCC細胞類似產(chǎn)品：：H-1435細胞、SJCRH30細胞、RGB細胞

624細胞類似產(chǎn)品：：MCMEC細胞、D10.G4.1細胞、CMT 64細胞

HaCaT細胞類似產(chǎn)品：：HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞

HCC44細胞類似產(chǎn)品：：NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞

GM03190細胞類似產(chǎn)品：：H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞

HT-1080細胞類似產(chǎn)品：：AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞

CAMA細胞類似產(chǎn)品：：CAL 51細胞、TSU-Pr1細胞、H929細胞

SK-ES1細胞類似產(chǎn)品：：HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞

MMQ細胞類似產(chǎn)品：：Potorous tridactylus Kidney 2細胞、PANC0504細胞、EBTr (NBL-4)細胞

ADR-RES細胞類似產(chǎn)品：：SG231細胞、C918細胞、SGC-996細胞

RS(4;11)細胞類似產(chǎn)品：：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、HHUA細胞、P3X63 Ag8.653細胞

TE4細胞類似產(chǎn)品：：RKO_AS45細胞、H716細胞、Walker 256細胞

MOLP8細胞類似產(chǎn)品：：D341MD細胞、LX-2細胞、McCoy B細胞

MGHU1細胞類似產(chǎn)品：：WM2664細胞、MDA-MB-415細胞、RC-K8細胞

STC-1細胞類似產(chǎn)品：：Tu-686細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞、NIH/3T3細胞

KLN-205細胞類似產(chǎn)品：：RCS細胞、H1437細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞

MDA-330細胞類似產(chǎn)品：：SPC-A-1細胞、H87細胞、10RGB細胞

RFL-6細胞類似產(chǎn)品：：SNUC2B細胞、PG13細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞

159PT細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2122細胞、SuDHL 8細胞、CCD-1112sk細胞

SKNBE(2)細胞類似產(chǎn)品：：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞

NCTC 929細胞類似產(chǎn)品：：Panc02.03細胞、HPMEC細胞、S3 HeLa細胞

526 mel細胞類似產(chǎn)品：：RTE細胞、293-EBNA細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞

MDA-415細胞類似產(chǎn)品：：HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞

RMC細胞類似產(chǎn)品：：NBL-2細胞、NCI-H1355細胞、Hs343T細胞

ECV-304細胞類似產(chǎn)品：：National Medical Center-Glioma 1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞、SDBMSC細胞

PCI:SG-231細胞類似產(chǎn)品：：SK-ES1細胞、Hs 27細胞、Hs 706.T細胞

hOMF細胞類似產(chǎn)品：：Nthy ori 3.1細胞、JM-1細胞、OV 2008細胞

Immortal Pig Intestinal-2I細胞類似產(chǎn)品：：CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞

IOSE80UBC細胞類似產(chǎn)品：：HBL1細胞、SW 962細胞、NCIH2141細胞

H1781細胞類似產(chǎn)品：：MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞

A172細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞

B16/F0細胞類似產(chǎn)品：：P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞

B16/F0細胞類似產(chǎn)品：：P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞

S91細胞類似產(chǎn)品：：EFM192細胞、Walker-256細胞、MDAMB134細胞

H596細胞類似產(chǎn)品：：GA-10(Clone 4)細胞、CCD 19Lu細胞、Dakiki細胞

HS-294T細胞類似產(chǎn)品：：HF-91細胞、Hep 2細胞、LIXC002細胞

Dakiki細胞類似產(chǎn)品：：LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞

FRTL 5細胞類似產(chǎn)品：：RAW264細胞、OCI/AML-5細胞、NS1-Ag 4/1細胞

CHP212細胞類似產(chǎn)品：：CTV1細胞、T-98細胞、Farage Original Line細胞

HPDE細胞類似產(chǎn)品：：PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞

MOLM13細胞類似產(chǎn)品：：CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞

Hi-five細胞類似產(chǎn)品：：HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞

A549/DDP細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞

NP-69細胞類似產(chǎn)品：：H-4-II-E細胞、Huh7.5細胞、NCIH1105細胞

P36細胞類似產(chǎn)品：：MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞

TE-1細胞類似產(chǎn)品：：OC316細胞、Sf-21細胞、HCC-1395細胞

Hs934T細胞類似產(chǎn)品：：Kit-225-K6細胞、hRPTC細胞、HEK293F細胞

WM266細胞類似產(chǎn)品：：KE-39細胞、NTERA2-cloneD1細胞、293EBNA細胞

IGROV1細胞類似產(chǎn)品：：NCI.H226細胞、GH3細胞、SW982細胞

RM1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞

LAD-2細胞類似產(chǎn)品：：293FT細胞、PLC-PRF-5細胞、TB1 Lu細胞

HFL-1細胞類似產(chǎn)品：：CCRF-SB細胞、RCC10RGB細胞、H196細胞

Mevo細胞類似產(chǎn)品：：Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞

NCTC-3960細胞類似產(chǎn)品：：JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞

DI TNC1細胞類似產(chǎn)品：：H-2172細胞、HREC細胞、ATDC5細胞

Tb1.Lu細胞類似產(chǎn)品：：CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞

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HS688AT細胞類似產(chǎn)品：：OPM2細胞、COV 504細胞、Adeno 293細胞

Calu 3細胞類似產(chǎn)品：：MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞

MNNGHOS細胞類似產(chǎn)品：：BIC1細胞、V 79細胞、H28細胞

MC3T3-E1(C4)細胞類似產(chǎn)品：：FHCRC subclone 11細胞、PC 61.5.3細胞、P388D1細胞

BC-PAP細胞類似產(chǎn)品：：NMCG-1細胞、QG56細胞、WM 239A細胞

HCC1937細胞類似產(chǎn)品：：JROECL 21細胞、SHSY-5Y細胞、DMS53細胞

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