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CHIR-124

CHIR-124是一種新型有效的Chk1抑制劑，無細(xì)胞試驗(yàn)中IC50為0.3 nM。比作用于Chk2選擇性高2000倍，比作用于CDK2/4和Cdc2活性高500到5000倍。

CHIR-124 Chemical Structure

CHIR-124 Chemical Structure

CAS: 405168-58-3

規(guī)格 價(jià)格 庫(kù)存 購(gòu)買數(shù)量
10mM (1mL in DMSO) 1091.18 現(xiàn)貨
5mg 973.97 現(xiàn)貨
25mg 3035.67 現(xiàn)貨
100mg 7966.47 現(xiàn)貨
1g 23900 現(xiàn)貨
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產(chǎn)品質(zhì)控

批次： S268302 DMSO]7 mg/mL]false]Water]Insoluble]false]Ethanol]Insoluble]false 純度： 99.06%
99.06

CHIR-124相關(guān)產(chǎn)品

相關(guān)信號(hào)通路圖

Chk Signaling Pathways

Chk信號(hào)通路圖

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)示例

細(xì)胞系 實(shí)驗(yàn)類型 給藥濃度 孵育時(shí)間 活性描述 文獻(xiàn)信息
human MDA-MB-435 cells Cytotoxic?assay Cytotoxicity against human MDA-MB-435 cells, EC50=0.08 μM 16603354
human MDA-MB-435 cells Cytotoxic?assay Cytotoxicity against human MDA-MB-435 cells in presence of camptothecin 16603354
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生物活性

產(chǎn)品描述 CHIR-124是一種新型有效的Chk1抑制劑，無細(xì)胞試驗(yàn)中IC50為0.3 nM。比作用于Chk2選擇性高2000倍，比作用于CDK2/4和Cdc2活性高500到5000倍。
靶點(diǎn)
Chk1 [1]
(Cell-free assay)		 FLT3 [1]
(Cell-free assay)		 PDGFR [1]
(Cell-free assay)		 GSK-3 [1]
(Cell-free assay)
0.3 nM 5.8 nM 6.6 nM 23.3 nM
體外研究(In Vitro)
體外研究活性

CHIR-124是喹諾酮類小分子，結(jié)構(gòu)上與其他已知的Chk1抑制劑無關(guān)。CHIR-124與拓?fù)洚悩?gòu)酶毒劑(如,Camptothecin 或 SN-38) 相互協(xié)同抑制多種癌細(xì)胞株生長(zhǎng)，包括乳腺癌 (MDA-MB-231和 MDA-MB-435) 和結(jié)腸癌 (SW-620 和 Colo205), 這些腫瘤都發(fā)生p53突變。CHIR-124 作用于MDA-MD-435 乳腺癌細(xì)胞，廢除SN-38^ 誘導(dǎo)的S和G2-M期檢測(cè)點(diǎn)，且增強(qiáng)凋亡。p53缺失增強(qiáng) CHIR-124造成的G2-M檢測(cè)點(diǎn)廢除和誘導(dǎo)的凋亡。
激酶實(shí)驗(yàn) Chk1 檢測(cè)
Chk1 檢測(cè)中，激酶域在 Sf9 昆蟲細(xì)胞中表達(dá)，含Chk1/Chk2 磷酸化位點(diǎn)的生物素化cdc25c肽，(*)(生物素-[AHX]SGSGS*GLYRSPSMP-ENLNRPR[CONH2]) 作為底物。連續(xù)稀釋的CHIR-124 與激酶反應(yīng)buffer混合，激酶反應(yīng)buffer含終濃度為30 mM Tris-HCl(pH 7.5), 10 mM MgCl2, 2 mM DTT, 4 mM EDTA, 25 mM β-glycerophosphate, 5 mM MnCl2,0.01% 牛血清蛋白,1.35 nM CHK1 激酶域, 0.5 AM 肽底物, 和1 AM 未標(biāo)記的ATP,及 5 nM 33Pγ-標(biāo)記的 ATP (比活= 2,000 Ci/mmol)。通過放射法進(jìn)行反應(yīng)和磷酸轉(zhuǎn)移。反應(yīng)在室溫下進(jìn)行1到4小時(shí)，在含反應(yīng)終止buffer(25 mM EDTA, 50 mM HEPES, pH 7.5)的鏈霉素包被的酶標(biāo)儀上捕獲磷酸化肽。使用Europium標(biāo)記的抗磷酸酪氨酸抗體PT66，通過DELFIA TRF系統(tǒng)測(cè)量磷酸肽。使用非線性回歸，通過XL-Fit數(shù)據(jù)分析軟件 version 4.1計(jì)算CHIR-124達(dá)到IC50所需的濃度。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞系 MDA-MB-231, MDA-MB-435, SW-620, 和COLO 205 細(xì)胞
濃度 0-2350 nM, 根據(jù)細(xì)胞類型
孵育時(shí)間 48 小時(shí)
方法

對(duì)數(shù)期MDA-MB-231, MDA-MB-435, SW-620, 和 COLO 205 細(xì)胞接種到 96孔板上。在6種不同濃度camptothecin 或 0 nM camptothecin存在時(shí)，CHIR-124連續(xù)稀釋。在無CHIR-124存在時(shí)，也連續(xù)稀釋Camptothecin?；衔锛拥?6孔板的細(xì)胞中，然后在37oC下溫育48小時(shí)。每種處理?xiàng)l件進(jìn)行一式三份。通過MTS 內(nèi)鹽實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖。MTS 內(nèi)鹽加到孔板中，再溫育3小時(shí)，然后使用酶標(biāo)儀在490 nm下測(cè)定吸光值。組合中所使用的每種藥物濃度必需達(dá)到抑制50%，這樣才能繪制等效圖。根據(jù)Loewe疊加方程 (1= DA/IC50,A+ DB/IC50,B), 進(jìn)行藥物相互等效分析，其中IC50,A 和IC50,B 為每種藥物單獨(dú)作用抑制50%所需的濃度，DA和DB為聯(lián)用總體抑制達(dá)50%時(shí)所需的每種藥物濃度。每個(gè)圖像中存在一個(gè)對(duì)角線。低于該線的數(shù)據(jù)點(diǎn)表示協(xié)同作用，而高于該線的數(shù)據(jù)點(diǎn)表現(xiàn)拮抗作用。

化學(xué)信息&溶解度

分子量 419.91 分子式

C23H22ClN5O
CAS號(hào) 405168-58-3 SDF Download CHIR-124 SDF
Smiles C1CN2CCC1C(C2)NC3=C(C(=O)NC4=C3C=C(C=C4)Cl)C5=NC6=CC=CC=C6N5
儲(chǔ)存條件(自收到貨起)

體外溶解度
批次：

DMSO : 7 mg/mL ( (16.67 mM) ；DMSO吸濕會(huì)降低化合物溶解度，請(qǐng)使用新開封DMSO)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

摩爾濃度計(jì)算器

體內(nèi)溶解度
批次：

現(xiàn)配現(xiàn)用，請(qǐng)按從左到右的順序依次添加，澄清后再加入下一溶劑

 動(dòng)物體內(nèi)配方計(jì)算器

實(shí)驗(yàn)計(jì)算

摩爾濃度計(jì)算器

質(zhì)量 濃度 體積 分子量

動(dòng)物體內(nèi)配方計(jì)算器（澄清溶液）

第一步：請(qǐng)輸入基本實(shí)驗(yàn)信息（考慮到實(shí)驗(yàn)過程中的損耗，建議多配一只動(dòng)物的藥量）

mg/kg g μL 只

第二步：請(qǐng)輸入動(dòng)物體內(nèi)配方組成（配方適用于不溶于水的藥物；不同批次藥物配方比例不同，請(qǐng)聯(lián)系Selleck為您提供正確的澄清溶液配方）

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

計(jì)算結(jié)果：

工作液濃度： mg/ml；

DMSO母液配制方法： mg 藥物溶于μL DMSO溶液（母液濃度mg/mL，注：如該濃度超過該批次藥物DMSO溶解度，請(qǐng)先聯(lián)系Selleck）；

體內(nèi)配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL PEG300，混勻澄清后加入μL Tween 80，混勻澄清后加入μL ddH2O，混勻澄清。

體內(nèi)配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL Corn oil，混勻澄清。

注意：1. 首先保證母液是澄清的；
2.一定要按照順序依次將溶劑加入，進(jìn)行下一步操作之前必須保證上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用渦旋、超聲或水浴加熱等物理方法助溶。

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