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CW069
CW069 是一種變構(gòu)選擇性microtubule motor protein HSET抑制劑，IC50為75 μM, 其選擇性顯著高于KSP.
CW069 Chemical Structure
CAS: 1594094-64-0
產(chǎn)品質(zhì)控
CW069相關(guān)產(chǎn)品
相關(guān)信號(hào)通路圖
生物活性
| 產(chǎn)品描述 | CW069 是一種變構(gòu)選擇性microtubule motor protein HSET抑制劑，IC50為75 μM, 其選擇性顯著高于KSP. | ||
|---|---|---|---|
| 特性 | 變構(gòu)的，HSET-選擇性抑制劑。 | ||
| 靶點(diǎn) |
|
| 體外研究(In Vitro) | ||||
| 體外研究活性 | CW069增加含有多余中心體的N1E-115細(xì)胞中多級(jí)紡錘體，而不改變正常人皮膚成纖維細(xì)胞中兩極紡錘體的形態(tài)。CW069抑制癌癥N1E-115細(xì)胞的生長，IC50 為10 μM，但是不影響NHDF或原代人骨髓細(xì)胞的生長。[1] | |||
|---|---|---|---|---|
| 激酶實(shí)驗(yàn) | 體外酶催化的ATPase試驗(yàn) | |||
| 優(yōu)化該協(xié)議用于全長，N端，6His標(biāo)記的HSET 和KSP，并測(cè)量MT-刺激的蛋白質(zhì)活性。通過丙酮酸激酶/乳酸脫氫酶反應(yīng)將ATP的水解與NADH的氧化耦合，從而以分光光度法觀察HSET/KSP 的Gsp合成酶活性的抑制。試驗(yàn)通過將純化的Gsp合成酶/酰胺酶(12.8 nM)加入試驗(yàn)混合物起始，試驗(yàn)混合物包含以下成分(終濃度)：6 nM蛋白質(zhì)，0.07 mg/ml MTs (大學(xué)生物制劑)，1.56 mM 谷胱甘肽，10 mM 亞精胺，2 mM ATP，2.7 mM MgCl2，1 mM磷酸(烯醇)-丙酮酸，0.2 mM NADH，50 μg/ml 乳酸脫氫酶，100 μg/ml 丙酮酸激酶，以及不同濃度的抑制劑，均溶解在50 mM Na PIPES (pH 6.8)中，溫度為37°C。ADP-Glo檢測(cè)試驗(yàn)(Promega)根據(jù)制造商的指示進(jìn)行。所有化合物使用多點(diǎn)BioMek Nxp進(jìn)行。板使用Pherastar酶標(biāo)儀讀取。 | ||||
| 細(xì)胞實(shí)驗(yàn) | 細(xì)胞系 | N1E-115細(xì)胞，NHDF和初級(jí)人骨髓細(xì)胞 | ||
| 濃度 | ~400 μM | |||
| 孵育時(shí)間 | 72小時(shí) | |||
| 方法 | 細(xì)胞在DMEM中在37°C和5% CO2下培養(yǎng)，用10%胎牛血清(FCS)增補(bǔ)。在磺酰羅丹明B比色(SRB)試驗(yàn)中，所有使用的化合物溶解在DMSO中，并在培養(yǎng)基中稀釋為0.2% DMSO的終濃度。對(duì)于SRB試驗(yàn)和活細(xì)胞成像，將細(xì)胞以2,500細(xì)胞/孔的密度接種在96孔板。24小時(shí)后，細(xì)胞用化合物處理72小時(shí)，每個(gè)濃度重復(fù)3個(gè)孔。對(duì)于SRB試驗(yàn)，細(xì)胞隨后用三氯乙酸(TCA)固定，并用SRB著色。熒光性使用Infinite 200 PRO板閱讀器在545 nm波長下定量?；衔锾幚淼目着c溶劑對(duì)照孔進(jìn)行比較，導(dǎo)致50%溶劑對(duì)照組細(xì)胞生長的化合物濃度定為IC50濃度，使用Graphpad PRISM 6計(jì)算。每個(gè)試驗(yàn)至少進(jìn)行三次生物學(xué)平行測(cè)定。 | |||
化學(xué)信息&溶解度
| 分子量 | 500.33 | 分子式 | C23H21IN2O3 |
| CAS號(hào) | 1594094-64-0 | SDF | Download CW069 SDF |
| Smiles | C1=CC=C(C=C1)CC(C(=O)NC2=C(C=C(C=C2)I)C(=O)O)NCC3=CC=CC=C3 | ||
| 儲(chǔ)存條件(自收到貨起) | |||
|
體外溶解度 |
DMSO : 100 mg/mL ( (199.86 mM) ；DMSO吸濕會(huì)降低化合物溶解度，請(qǐng)使用新開封DMSO) Ethanol : 4 mg/mL (7.99 mM) Water : Insoluble |
摩爾濃度計(jì)算器 |
|
體內(nèi)溶解度 現(xiàn)配現(xiàn)用，請(qǐng)按從左到右的順序依次添加，澄清后再加入下一溶劑 |
動(dòng)物體內(nèi)配方計(jì)算器 | ||||
實(shí)驗(yàn)計(jì)算
摩爾濃度計(jì)算器
動(dòng)物體內(nèi)配方計(jì)算器（澄清溶液）
第一步：請(qǐng)輸入基本實(shí)驗(yàn)信息（考慮到實(shí)驗(yàn)過程中的損耗，建議多配一只動(dòng)物的藥量）
mg/kg
g
μL
只
第二步：請(qǐng)輸入動(dòng)物體內(nèi)配方組成（配方適用于不溶于水的藥物；不同批次藥物配方比例不同，請(qǐng)聯(lián)系Selleck為您提供正確的澄清溶液配方）
% DMSO
%
% Tween 80
% ddH2O
%DMSO
%
計(jì)算結(jié)果：
工作液濃度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 藥物溶于μL DMSO溶液（母液濃度mg/mL，注：如該濃度超過該批次藥物DMSO溶解度，請(qǐng)先聯(lián)系Selleck）；
體內(nèi)配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL PEG300，混勻澄清后加入μL Tween 80，混勻澄清后加入μL ddH2O，混勻澄清。
體內(nèi)配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL Corn oil，混勻澄清。
注意：1. 首先保證母液是澄清的；
2.一定要按照順序依次將溶劑加入，進(jìn)行下一步操作之前必須保證上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用渦旋、超聲或水浴加熱等物理方法助溶。
技術(shù)支持
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