苦味苷 II 對(duì)肝細(xì)胞凋亡的抑制作用。

探討 Picroside II 對(duì)肝細(xì)胞凋亡的影響及其機(jī)制。
方法和結(jié)果：
分別在透射電子顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)下測(cè)定凋亡細(xì)胞的形態(tài)變化和定量。通過瓊脂糖凝膠電泳觀察 DNA 片段化。半定量逆轉(zhuǎn)錄-PCR （RT-PCR） 分析 bcl-2 和 bax 基因的表達(dá)。Marland 法檢測(cè)肝臟線粒體中錳超氧化物歧化酶 （SOD） 的含量。采用硫代巴比妥酸比色法和 Lowry 法測(cè)定肝組織中丙二醛 （MDA） 含量和蛋白水平。Picroside II 降低了 D-GalN 和 LPS 誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的水平;它還降低了 MDA 的含量，從而提高了 SOD 的活性。發(fā)現(xiàn) Picroside II 10 mg/kg 以劑量依賴性方式保護(hù)肝細(xì)胞免受細(xì)胞凋亡;它上調(diào) Bcl-2 基因的表達(dá)，從而提高 Bcl-2/Bax 比率。
結(jié)論：
Picroside II 可以保護(hù)肝細(xì)胞免受損傷并防止肝細(xì)胞凋亡。它可能通過上調(diào) bcl-2 基因表達(dá)和抗氧化作用。

Picroside II 通過 TLR4/NF-κB 通路保護(hù)大鼠腎臟免受缺血/再灌注誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激和炎癥。

Picroside II 具有廣泛的藥理作用，并已被證明可以改善腦缺血和再灌注 （I/R） 損傷。然而，其對(duì)腎臟 I/R 損傷的影響仍不清楚。在本研究中，研究了 Picroside II 在大鼠腎 I/R 損傷模型中減輕氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)中的作用。
方法和結(jié)果：
Sprague Dawley 大鼠缺血 45 min，再灌注 24 h。在再灌注之前，大鼠用 Picroside II 或等體積的磷酸鹽緩沖鹽水處理。比較腎功能和組織學(xué)變化，檢測(cè)氧化應(yīng)激和炎癥的相關(guān)參數(shù)。通過免疫組織化學(xué)和蛋白質(zhì)印跡法評(píng)估 toll 樣受體 4 （TLR4） 和核因子 κB （NF-κB;p65） 的表達(dá)。據(jù)觀察，用 Picroside II 治療后腎功能得到顯著改善。形態(tài)學(xué)分析表明，Picroside II 顯著降低了組織損傷以及 TLR4 和 NF-κB 的表達(dá)。逆轉(zhuǎn)錄-定量聚合酶鏈反應(yīng)表明，Picroside II 抑制 I/R 損傷誘導(dǎo)的腫瘤壞死因子 （TNF）-α 、白細(xì)胞介素 （IL）-1β 和細(xì)胞間粘附分子 （ICAM）-1 表達(dá)的增加。Western blot 分析顯示，與 I/R 組相比，Picroside II 組 TLR4 和 NF-κB 的表達(dá)水平顯著下調(diào)。
結(jié)論：
這些結(jié)果表明，Picroside II 治療抑制了 TLR4/NF-κB 信號(hào)通路，保護(hù)腎組織免受 I/R 誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)。

苦味苷 II 在局灶性腦缺血大鼠模型中的神經(jīng)保護(hù)特性。

本研究的目的是探討 Picroside II 對(duì)雄性 Wistar 大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞/再灌注后神經(jīng)元凋亡以及 caspase-3 和聚 ADP-核糖聚合酶 （PARP） 表達(dá)的影響。
方法和結(jié)果：
Picroside II （10 mg/kg） 靜脈注射到動(dòng)物的尾靜脈中。用 Bederson 試驗(yàn)評(píng)估神經(jīng)功能缺陷，用氯化四唑 （TTC） 染色觀察腦梗死體積。通過原位末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的生物素化脫氧尿嘧啶三磷酸缺口末端標(biāo)記 （TUNEL） 測(cè)定對(duì)凋亡細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。免疫組化染色和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) （ELISA） 測(cè)定腦組織中 caspase-3 和 PARP 的表達(dá)。結(jié)果顯示，對(duì)照組大鼠缺血 2 小時(shí)后再灌注 22 小時(shí)后出現(xiàn)神經(jīng)功能缺陷和缺血半球腦梗死。Caspase-3 和 PARP 在皮層、紋狀體和海馬體中的表達(dá)也很嚴(yán)重，同時(shí)該組凋亡細(xì)胞增加。治療組 Bederson 評(píng)分、梗死體積、caspase-3 和 PARP 表達(dá)以及細(xì)胞凋亡，但與對(duì)照組相比顯著降低。
結(jié)論：
表明 Picroside II 靜脈內(nèi)治療可能有利于抑制神經(jīng)元凋亡，從而改善腦缺血再灌注損傷大鼠的神經(jīng)功能。

苦味苷 II 的抗炎作用及治療劑量和時(shí)間窗對(duì)大鼠腦缺血損傷的優(yōu)化

目的是通過正交試驗(yàn)優(yōu)化 picrosede II 在大鼠腦缺血損傷中的抗炎作用以及治療劑量和時(shí)間窗。
方法和結(jié)果：
通過雙側(cè)頸總動(dòng)脈閉塞 （BCCAO） 方法在 30 只 Wistar 大鼠中建立前腦缺血模型。將成功模型根據(jù)正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)隨機(jī)分為 16 組，在不同缺血時(shí)間腹腔注射 Picroside II，不同劑量。采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清和腦組織中水通道蛋白 4 （AQP4） 、基質(zhì)金屬蛋白酶 9 （MMP9） 和環(huán)氧合酶 2 （COX2） 的濃度，評(píng)價(jià) Picroside II 對(duì)腦缺血性損傷的治療效果。Picroside II 在腦缺血性損傷中的最佳治療時(shí)間窗口和劑量為 1） 根據(jù)血清和腦組織中 AQP4 的濃度，缺血 2.0 h 20 mg/kg 和 1.5 h 20 mg/kg 體重;2） 根據(jù)血清和腦組織中 MMP9 的濃度，缺血 1.5 h 20 mg/kg 和缺血 2.0 h 20 mg/kg;3） 根據(jù)血清和腦組織中 COX2 的濃度，缺血 1.5 h 和 10 mg/kg 和 20 mg/kg 缺血 1.5 h。根據(jù)最低治療劑量、最長(zhǎng)時(shí)間窗的原則，最佳治療劑量和時(shí)間窗為腦缺血損傷缺血 1.5 - 2.0 h 腹腔注射 Picroside II，體重為 10 - 20 mg/kg 體重。

Picroside II 通過調(diào)節(jié)脂肪酸攝取和合成來減弱 HepG2 細(xì)胞中的脂肪酸積累。

細(xì)胞系：HepG2 細(xì)胞
濃度：0-300 μM
孵育時(shí)間：24 小時(shí)
方法：
HepG2 細(xì)胞加載不同濃度的 FFA、苦味苷 I、苦木苷 II 和水飛薊賓 24 小時(shí)。通過 MTT 測(cè)定法測(cè)量細(xì)胞毒性。

Picroside II 通過抑制腦缺血再灌注損傷中的氧化信號(hào)通路來保護(hù)血腦屏障。

動(dòng)物模型：成年雄性Wistar大鼠
配方：生理鹽水
劑量：20 mg/kg
給藥：腹腔注射