"SCC-4:人類鱗狀上皮舌癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NMCG-1細胞類似產品：：GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞

FL 62891細胞類似產品：：HL60細胞、NCI-SNU-216細胞、KPL-1細胞

JIMT細胞類似產品：：HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞

CCD 841 CoTr細胞類似產品：：COLO-320HSR細胞、CHP212細胞、C3H-10T1/2細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

SCC-4:人類鱗狀上皮舌癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

EC-GI-10細胞類似產品：：KYSE-180細胞、NOR10細胞、P31FUJ細胞

FOXNY細胞類似產品：：B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞

NCIH1755細胞類似產品：：FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞

培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】１)選對數增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內水分在凍結前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋HAO凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做HAO標記；６)凍存：在殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷。【復蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數量要充分，密度應達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數量。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

SCC-4:人類鱗狀上皮舌癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

786-O細胞類似產品：：P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞

H-1385細胞類似產品：：WIL2 Secreting細胞、H125細胞、Bat lung細胞

LIM 1215細胞類似產品：：U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞

H-1048細胞類似產品：：3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞

SK-N-BE(2)C細胞類似產品：：MDA-MB157細胞、NCI-H64細胞、J-111細胞

8226/S細胞類似產品：：LCD細胞、HCC-4006細胞、293細胞

Hs343T細胞類似產品：：Colon 26細胞、HPDLF細胞、FAO-1細胞

KRC Y細胞類似產品：：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞

SW1222細胞類似產品：：HRA 19細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞、HCC941122細胞

SK-N-BE(2C)細胞類似產品：：MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞

WEHI3細胞類似產品：：Hs294T細胞、RPMI-7951細胞、SGC7901/DDP細胞

PC9細胞類似產品：：CNE1細胞、HME-1細胞、SU-DHL-6細胞

OACP4 C細胞類似產品：：H1581細胞、LLCPK1細胞、MOLT4細胞

DMS-153細胞類似產品：：H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞

Jurkat FHCRC細胞類似產品：：SCC-1395細胞、KMY1022細胞、SNK6細胞

P31-FUJ細胞類似產品：：801-D細胞、HCT 15細胞、SL-29細胞

P31-FUJ細胞類似產品：：801-D細胞、HCT 15細胞、SL-29細胞

H.Ep. #2細胞類似產品：：H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞

KYSE 270細胞類似產品：：HOP92細胞、Hs739T細胞、G-361細胞

H-647細胞類似產品：：Kit225/K6細胞、P3X63 AG 8.653細胞、NRK49F細胞

HEC151細胞類似產品：：Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞

AKR細胞類似產品：：PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞

GBC-SD細胞類似產品：：Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞

Beta-TC-6細胞類似產品：：HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞

SCC-4:人類鱗狀上皮舌癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

JURKAT E-61細胞類似產品：：MT-4細胞、WM-2664細胞、HNEpC細胞

SW 837細胞類似產品：：NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞

HR1K細胞類似產品：：JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞

H766T細胞類似產品：：Hs27細胞、EAHY-926細胞、Y3Ag1.2.3細胞

H-1581細胞類似產品：：NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞

WM-239-A細胞類似產品：：Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞

OCILY-3細胞類似產品：：Hs 888Lu細胞、Walker/LLC-WRC256細胞、P3X63 Ag8.653細胞

NCI-H295細胞類似產品：：NCIH2141細胞、HUC-1細胞、Keio University-19-19細胞

MH7A細胞類似產品：：HOK細胞、BHP-10細胞、H1793細胞

NCIH23細胞類似產品：：mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞

MCF7-GFP細胞類似產品：：P3/NS-1細胞、SW 1353細胞、CCRF-CEM C1細胞

FRO81-2細胞類似產品：：RIN-m細胞、SW1088細胞、NCI-H196細胞

DK-MG細胞類似產品：：CAL-12T細胞、NRCC細胞、OCI-LY-18細胞

KS-1 [Human glioblastoma]細胞類似產品：：BEL 7405細胞、BC-021細胞、TE-7細胞

H1184細胞類似產品：：OV-CA 432細胞、KCL22S細胞、YAC細胞

LS 1034細胞類似產品：：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、LY細胞、OVCA 433細胞

L-6TG細胞類似產品：：P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞

mREC細胞類似產品：：SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞

WM-2664細胞類似產品：：Mahlavu細胞、SNUC2B細胞、MDCK supertube細胞

MDAPCa2b細胞類似產品：：TE3細胞、JM1細胞、Lieming Xu-2細胞

NCIH1155細胞類似產品：：LS 1034細胞、IEC18細胞、Opossum Kidney細胞

RT-BM細胞類似產品：：DHL6細胞、H-740細胞、OKAC1細胞

PNT1-a細胞類似產品：：DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞

BHK細胞類似產品：：TEC細胞、I90細胞、H2085細胞

LIM1215細胞類似產品：：HCC44細胞、HL60細胞、MDAMB468細胞

GM02131A細胞類似產品：：B16/F10細胞、PLC-8024細胞、MDA MB 453細胞

JKT-1細胞類似產品：：HEYA8細胞、NCI-SNU-449細胞、HCC0366細胞

SupB15W細胞類似產品：：SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞

K7M2 wt細胞類似產品：：Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞

HCE-T細胞類似產品：：Panc-8_13細胞、CBRH-7919細胞、HTh-74細胞

Rat Basophilic Leukemia-1細胞類似產品：：Sp2/O-Ag14細胞、PG-LH7細胞、CAL-27細胞

Malme3M細胞類似產品：：NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞

ME-1 [Human leukemia]細胞類似產品：：Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、U373MG細胞、NCIH2591細胞

HT3細胞類似產品：：FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞

W256細胞類似產品：：HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞

P 815細胞類似產品：：SPCA1細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SW 948細胞

AG06814-N細胞類似產品：：H-838細胞、REC-1細胞、MCF 7細胞

LIM 1215細胞類似產品：：U-87細胞、RS4-11細胞、138 MG細胞

UWB1289細胞類似產品：：A 2780 CP細胞、Panc_05_04細胞、NCIH2081細胞

H196細胞類似產品：：WM-2664細胞、HcaF細胞、GM01232細胞

KNS81細胞類似產品：：3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞

SKNBE-1細胞類似產品：：SKOV-433細胞、BC3H-1細胞、JS1細胞

HUVEC細胞類似產品：：QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞

JOSK-M細胞類似產品：：SKNO-1細胞、Colo699細胞、HcaF細胞

SMMC7721細胞類似產品：：CTLA4Ig-24細胞、C-6細胞、GM07404細胞

D-407細胞類似產品：：HTR-8細胞、138 MG細胞、SNU1040細胞

YD15細胞類似產品：：Hs940T細胞、Emory University-2細胞、SKNO-1細胞

KU19-19細胞類似產品：：LTEPa2細胞、GalK1細胞、PLB-985細胞

WRL-68細胞類似產品：：LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞

DR2R 1610細胞類似產品：：GNM細胞、DLD 1細胞、Panc2_03細胞

B16/BL6細胞類似產品：：ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞

ABC1細胞類似產品：：Hs-852-T細胞、Sci-1細胞、R1800[RA]細胞

LN382細胞類似產品：：526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞

PLA801D細胞類似產品：：P388-D1細胞、LU-65M細胞、LTEP-a-2細胞

BS-C-1細胞類似產品：：U87-MG細胞、RCC-4細胞、H-1693細胞

CemT4細胞類似產品：：HCC-1937細胞、X63-Ag8細胞、GM2219C細胞

PANC0327細胞類似產品：：3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞

OAC-P4C細胞類似產品：：Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞

OAC-P4C細胞類似產品：：Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞

EST81細胞類似產品：：HCC-1954細胞、WB-F344細胞、OVCAR.3細胞

CMT.64細胞類似產品：：Mv.1.Lu細胞、NCI-H2135細胞、Mel-RM細胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞類似產品：：Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞

NCI-H2591細胞類似產品：：AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞

OAW42細胞類似產品：：EAC細胞、M210B4細胞、MDA-MB-175-VII細胞

Mouse podocyte細胞類似產品：：PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞

WM451細胞類似產品：：KMB 17細胞、EFM19細胞、OCI/AML3細胞

MDA468細胞類似產品：：QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞

NCTC929細胞類似產品：：OAW-42細胞、GM07404細胞、SK-N-BE(1)n細胞

U-251細胞類似產品：：Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞

HLEC-SRA 01/04細胞類似產品：：Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞

293/EBNA細胞類似產品：：LS-180細胞、Line 870 Emory University-4細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞

HRA 19細胞類似產品：：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞

Reuber H35細胞類似產品：：TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞

COR-L23細胞類似產品：：CF Pac1細胞、J774A1細胞、NFS 60細胞

Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞類似產品：：NCIH2107細胞、NCI-H1581細胞、NFS-60細胞

SNUC1細胞類似產品：：HSC3細胞、PY8119細胞、AML-EOL-1細胞

National Medical Center-Glioma 1細胞類似產品：：HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞

Hi-five細胞類似產品：：HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞

Karpas299細胞類似產品：：DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞

OVCAR420細胞類似產品：：SiHa細胞、MDA MB 134VI細胞、SF767細胞

NCI-H650細胞類似產品：：SK 1細胞、COLO394細胞、Hs 600.T細胞

Karpas422細胞類似產品：：CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞

SCC-4:人類鱗狀上皮舌癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

CHL細胞類似產品：：Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞

LS-411N細胞類似產品：：N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞

LS-174細胞類似產品：：OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞

HCC78細胞類似產品：：SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞

NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞類似產品：：293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞

HCC827細胞類似產品：：CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞

"