"HCCLM3:高轉(zhuǎn)移人肝癌復(fù)蘇細(xì)胞(提供STR鑒定圖譜)
細(xì)胞生長:貼壁
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點比較HAO生長,生長狀態(tài)也比較HAO。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點細(xì)胞狀態(tài)會生長的比較HAO,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會比較HAO。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不HAO的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不HAO,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得HAO的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
B16-BL6細(xì)胞類似產(chǎn)品::C6661細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞
U251細(xì)胞類似產(chǎn)品::Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、H-2444細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞
C33-A細(xì)胞類似產(chǎn)品::OCI-Ly03細(xì)胞、A-498細(xì)胞、NGP細(xì)胞
REC1細(xì)胞類似產(chǎn)品::MKN-7細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞
[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
HCCLM3:高轉(zhuǎn)移人肝癌復(fù)蘇細(xì)胞(提供STR鑒定圖譜)
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
JROECL21細(xì)胞類似產(chǎn)品::OsA-CL細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、EBC-1/original細(xì)胞
TE-6細(xì)胞類似產(chǎn)品::SK MEL 28細(xì)胞、MFC細(xì)胞、REC-1細(xì)胞
LAN-5細(xì)胞類似產(chǎn)品::GA-10細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強(qiáng):實驗進(jìn)行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻(xiàn)可能對相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞,有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升GAO到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細(xì)胞的影響。
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫
HCCLM3:高轉(zhuǎn)移人肝癌復(fù)蘇細(xì)胞(提供STR鑒定圖譜)
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
細(xì)胞培養(yǎng)中常用設(shè)施及設(shè)備:實驗室設(shè)計:細(xì)胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù),要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細(xì)胞培養(yǎng)室和設(shè)計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環(huán)境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。細(xì)胞培養(yǎng)室的設(shè)計原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側(cè),常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室。常用設(shè)施及設(shè)備:1)超凈工作臺:也稱凈化工作臺,分為側(cè)流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間:一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機(jī)、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒HAO的無菌物品等。3)操作間:普通培養(yǎng)箱、離心機(jī)、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間:烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室:顯微鏡、計算機(jī)及打印機(jī)等。
EMT6細(xì)胞類似產(chǎn)品::NT-2細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞、P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞
HOS/MNNG細(xì)胞類似產(chǎn)品::H-2347細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞
NCI-H1792細(xì)胞類似產(chǎn)品::MA 104細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞
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LL/2 (LLC1)細(xì)胞類似產(chǎn)品::HeLa229細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞、LAN6細(xì)胞
SKOV-433細(xì)胞類似產(chǎn)品::H1703細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞、MC-26細(xì)胞
Toledo細(xì)胞類似產(chǎn)品::G-361細(xì)胞、H-295細(xì)胞、KP4細(xì)胞
LOU-NH91細(xì)胞類似產(chǎn)品::CAL-33細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞、RINm-5F細(xì)胞
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NCI-H810細(xì)胞類似產(chǎn)品::ACHN細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、H2228細(xì)胞
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J774細(xì)胞類似產(chǎn)品::LuCL4細(xì)胞、SKM1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞
NKT細(xì)胞類似產(chǎn)品::MASMC細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞
B16/F0細(xì)胞類似產(chǎn)品::P3/ag細(xì)胞、SW-839細(xì)胞、ATN1細(xì)胞
AMO1細(xì)胞類似產(chǎn)品::RKO-AS-45-1細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞、OPM2細(xì)胞
R 1610細(xì)胞類似產(chǎn)品::E0771細(xì)胞、PA1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞
Vx-2細(xì)胞類似產(chǎn)品::HuPT3細(xì)胞、GL-261細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞
NCI-H165細(xì)胞類似產(chǎn)品::H69C細(xì)胞、MC-4細(xì)胞、HPF細(xì)胞
BT549細(xì)胞類似產(chǎn)品::HEC1-A細(xì)胞、U343MG細(xì)胞、DMS79細(xì)胞
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KYSE-520細(xì)胞類似產(chǎn)品::Bx-PC3細(xì)胞、S180細(xì)胞、H35細(xì)胞
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OVCA5細(xì)胞類似產(chǎn)品::PANC-10-05細(xì)胞、ML2細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞
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DHL10細(xì)胞類似產(chǎn)品::H1793細(xì)胞、TB-1 Lu細(xì)胞、32D CL3細(xì)胞
AG06814-M細(xì)胞類似產(chǎn)品::J774 A.1細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞
BEL7404細(xì)胞類似產(chǎn)品::Detroit562細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞、SACC83細(xì)胞
H-23細(xì)胞類似產(chǎn)品::L 363細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞
SW-1783細(xì)胞類似產(chǎn)品::FRhK4細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞、U14細(xì)胞
NTERA2D1細(xì)胞類似產(chǎn)品::MARC145細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞、H2195細(xì)胞
SCC 9細(xì)胞類似產(chǎn)品::MLE-12細(xì)胞、SK-MEL-24細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞
HuH28細(xì)胞類似產(chǎn)品::IHH4細(xì)胞、LS 513細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞
2B4-L細(xì)胞類似產(chǎn)品::SKNF1細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞、GM04680細(xì)胞
MNNGHOS細(xì)胞類似產(chǎn)品::BIC1細(xì)胞、V 79細(xì)胞、H28細(xì)胞
SNGM細(xì)胞類似產(chǎn)品::H2009細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞、293-FT細(xì)胞
JKT1細(xì)胞類似產(chǎn)品::Hi-5細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞
ATN-1細(xì)胞類似產(chǎn)品::Kit 225細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞、H1915細(xì)胞
HCCLM3:高轉(zhuǎn)移人肝癌復(fù)蘇細(xì)胞(提供STR鑒定圖譜)
X63-Ag8細(xì)胞類似產(chǎn)品::H187細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞、H1930細(xì)胞
NCI-SNU-878細(xì)胞類似產(chǎn)品::VERO C 1008細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞、COR L279細(xì)胞
Metastatic Variant-522細(xì)胞類似產(chǎn)品::NCI-H2291細(xì)胞、GH 3細(xì)胞、Granta 519細(xì)胞
NCIH526細(xì)胞類似產(chǎn)品::Panc8.13細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞、ATC241細(xì)胞
MGH-UI細(xì)胞類似產(chǎn)品::ASH3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞
UCLA SO M14細(xì)胞類似產(chǎn)品::H-220細(xì)胞、CEF細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞
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關(guān)鍵字: HCCLM3:高轉(zhuǎn)移人肝癌復(fù)蘇細(xì)胞(提供;
上海冠導(dǎo)生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內(nèi)外細(xì)胞庫引進(jìn)細(xì)胞2000余株。以此為契機(jī),公司組建了冠導(dǎo)細(xì)胞庫,我司細(xì)胞均由資深細(xì)胞培養(yǎng)工程師進(jìn)行培養(yǎng)。我司可以提供的細(xì)胞有:①細(xì)胞系②原代細(xì)胞③穩(wěn)轉(zhuǎn)株④耐藥株⑤標(biāo)記細(xì)胞⑥細(xì)胞配套試劑等。