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別名: RAD51 inhibitor 1
RI-1 (RAD51 inhibitor 1)是RAD51抑制劑,IC50為5至30 μM。
RI-1 Chemical Structure
CAS: 415713-60-9
產品描述 | RI-1 (RAD51 inhibitor 1)是RAD51抑制劑,IC50為5至30 μM。 | ||
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靶點 |
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體外研究(In Vitro) | ||||
體外研究活性 | RI-1通過直接和特異破壞HsRAD51和抑制RAD51,形成對單鏈DNA細絲的能力,提高細胞對DNA損傷的敏感性。此外,在所有三種癌細胞株(HeLa細胞,MCF-7和U2OS)中,RI-1單獨產生單劑毒性,LD50值在20-40微米范圍內。[1] RI-1減少了在G2期細胞的γ-H2AX灶,并導致在輻射6小時后未修復DNA雙鏈斷裂的升高。[2] | |||
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激酶實驗 | DNA結合檢測 | |||
所有反應均在黑色非結合性聚苯乙烯384孔板中進行,反應體積為30-100微升。純化的DNA鏈交換的蛋白質和化學化合物預先在室溫下孵育5分鐘;然后進一步在37 ℃下孵育30分鐘,使用100nM的單鏈DNA底物,它由在5'末端Alexa 488標簽的45 -聚體的多-dT(合成并通過綜合的DNA技術進行純化)組成。反應在20 mM HEPES (pH值7.5), 10毫摩爾氯化鎂,0.25 μM BSA,2%甘油,30 mM氯化鈉,4%DMSO和2毫摩爾ATP中進行。有些條件包括DTT或TCEP (三(2-羧乙基)膦)所指示。DNA結合是在Safire2酶標儀中測量熒光偏振(FP),使用以下設置:激發(fā)470 ± 5 nm,發(fā)射530 ± 5 nm,10測/孔,Z軸高度和G因子從對照孔自動校準。顯示誤差棒表示標準偏差。涉及蛋白質濃度的滴定實驗中,數(shù)據(jù)擬合到該帳戶用于協(xié)同性質由重組酶蛋白與DNA結合的方程式。對于涉及RI- 1的滴定實驗中,蛋白質濃度為在不存在RI- 1得到的FP信號的?80%的飽和度。 | ||||
細胞實驗 | 細胞系 | HeLa, MCF-7和U2OS細胞 | ||
濃度 | ~35 μM | |||
孵育時間 | 24 小時 | |||
方法 | 細胞毒性是通過克隆形成能力的損失來確定。實驗一式三份進行。結晶紫染色的菌落用CCD照相機成像,并使用NIH圖像軟件計數(shù)。誤差線表示標準誤差 |
分子量 | 361.61 | 分子式 | C14H11Cl3N2O3 |
CAS號 | 415713-60-9 | SDF | Download RI-1 SDF |
Smiles | C1COCCN1C2=C(C(=O)N(C2=O)C3=CC(=C(C=C3)Cl)Cl)Cl | ||
儲存條件(自收到貨起) | |||
體外溶解度 |
DMSO : 50 mg/mL ( (138.27 mM) ;DMSO吸濕會降低化合物溶解度,請使用新開封DMSO) Water : Insoluble Ethanol : Insoluble |
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體內溶解度 現(xiàn)配現(xiàn)用,請按從左到右的順序依次添加,澄清后再加入下一溶劑 |
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第一步:請輸入基本實驗信息(考慮到實驗過程中的損耗,建議多配一只動物的藥量)
第二步:請輸入動物體內配方組成(配方適用于不溶于水的藥物;不同批次藥物配方比例不同,請聯(lián)系Selleck為您提供正確的澄清溶液配方)
計算結果:
工作液濃度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 藥物溶于μL DMSO溶液(母液濃度mg/mL,注:如該濃度超過該批次藥物DMSO溶解度,請先聯(lián)系Selleck);
體內配方配制方法:取μL DMSO母液,加入μL PEG300,混勻澄清后加入μL Tween 80,混勻澄清后加入μL ddH2O,混勻澄清。
體內配方配制方法:取μL DMSO母液,加入μL Corn oil,混勻澄清。
注意:1. 首先保證母液是澄清的;
2.一定要按照順序依次將溶劑加入,進行下一步操作之前必須保證上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用渦旋、超聲或水浴加熱等物理方法助溶。
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