"HSC-4 epithelioid cells人口腔鱗癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 L 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE-1細胞、HPAF-II/CD18細胞、H711細胞 ssMCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞 JROECL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞 細胞生長:貼壁 HSC-4 epithelioid cells人口腔鱗癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:1 x 10^5 cells/10cm dish LLC-PK(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞 McArdle RH-7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞 C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HaCaT細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、Hs445細胞 Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞 PA I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 HSC-4 epithelioid cells人口腔鱗癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞 培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 GM00637B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neukoplast細胞、L-M(TK-)細胞、alphaTC1 Clone 6細胞 MDAMB330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sarcoma OSteogenic-2細胞、OsA-CL細胞、MADISON LUNG TA-109細胞 SKG3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞 SCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞 RPMI No. 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2081細胞、MDA-MB-231 #4175細胞、SK-OV-3細胞 SUDHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98-G細胞、NEC-8細胞、KP 4細胞 H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞 HCT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-295細胞、CNE1細胞、SK.MEL.28細胞 Me-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM細胞、HO1-N-1細胞、SW837細胞 Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞 HSC-4 epithelioid cells人口腔鱗癌細胞系 HEK 293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞 MAntle cell VERona-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞 SUM-149細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAMOS2G64C10細胞、HMEC-1細胞、KYSE-150細胞 H-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞 CEM/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2106細胞、DH-82細胞、NK-92.05細胞 NCI-H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞 NCI-H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞 UM-UC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM88細胞、YT細胞、C3H/10T1/2細胞 H4-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-624細胞、CESS細胞、THEECs細胞 BSC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta-519細胞、SNU-119細胞、H69/P細胞 NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞 Capan-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞 KYSE 450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞 CAL39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞 KU-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞 Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞 MS 751細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA5細胞、BALB 3T3 clone A31細胞、NCI-H520細胞 HT144-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞 HEM-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞 J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞 MUM2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞 NPA'87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis-Lung細胞、HBZY1細胞、87 MG細胞 MAVER-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-193細胞、NCI-H2170細胞、SNU-520細胞 COLO 320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞 BMSC/hBMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-398細胞、H-820細胞、251MG細胞 LIPF155C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞 Panc-10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA432_Bast細胞、GP2-293細胞、Rat1細胞 CAL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-1846細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、F-81細胞 F442-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞 KYSE50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMVEC細胞、OCI-Ly10細胞、EJ-1細胞 H-1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞 SUM190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞 H-1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞 SKMEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞 OsACL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞 CCRF SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞 Jurkat Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE2Z細胞、D-324MED細胞、RIN-m細胞 NCTC1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞 NCTC1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞 NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞 Pt K2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞 ECGI10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CG4細胞、BDCM細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞 H-2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞 Pt K2 (NBL-5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP69SV40T細胞、Cor L88細胞、NCIH1650細胞 H-2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞 PFSK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞 CAL85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞 H-446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞 G292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb 2細胞、HS940細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞 H-740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 812細胞、H-1436細胞、HNE-2細胞 KNS-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-388D1細胞、mRMEC細胞、T47-D細胞 HSC-4 epithelioid cells人口腔鱗癌細胞系 Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:18G3.cl 1細胞、NCIH226細胞、Pa16C細胞 C-33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PVEC細胞、NCIH1184細胞、Panc-08.13細胞 Hs 839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H661細胞、NCI-BL6細胞、MDA-MB-436細胞 SKG IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578T細胞、HSC4細胞、KP-N-RT-BM-1細胞 "
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