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CRT0044876

別名: NSC 69877,7-NO2-ICA

CRT0044876 (NSC 69877, 7-NO2-ICA) 是一種強(qiáng)效的選擇性的APE1抑制劑，其IC50約為3μM。

CRT0044876 Chemical Structure

CRT0044876 Chemical Structure

CAS: 6960-45-8

規(guī)格 價(jià)格 庫(kù)存 購(gòu)買(mǎi)數(shù)量
20mg 808.89 現(xiàn)貨
50mg 1600.61 現(xiàn)貨
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批次： S744901 DMSO]41 mg/mL]false]Ethanol]1 mg/mL]false]Water]Insoluble]false 純度： 99.55%
99.55

CRT0044876相關(guān)產(chǎn)品

相關(guān)信號(hào)通路圖

DNA/RNA Synthesis Signaling Pathways

DNA/RNA Synthesis信號(hào)通路圖

生物活性

產(chǎn)品描述 CRT0044876 (NSC 69877, 7-NO2-ICA) 是一種強(qiáng)效的選擇性的APE1抑制劑，其IC50約為3μM。
靶點(diǎn)
APE1 [1]
~3 μM
體外研究(In Vitro)
體外研究活性 CRT0044876顯著抑制APE1的脫嘌呤嘧啶內(nèi)切核酸酶，3端磷酸二酯酶和3'端磷酸酯酶活性，對(duì)抑制核酸外切酶III家族具有選擇性。CRT0044876增強(qiáng)幾種靶向DNA堿基的化合物的毒性，導(dǎo)致未配對(duì)的AP位點(diǎn)積累。[1]CRT0044876通過(guò)抑制BER信號(hào)通路增加氧化DNA損傷，進(jìn)而增加酸性的腫瘤微環(huán)境中細(xì)胞外的活性氧，導(dǎo)致細(xì)胞周期抑制和增加DNA雙鏈斷裂，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。[2]
激酶實(shí)驗(yàn) AP位點(diǎn)裂解實(shí)驗(yàn)
BER反應(yīng)緩沖液中包含40 mM HEPES–KOH (pH 7.8)，5 mM MgCl2，0.5 mM DTT 和0.1 mM EDTA。一個(gè) 10 μl 體系的AP位點(diǎn)裂解反應(yīng)包含 BER 緩沖液混合物，純化的蛋白(3.3 nM APE1終濃度) 和 0.75 ng還原的AP位點(diǎn)雙鏈核苷酸?；旌弦涸?7攝氏度孵育1小時(shí)。加入1ul終止液(50% 丙三醇，10 mM 三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽， 1 mM EDTA，0.1%溴酚藍(lán) 以及 0.1%二甲苯藍(lán))。混合液在90到100攝氏度中變性2分鐘。然后樣品在15% TBE Criterion? Pre-Cast Gel上跑，電泳在30mA電流下進(jìn)行30分鐘，用磷光成像儀觀測(cè)放射性標(biāo)記的底物和反應(yīng)產(chǎn)物。潛在APE-1靶向化合物的抑制活性用0.1到100 μM濃度的藥物來(lái)測(cè)定。用ImageQuant軟件來(lái)分析來(lái)量化已分解的放射性條帶。IC50值是計(jì)算抑制50%APE1活性時(shí)的抑制劑濃度。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞系 HT1080纖維肉瘤細(xì)胞
濃度 100-500 μM
孵育時(shí)間 7-10 天
方法

HT1080纖維肉瘤細(xì)胞在含有2% RPMI 培養(yǎng)基[補(bǔ)充青霉素0.06 g/l, 鏈霉素0.1 g/l (pH 7.0), 10% 胚胎牛血清和 4 mM谷氨酰胺]中生長(zhǎng)。只有集落形成率≥60%的細(xì)胞才用作克隆存活分析。以500個(gè)細(xì)胞每盤(pán)接種于組織培養(yǎng)皿（10厘米），培養(yǎng)基在維持于37攝氏度，5%二氧化碳和95%空氣的潮濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。為了評(píng)估APE1抑制劑的毒性，加入不同濃度(100–500 μM)的抑制劑到培養(yǎng)基中，培養(yǎng)7到10天直到細(xì)胞集落形成。將菌落用[75% (v/v) 甲醇25% (v/v)乙酸]固定30分鐘，室溫下，結(jié)晶紫染色4小時(shí)。用克隆計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)可見(jiàn)的菌落。

化學(xué)信息&溶解度

分子量 206.15 分子式

C9H6N2O4
CAS號(hào) 6960-45-8 SDF --
Smiles C1=CC2=C(C(=C1)[N+](=O)[O-])NC(=C2)C(=O)O
儲(chǔ)存條件(自收到貨起)

體外溶解度
批次：

DMSO : 41 mg/mL ( (198.88 mM) ；DMSO吸濕會(huì)降低化合物溶解度，請(qǐng)使用新開(kāi)封DMSO)

Ethanol : 1 mg/mL (4.85 mM)

Water : Insoluble

摩爾濃度計(jì)算器

體內(nèi)溶解度
批次：

現(xiàn)配現(xiàn)用，請(qǐng)按從左到右的順序依次添加，澄清后再加入下一溶劑

 動(dòng)物體內(nèi)配方計(jì)算器

實(shí)驗(yàn)計(jì)算

摩爾濃度計(jì)算器

質(zhì)量 濃度 體積 分子量

動(dòng)物體內(nèi)配方計(jì)算器（澄清溶液）

第一步：請(qǐng)輸入基本實(shí)驗(yàn)信息（考慮到實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的損耗，建議多配一只動(dòng)物的藥量）

mg/kg g μL 只

第二步：請(qǐng)輸入動(dòng)物體內(nèi)配方組成（配方適用于不溶于水的藥物；不同批次藥物配方比例不同，請(qǐng)聯(lián)系Selleck為您提供正確的澄清溶液配方）

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

計(jì)算結(jié)果：

工作液濃度： mg/ml；

DMSO母液配制方法： mg 藥物溶于μL DMSO溶液（母液濃度mg/mL，注：如該濃度超過(guò)該批次藥物DMSO溶解度，請(qǐng)先聯(lián)系Selleck）；

體內(nèi)配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL PEG300，混勻澄清后加入μL Tween 80，混勻澄清后加入μL ddH2O，混勻澄清。

體內(nèi)配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL Corn oil，混勻澄清。

注意：1. 首先保證母液是澄清的；
2.一定要按照順序依次將溶劑加入，進(jìn)行下一步操作之前必須保證上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用渦旋、超聲或水浴加熱等物理方法助溶。

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