"C-33 A:人子宮頸癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞生長:貼壁
有一些細胞是數(shù)量多一點比較HAO生長,生長狀態(tài)也比較HAO。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較HAO,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較HAO。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不HAO的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不HAO,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內,培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意,結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得HAO的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
PLC-8024細胞類似產品::aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞
RPMI8226/S細胞類似產品::HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞
PANC 1005細胞類似產品::BEP2D細胞、Psi-2-DAP細胞、JVM-3細胞
SKNDZ細胞類似產品::751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
細胞背景資料:C-33A細胞株是N. Auersperg從宮頸癌切片中建立的一系列細胞株(參見ATCC CRL-1594和ATCC CRL-1595)中的一株。 細胞一開始就表現(xiàn)出亞二倍體核型及上皮細胞形態(tài)。 連續(xù)傳代可以觀察到核型不穩(wěn)定。 存在成視網膜細胞瘤蛋白(pRB),但大小不正常。 P53表達上調,且有一個273位密碼子的點突變導致Arg -> Cys的替換。 人乳頭瘤病毒DNA及RNA陰性。
C-33 A:人子宮頸癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞形態(tài):上皮細胞樣
TB-1 Lu細胞類似產品::Jurkat細胞、b.End3細胞、D341MD細胞
NCIH2347細胞類似產品::SW-48細胞、MFE296細胞、KOPN8細胞
A-253細胞類似產品::RPMI2650細胞、GA-10-Clone-4細胞、SW756細胞
常見培養(yǎng)細胞預防污染的有效措施:體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時,有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此,防止污染,預防是關鍵。只有將預防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終,才能將發(fā)生污染的可能性降到Zui小程度。一般預防可從以下幾方面著手:1)添加抗生素:各種抗生素性質不同,對各種微生物的作用也不同,聯(lián)合應用比單用效果HAO,預防性應用比污染后使用HAO(但迄今尚無對抗支原體抗生素)。但反復使用抗生素會使微生物產生耐藥性,且對細胞本身也有一定影響,因此為避免誘導抗藥細菌,應定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素,或盡可能不用抗生素處理;2)從物品、用品消毒滅菌著手:細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底,各種溶液滅菌除菌要仔細,并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時,在無菌過濾操作中,隨著濾過體積的增大,濾膜破損的可能性增加,故應選擇Zui后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作:75%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后,使用可移動的紫外燈至少消毒30min,加入GAO壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制300ml的飽和酸銅加3L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
C-33 A:人子宮頸癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞生長特性:貼壁生長
細胞培養(yǎng)中常用設施及設備:實驗室設計:細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術,要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環(huán)境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設計原則一般是無菌操作區(qū)設在室內較少走動的內側,常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室。常用設施及設備:1)超凈工作臺:也稱凈化工作臺,分為側流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間:一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒HAO的無菌物品等。3)操作間:普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間:烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室:顯微鏡、計算機及打印機等。
PANC 327細胞類似產品::HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞
143B TK-細胞類似產品::GM03571細胞、MH-22a細胞、SK RC 52細胞
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上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。